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1.
【目的】用蛋白组学方法,通过对膝关节骨关节炎患者及正常人群血清蛋白的比较,寻找差异表达蛋白并探讨其与骨关节炎致病机理的关系。【方法】选取2007年10月到12月10例在中山大学附属第三医院骨科住院治疗的膝关节骨关节炎患者为实验组;10名性别相同,年龄、身体质量指数值相约的健康志愿者为对照组,分析2组双向电泳结果,并对差异表达蛋白进行质谱鉴定。【结果】通过双向电泳图普比较发现7个差异表达蛋白,其中6个在关节炎组中呈低表达,1个呈高表达。经质谱鉴定为分别为：6个低表达蛋白分别为对氧磷酶1、对氧磷酶3、d-1-微球蛋白／bikunin前体蛋白、载脂蛋白M、免疫球蛋白轻链、四连接素,高表达蛋白为载脂蛋白LI。【结论】膝关节骨关节炎血清表达差异蛋白：对氧磷酶1、对氧磷酶3、d-1-微球蛋白／bikunin前体蛋白、载脂蛋白M、免疫球蛋白轻链、四连接素、载脂蛋白u可能与骨关节炎的发病或病情进展具有-定的相关性。 相似文献
2.
【目的】 优化双向凝胶电泳的实验步骤,总结出一套适用于原发性肝癌组织的双向凝胶电泳技术｡【方法】 对双向电泳实验中的关键环节:样本处理､上样方法､聚焦条件等进行研究与优化,考马斯亮蓝染色后进行凝胶图像比较｡ 【结果】 采用7 mmol /L尿素､2 mol /L硫脲､40 g/L CHAPS､100 mmol /L DTT､5 g/L (pH 3-10) IPG buffer,1 mmol /L PMSF作为裂解液,丙酮沉淀蛋白,主动水化上样法,聚焦电压达到140 kV可以得到分辨率高､重复性好的结果｡ 【结论】 上述改良提高了2-D图谱中蛋白位点的分辨率和重复性,为原发性肝癌组织的蛋白质组学研究奠定了基础｡ 相似文献
3.
【目的】 分析胰腺实性-假乳头状瘤(SPN)的临床病理特征及免疫组织化学表达情况,寻找其相对特异的免疫组化诊断标记｡ 【方法】 HE染色观察10例病例形态学特征,免疫组织化学检测其细胞角蛋白､波形蛋白､CD56､CD10､嗜铬素A､突触素､神经元特异性烯醇酶､α-1抗胰蛋白酶､孕激素受体和E-钙粘素､β-连环蛋白及cyclin D1的表达｡另选5例正常胰腺组织作对照｡ 【结果】 10例SPN中6例为女性,4例为男性,年龄17 ~ 41岁,平均29岁｡全部病例随访至今均存活,未发生复发或转移｡肿瘤组织囊实性外观,镜下呈实性假乳头状结构｡10例中,Vim､CD56及PR均弥漫阳性,9例NSE(+),7例CD10(+),6例Syn(+),5例CK及α-AT(+),4例CgA(+)｡5例正常胰腺组织E-cadherin与β-catenin均为细胞膜表达,且cyclin D1(-);在10例SPN中,均未见E-cadherin的胞膜表达,仅2例中少数肿瘤细胞核阳性;β-catenin为核/胞浆异常表达;且cyclin D1均为阳性｡ 【结论】 在SPN中,E-cadherin为阴性或胞核阳性,而β-catenin呈异常表达;SPN中Vim､CD56､PR､CD10阳性以及E-cadherin与β-catenin的表达情况为该肿瘤诊断相对特异的免疫组化指标｡ 相似文献
4.
【目的】 探讨氧控制性再灌注(OCR)对体外循环肺缺血再灌注(I/R)早期损伤的作用｡ 【方法】 14只健康犬随机分为对照组(I/R,n = 7)和实验组(OCR, n = 7)｡对照组全程FiO2 80%;实验组在主动脉开放即刻调整FiO2至40%,随后每5 min依次上调10%,最后达80%,其余时段均维持FiO2 80%｡检测动脉血气,观察两组犬在麻醉后､主动脉开放前､开放后5､10､15､20､25 min以及停机前动脉血氧分压的变化｡在开胸后即刻(T1)､主动脉开放25 min(T2)､主动脉开放90 min(T3)分别留取血液标本及肺标本｡酶联免疫吸附法检测血清白介素6和肿瘤坏死因子α含量;检测肺组织干湿重比;比色法检测肺组织髓过氧化物酶活性､丙二醛含量;Western Blot检测肺组织核因子kappa B 蛋白含量;光镜观察并盲法评分比较肺组织病理学变化｡ 【结果】 实验组动脉血氧分压在主动脉开放后5､10､15､20 min均明显低于对照组(P < 0.05)｡两组相比,实验组血清白介素6和肿瘤坏死因子α含量在T2和T3时点较对照组降低(P < 0.05)｡实验组肺组织干湿重比､髓过氧化物酶活性､丙二醛含量和核因子kappa B 蛋白表达在T2和T3时点较对照组降低(P < 0.05)｡实验组肺损伤评分在T2和T3时点低于对照组(P < 0.05)｡ 【结论】 氧控制性再灌注可抑制体外循环肺缺血再灌注早期炎性细胞浸润,抑制核因子kappa B蛋白表达｡提示氧控制性再灌注对体外循环肺缺血再灌注早期损伤具有一定的保护作用｡ 相似文献
5.
【目的】 探讨大肠癌中转移相关基因1(MTA1)､缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白的表达及其与淋巴管生成的关系｡【方法】 用免疫组织化学SP法检测81例大肠癌中MTA1､HIF-1α蛋白的表达及D2-40标记的淋巴管密度｡【结果】 81例大肠癌中MTA1､HIF-1α阳性表达率分别为66.7%和63%,MTA1和HIF-1α的表达均与大肠癌Duke?蒺s分期和淋巴结转移相关(P < 0.05)而与组织学分级和浸润深度无关(P > 0.05),大肠癌中MTA1和HIF-1α蛋白表达呈正相关(P < 0.05),MTA1和HIF-1α蛋白过表达病例肿瘤旁淋巴管密度分别为18.4 ± 4.9､18.0 ± 5.3,高于MTA1和HIF-1α不表达和弱表达病例(15.6 ± 4.5､15.4 ± 4.2),两者的差异有统计学意义(P < 0.05)｡【结论】 MTA1和HIF-1α蛋白的过表达可能促进了大肠癌旁淋巴管的生成,在肿瘤淋巴结的转移中起一定作用｡ 相似文献
6.
【目的】 找出有坐骨神经痛的腰椎间盘突出症患者血清蛋白质组最明显的改变,揭示椎间盘突出可能的病理机制｡ 【方法】 选择有坐骨神经痛的腰椎间盘突出症患者10例作为病例组,志愿者10例作为对照组,取血,提取分离纯化血清蛋白,双向电泳,找到表达上差异最明显蛋白质,进行质谱鉴定｡所得差异蛋白应用酶联免疫吸附试验对另外10例腰椎间盘突出症患者及10例正常人血清表达浓度进行检测｡ 【结果】 在双向电泳图谱上有6个蛋白质的表达在两组间存在明显差异｡其中载脂蛋白L1以及两个白蛋白前体表达升高,载脂蛋白M､四连接素､免疫球蛋白轻链表达降低,酶联免疫吸附试验证实6种蛋白中的4种在血清里高表达,并与正常人存在差异｡【结论】 实验结果提示载脂蛋白L1､载脂蛋白M､四连接素､免疫球蛋白轻链的血清学水平可能作为腰椎间盘突出症的生物标志物,并可能进一步揭示腰椎间盘突出症的发病机制｡ 相似文献
7.
【目的】 探讨吗啡依赖小鼠大脑皮质细胞周期依赖性蛋白激酶-5(CDK5)与蛋白磷酯酶-2A(PP-2A)变化及其对神经细丝蛋白磷酸化的作用｡【方法】 雄性昆明小鼠28只,随机等分为对照组､吗啡依赖组､roscovitine(CDK5选择性拮抗剂)预处理组和脑室注射对照组;除对照组外所有小鼠皮下注射吗啡5 mg•kg-1•d-1,连续6 d;roscovitine预处理组于每次皮下注射吗啡30 min前予roscovitine预处理｡免疫印迹法检测神经细丝蛋白磷酸化水平､p-CDK5 (Ser159)和PP-2A表达水平｡【结果】 在吗啡依赖小鼠前额叶皮质,p-CDK5 (Ser159)表达增加,神经细丝蛋白过度磷酸化;应用CDK5的选择性抑制剂roscovitine预处理后,p-CDK5(Ser159)表达减少,神经细丝蛋白磷酸化水平降低;各组间PP-2A表达水平差异无统计学意义｡【结论】 CDK5活性失调可能诱导吗啡依赖小鼠神经细丝蛋白过度磷酸化｡ 相似文献
8.
【目的】 检测大鼠放射性口腔黏膜炎形成过程中病损局部组织内细胞因子,探讨其动态变化规律及意义｡【方法】 获取接受单次30 Gy X线照射后5 d､8 d､14 d的大鼠口腔黏膜组织,采用抗体芯片技术检测19种细胞因子;荧光定量PCR检测8种炎性相关因子的mRNA水平;ELISA定量检测IL-1α､IFN-γ､TIMP-1｡【结果】 抗体芯片技术检测到,照射后Frac､IL-4､IL-6､IL-10､TNF-α 5种细胞因子水平下降;IL-1β､LIX､VEGF､β-NGF 4种细胞因子照射前后水平无明显差异;照射后水平上升幅度 < 2倍的有CINC-2､GM-CGF､Leptin､MCP-1和MIP-3α 5种细胞因子,上升幅度≥2倍的有CINC-3､INF-γ､IL-1α和TIMP-1 4种细胞因子｡Real-time PCR检测到抗凋亡相关基因Bcl-2,以及IL-6､TNF-α､VEGF及IL-1β的mRNA表达水平下降;而促凋亡相关基因Bax､中性粒细胞局部募集相关基因CINC和TLR-9表达上升｡ IL-1α､IFN-γ､TIMP-1的ELISA检测结果与前两种检测结果一致｡【结论】 大鼠抗体芯片和荧光定量PCR､ELISA检测结果互相佐证了病损组织内的细胞因子在口腔黏膜炎发生､发展､演进中呈现分泌受阻和表达增加的动态变化并发挥调控作用｡ 相似文献
9.
【目的】 应用乙腈(ACN)预处理血清的方法,对肝细胞癌(HCC)患者的血清进行蛋白质组分析,寻找与HCC发病相关的蛋白质｡ 【方法】 收集原发性HCC患者和健康人的血清各12例,首先使用乙腈预处理,然后去除白蛋白和免疫球蛋白等高丰度蛋白质,再进行双向电泳(2-DE)分析,筛选HCC与健康对照血清中有显著性差异的蛋白质斑点,并进行MALDI-TOF/TOF质谱鉴定｡ 【结果】 血清经0%､20%和30%浓度的乙腈预处理后,进行2-DE分析发现蛋白质斑点的检出数量分别为532 ± 96､623 ± 102和674 ± 123;对预处理后HCC患者和正常人的血清进行差异分析,发现甲状腺素(Tetraiodo-L-Thyronine)和Proapolipoprotein的表达上调,而维生素D结合蛋白(Vitamin D-binding Protein)和铁传递蛋白(Transferrin)的表达下调｡ 【结论】 对血清样本的蛋白质组分析,应用乙腈预处理会增加与白蛋白非特异性结合的蛋白质的检出;HCC患者血清中甲状腺素等4个蛋白的表达异常与HCC相关｡ 相似文献
10.
【目的】 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)在多种肿瘤组织中均有表达,但其与胃癌关系的研究国内尚无报道｡本研究旨在检测中国人胃癌组织中mTOR的活化形式p-mTOR的表达,并探讨其与胃癌临床病理特征的关系｡ 【方法】 采用免疫组化方法检测181例胃癌组织中p-mTOR蛋白的表达情况,并结合患者的临床病理资料分析与其相关性｡ 【结果】 所检测的181例胃癌标本中p-mTOR蛋白表达阳性93例,阳性表达率为51.4%,p-mTOR阳性表达与胃癌的淋巴结转移及临床分期密切相关;而与年龄､性别､肿瘤大小､病理T分期等临床病理特征无显著性相关(P > 0.05)｡ 【结论】 p-mTOR蛋白在胃癌组织中的阳性表达与肿瘤进展相关,可能成为预测胃癌转移的新分子标志物和治疗靶点｡ 相似文献
