首页 | 官方网站   微博 | 高级检索  
相似文献
 共查询到20条相似文献,搜索用时 171 毫秒
1.
【目的】 用蛋白组学方法,通过对膝关节骨关节炎患者及正常人群血清蛋白的比较,寻找差异表达蛋白并探讨其与骨关节炎致病机理的关系。 【方法】 选取2007年10月到12月10例在中山大学附属第三医院骨科住院治疗的膝关节骨关节炎患者为实验组;10名性别相同,年龄、身体质量指数值相约的健康志愿者为对照组,分析2组双向电泳结果,并对差异表达蛋白进行质谱鉴定。 【结果】 通过双向电泳图普比较发现7个差异表达蛋白,其中6个在关节炎组中呈低表达,1个呈高表达。经质谱鉴定为分别为:6个低表达蛋白分别为对氧磷酶1、对氧磷酶3、α-1-微球蛋白/bikunin前体蛋白、载脂蛋白M、免疫球蛋白轻链、四连接素,高表达蛋白为载脂蛋白L1。【结论】 膝关节骨关节炎血清表达差异蛋白:对氧磷酶1、对氧磷酶3、α-1-微球蛋白/bikunin前体蛋白、载脂蛋白M、免疫球蛋白轻链、四连接素、载脂蛋白L1可能与骨关节炎的发病或病情进展具有一定的相关性。  相似文献   

2.
【目的】 探讨吗啡依赖小鼠大脑皮质细胞周期依赖性蛋白激酶-5(CDK5)与蛋白磷酯酶-2A(PP-2A)变化及其对神经细丝蛋白磷酸化的作用。【方法】 雄性昆明小鼠28只,随机等分为对照组、吗啡依赖组、roscovitine(CDK5选择性拮抗剂)预处理组和脑室注射对照组;除对照组外所有小鼠皮下注射吗啡5 mg•kg-1•d-1,连续6 d;roscovitine预处理组于每次皮下注射吗啡30 min前予roscovitine预处理。免疫印迹法检测神经细丝蛋白磷酸化水平、p-CDK5 (Ser159)和PP-2A表达水平。【结果】 在吗啡依赖小鼠前额叶皮质,p-CDK5 (Ser159)表达增加,神经细丝蛋白过度磷酸化;应用CDK5的选择性抑制剂roscovitine预处理后,p-CDK5(Ser159)表达减少,神经细丝蛋白磷酸化水平降低;各组间PP-2A表达水平差异无统计学意义。【结论】 CDK5活性失调可能诱导吗啡依赖小鼠神经细丝蛋白过度磷酸化。  相似文献   

3.
【目的】 探讨大肠癌中转移相关基因1(MTA1)&#65380;缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白的表达及其与淋巴管生成的关系&#65377;【方法】 用免疫组织化学SP法检测81例大肠癌中MTA1&#65380;HIF-1α蛋白的表达及D2-40标记的淋巴管密度&#65377;【结果】 81例大肠癌中MTA1&#65380;HIF-1α阳性表达率分别为66.7%和63%,MTA1和HIF-1α的表达均与大肠癌Duke?蒺s分期和淋巴结转移相关(P < 0.05)而与组织学分级和浸润深度无关(P > 0.05),大肠癌中MTA1和HIF-1α蛋白表达呈正相关(P < 0.05),MTA1和HIF-1α蛋白过表达病例肿瘤旁淋巴管密度分别为18.4 ± 4.9&#65380;18.0 ± 5.3,高于MTA1和HIF-1α不表达和弱表达病例(15.6 ± 4.5&#65380;15.4 ± 4.2),两者的差异有统计学意义(P < 0.05)&#65377;【结论】 MTA1和HIF-1α蛋白的过表达可能促进了大肠癌旁淋巴管的生成,在肿瘤淋巴结的转移中起一定作用&#65377;  相似文献   

4.
【目的】 探讨白细胞介素17(IL-17)&#65380;干扰素γ(IFN-γ)在不同类型慢性中耳炎(COM)中的表达水平及与骨质破坏的关系&#65377;【方法】 用免疫组织化学的方法检测了实验组37例慢性中耳炎病变组织(胆脂瘤中耳炎20例,非胆脂瘤中耳炎17例)和对照组18例(13例正常外耳道皮肤及5例正常中耳黏膜)中的IL-17&#65380;IFN-γ的表达&#65377;【结果】 IL-17在胆脂瘤中耳炎&#65380;非胆脂瘤中耳炎&#65380;外耳道皮肤及中耳黏膜中的阳性表达指数分别为(81.6 ± 20.0)%&#65380;(43.3 ± 25.7)%&#65380;(4.7 ± 1.9)%和(5.6 ± 2.3)%,实验组与对照组比较差异有统计学意义(P < 0.001);IFN-γ在胆脂瘤中耳炎&#65380;非胆脂瘤中耳炎&#65380;外耳道皮肤及中耳黏膜的阳性表达指数分别为(65.4 ± 24.0)%&#65380;(30.1 ± 24.5)%&#65380;(4.8 ± 1.8)%和(4.0 ± 1.6)%,实验组与对照组差异有统计学意义(P < 0.001);慢性中耳炎病变组织中IL-17(r = 0.685,P < 0.001)&#65380;IFN-γ(r = 0.662,P < 0.001)与骨质破坏程度均成正相关&#65377;【结论】 慢性中耳炎患者病变组织中的IL-17&#65380;IFN-γ表达水平的上调可能与该病骨质破坏的发生有关&#65377;  相似文献   

5.
【目的】 检测大肠癌组织及癌旁组织中CD137L mRNA及蛋白的表达情况,探讨其在大肠癌发生进展中的意义&#65377; 【方法】 运用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应及冰冻切片免疫组化的方法检测大肠癌组织及癌旁组织中CD137L的表达情况,并分析其表达情况与各临床因素的相关性&#65377; 【结果】 54例大肠癌组织中CD137L mRNA的相对表达水平为 0.035 ± 0.013,显著高于癌旁组织的0.008 ± 0.005(P < 0.05)&#65377;但在不同性别&#65380;年龄&#65380;肿瘤发生部位&#65380;Dukes分期&#65380;病理分化及血清CEA水平情况下,CD137L mRNA的表达水平无显著性差异(P > 0.05)&#65377;随机抽取8例大肠癌肿瘤组织及3例癌旁组织,进行免疫组化检测,结果显示6例CD137L蛋白呈阳性表达,CD137L表达于肿瘤细胞表面;3例癌旁组织该分子的表达均为阴性&#65377;【结论】 CD137L mRNA在大肠癌组织中高表达,CD137L分子表达于大肠癌肿瘤细胞表面,提示该分子可能在大肠癌的发生进展中发挥作用&#65377;  相似文献   

6.
【目的】 探讨氧控制性再灌注(OCR)对体外循环肺缺血再灌注(I/R)早期损伤的作用&#65377; 【方法】 14只健康犬随机分为对照组(I/R,n = 7)和实验组(OCR, n = 7)&#65377;对照组全程FiO2 80%;实验组在主动脉开放即刻调整FiO2至40%,随后每5 min依次上调10%,最后达80%,其余时段均维持FiO2 80%&#65377;检测动脉血气,观察两组犬在麻醉后&#65380;主动脉开放前&#65380;开放后5&#65380;10&#65380;15&#65380;20&#65380;25 min以及停机前动脉血氧分压的变化&#65377;在开胸后即刻(T1)&#65380;主动脉开放25 min(T2)&#65380;主动脉开放90 min(T3)分别留取血液标本及肺标本&#65377;酶联免疫吸附法检测血清白介素6和肿瘤坏死因子α含量;检测肺组织干湿重比;比色法检测肺组织髓过氧化物酶活性&#65380;丙二醛含量;Western Blot检测肺组织核因子kappa B 蛋白含量;光镜观察并盲法评分比较肺组织病理学变化&#65377; 【结果】 实验组动脉血氧分压在主动脉开放后5&#65380;10&#65380;15&#65380;20 min均明显低于对照组(P < 0.05)&#65377;两组相比,实验组血清白介素6和肿瘤坏死因子α含量在T2和T3时点较对照组降低(P < 0.05)&#65377;实验组肺组织干湿重比&#65380;髓过氧化物酶活性&#65380;丙二醛含量和核因子kappa B 蛋白表达在T2和T3时点较对照组降低(P < 0.05)&#65377;实验组肺损伤评分在T2和T3时点低于对照组(P < 0.05)&#65377; 【结论】 氧控制性再灌注可抑制体外循环肺缺血再灌注早期炎性细胞浸润,抑制核因子kappa B蛋白表达&#65377;提示氧控制性再灌注对体外循环肺缺血再灌注早期损伤具有一定的保护作用&#65377;  相似文献   

7.
【目的】 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)在多种肿瘤组织中均有表达,但其与胃癌关系的研究国内尚无报道&#65377;本研究旨在检测中国人胃癌组织中mTOR的活化形式p-mTOR的表达,并探讨其与胃癌临床病理特征的关系&#65377; 【方法】 采用免疫组化方法检测181例胃癌组织中p-mTOR蛋白的表达情况,并结合患者的临床病理资料分析与其相关性&#65377; 【结果】 所检测的181例胃癌标本中p-mTOR蛋白表达阳性93例,阳性表达率为51.4%,p-mTOR阳性表达与胃癌的淋巴结转移及临床分期密切相关;而与年龄&#65380;性别&#65380;肿瘤大小&#65380;病理T分期等临床病理特征无显著性相关(P > 0.05)&#65377; 【结论】 p-mTOR蛋白在胃癌组织中的阳性表达与肿瘤进展相关,可能成为预测胃癌转移的新分子标志物和治疗靶点&#65377;  相似文献   

8.
【目的】 观察神经生长因子(NGF)及TrKa阻断剂K252a对体外培养的人视网膜血管内皮细胞(HRCEC)增殖的影响&#65377; 【方法】 MTT法检测不同因子(NGF各浓度组&#65380;NGF + K252a各浓度组&#65380;bFGF组&#65380;bFGF + K252a组和正常培养液组)对正常和缺氧条件下培养的HRCEC的影响&#65377; 【结果】 随NGF浓度增加(20&#65380;50&#65380;100 ng/ml),HRCEC细胞数目明显增多(正常氧浓度NGF组分别为0.254 ± 0.033&#65380;0.696 ± 0.029&#65380;1.136 ± 0.051;缺氧条件相应各组为0.422 ± 0.036&#65380;0.798 ± 0.044&#65380;1.376 ± 0.052,P均 < 0.05)&#65377;随K252a浓度增加(50&#65380;100&#65380;200 nmol/L),NGF + K252a组正常氧浓度时分别为0.864 ± 0.067&#65380;0.496 ± 0.025&#65380;0.202 ± 0.078,缺氧条件时相应为1.042 ± 0.047&#65380;0.700 ± 0.065&#65380;0.401 ± 0.078,较同浓度NGF(100 ng/ml)组HRCEC细胞数目减少(P < 0.05),随K252a浓度增加HRCEC细胞数目减少趋势愈加显著(P均 < 0.05)&#65377;【结论】 NGF可促进HRCEC的增殖,该作用可被特异性TrkA阻断剂K252a所阻断&#65377;  相似文献   

9.
【目的】 检测骨肉瘤组织中MHC I类链相关蛋白A(MHC class I chain-related A,MICA)基因mRNA和蛋白的表达情况,为探讨骨肉瘤的肿瘤免疫机制提供信息&#65377; 【方法】 应用RT-PCR方法检测MICA mRNA在11例新鲜骨肉瘤组织和5个骨肉瘤细胞株中的表达情况;分别应用免疫组织化学方法&#65380;Western blot和流式细胞术检测66例石蜡包埋骨肉瘤组织&#65380;6例石蜡包埋正常人骨组织&#65380;9例新鲜骨肉瘤组织和5个骨肉瘤细胞株中MICA蛋白的表达情况&#65377; 【结果】 骨肉瘤组织中MICA mRNA表达率为81.8%(9/11),5个骨肉瘤细胞株均表达MICA mRNA;MICA蛋白在骨肉瘤组织和正常骨组织的表达率分别为51.6%(34/66)和0%(0/6);骨肉瘤细胞株Saos-2&#65380;MG63和HOS阳性表达膜表面MICA蛋白,而细胞株U2OS和OS732只有少量细胞呈阳性表达&#65377;【结论】 MICA mRNA和蛋白广泛表达于骨肉瘤组织和细胞株&#65377;  相似文献   

10.
不同牙体剩余量对石英纤维桩冠抗折性能的影响   总被引:4,自引:0,他引:4       下载免费PDF全文
【目的】 评价不同牙体剩余量对石英纤维桩复合树脂核全冠修复下颌前磨牙抗折性能的影响&#65377;【方法】 将正畸拔除的50颗单根前磨牙按颈部牙体剩余量分为5组(0&#65380;1&#65380;2&#65380;3 mm组和对照组),离体牙行纤维桩复合树脂核金属烤瓷全冠修复,使用速率为1 mm/min的45°角侧向加载&#65377;【结果】 牙体剩余量0&#65380;1&#65380;2&#65380;3 mm&#65380;对照组的荷载力均值分别为(601 ± 83)&#65380;(665 ± 59)&#65380;(950 ± 75)&#65380;(1005 ± 94)&#65380;(1027 ± 80) N; 0 mm和1 mm组的荷载力值小于2 mm和3 mm组以及对照组,差异具有统计学意义(P < 0.05)&#65377;【结论】 牙体剩余量为2 mm时,石英纤维桩冠修复体抗折强度与对照组无明显差异,可认为2 mm是非金属桩箍效应的临界值&#65377;  相似文献   

11.
目的 应用血清蛋白组学技术,对比分析燃煤污染型砷中毒患者与正常人血清中差异蛋白的表达,筛选与燃煤污染型砷中毒发生发展密切相关的蛋白质.方法 2008年收集经临床诊断的贵州燃煤污染型砷中毒患者和健康人空腹血清标本各6例,用双向凝胶电泳(2-DE)分离砷中毒患者血清和健康人血清的总蛋白质,银染显色后经图像分析识别差异表达的蛋白质,再应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定差异表达的蛋白质点.结果 两组血清2-DE图谱平均点数分别为779±35和865±30,匹配率为90.1%.筛选出两组间的差异蛋白点60个,砷中毒组表达上调25个,表达下调35个.对其中表达量差异3倍以上的35个蛋白点进行MALDI-TOF-MS分析,鉴定出包括角蛋白10、载脂蛋白A-V、转铁蛋白、α1抗胰蛋白酶、锌α2糖蛋白、细胞外信号调节激酶3、空泡分选蛋白33、O-GlcNAc糖基转移酶等13个蛋白质,其中5个蛋白质在砷中毒组表达上调,8个蛋白质在砷中毒组表达下调.结论 本研究建立了分辨率高、重复性较好的燃煤污染型砷中毒患者血清双向凝胶电泳图谱,识别并鉴定了一些与健康人血清差异表达的蛋白质,为进一步探讨地方性砷中毒发病机制,筛选燃煤污染型砷中毒早期特异性血清分子标志物奠定了初步基础.  相似文献   

12.
目的:用蛋白质组学技术比较重症急性胰腺炎(SAP)与轻症急性胰腺炎(MAP)患者血清的差异蛋白,探讨SAP特异蛋白的表达。方法:血清标本取自10例急性胰腺炎(AP)患者,其中5例SAP,5例MAP,用双向凝胶电泳检测两类患者的蛋白表达,并将这些差异表达蛋白点进行质谱鉴定,Mascot数据库检索。结果:比较双向电泳图谱发现15个差异表达蛋白点,经质谱分析,成功鉴定出10种蛋白质,在SAP患者其中4种表达上调,6种表达下调。数据库查询结果,4个表达上调蛋白分别为补体4A、结合珠蛋白亚型2、结合珠蛋白和载脂蛋白L1;6个表达下调蛋白分别为四连接素、谷胱甘肽过氧化物酶3、丝氨酸蛋白酶抑制剂亚型F1、丛生蛋白亚型-1、转甲状腺素蛋白、丝氨酸蛋白酶抑制剂A1亚型2。结论:SAP患者血清有差异蛋白质表达,这可能和SAP发病机制相关。  相似文献   

13.
[目的]利用蛋白质组学方法,识别乙胺丁醇处理前后耻垢分枝杆菌mc^2155细胞后差异表达的蛋白质,为进一步探讨乙胺丁醇抑制分枝杆菌生长的作用机制及寻找新的抗结核药物作用靶标奠定基础。[方法]采用载体两性电解质pH梯度双向凝胶电泳技术分离乙胺丁醇处理前后耻垢分枝杆菌mc^2155细胞的总蛋白质,用PDQuest7.3.1图像分析软件比较分析,以识别差异表达的蛋白质。[结果]空白对照组有268个斑点,Ethambutol(EMB)处理组有蛋白斑点195个,在相对分子质量和pI值分布的任一区域,EMB处理组蛋白斑点数均少于空白对照组,其中在EMB处理组中特异表达的蛋白质斑点有23个。[结论]乙胺丁醇处理前后耻垢分枝杆菌mc^2155细胞的蛋白质组具有差异,这种蛋白质组的差异分析有助于进一步研究乙胺丁醇抑制分枝杆菌生长的作用机制并为寻找新的抗结核药物作用靶标奠定基础。  相似文献   

14.

Background:

Multiple myeloma (MM) is a malignant tumor, which takes the second place in malignant blood disease. The clinical symptoms are complicated that make more difficult to diagnose and therapy. Lots of researches focus on the proteins about MM in order to solve those problems. We used proteomic methods to find potential biomarkers in MM patients.

Methods:

We applied the peptide ligand library beads (PLLBs) to deplete high abundance proteins in serum for finding potential pathogenic factors and biomarkers of MM. Using 1D-Gel-liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS), we identified 789 and 849 unique serum proteins in MM patients and in healthy controls, respectively.

Results:

Twenty-two proteins were found differentially expressed between the two groups including serum amyloid A protein, vitamin D-binding protein isoform-1 precursor, plasma kallikrein, and apolipoprotein A-I. Changes of integrin alpha-11 and isoform-1 of multimerin-1 were validated with Western blotting. The linkage of the differentially expressed proteins and the pathogenesis pathways of MM were discussed.

Conclusions:

PLLB combined with 1D-gel-LC-MS/MS analysis is an efficient method to identify differentially expressed proteins in serum from patients with MM.  相似文献   

15.
目的:利用蛋白质组学方法建立肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)及正常人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)的双向凝胶电泳图谱. 方法:利用固相pH梯度双向凝胶电泳分离HCC及正常人PBMC的总蛋白质,凝胶经蓝银显色后,采用PDQuest图像分析软件进行比较分析. 结果:得到了分辨率较高、重复性较好的HCC及正常人PBMC双向凝胶电泳图谱,平均蛋白质点数分别为1206±48及1123±37;组内的平均匹配率分别为90.8%及92.6%.结论:建立了分辨率高且重复性较好的HCC及正常人PBMC双向凝胶电泳图谱,为寻找恶性肿瘤早期诊断、治疗及预后监测的有效指标提供了一条新的途径.  相似文献   

16.
目的:比较癌胚抗原(CEA)阴性的人大肠癌组织与CEA阳性的人大肠癌组织之间的蛋白质表达差异。方法:收集大肠癌患者切除癌组织的新鲜标本,根据血清CEA分为阴性组、阳性组,同时取正常黏膜作对照组,提取各组组织的总蛋白,进行双向凝胶电泳和凝胶图谱差异分析,比较各组组织之间表达差异点,将这些差异蛋白点进行质谱分析数据库鉴定。结果:各组双向电泳胶上蛋白癍点图象清晰,阴性组和阳性组中差异表达的蛋白点18个,成功鉴定其中10个为9种蛋白质。其中,在阴性组中特异表达的蛋白质点为含波形蛋白的混合物1、肝脂肪酸结合蛋白,表达上调的蛋白质点为肌动蛋白结合蛋白22-a.、热休克蛋白27序列、血红蛋白B链突变体;在阳性组中特异表达的蛋白质点磷酸甘油醛异构酶、角蛋白10、角蛋白1,表达上调的蛋白质点为13微管蛋白链。结论:CEA阴性的人大肠癌组织与CEA阳性的人大肠癌组织存在蛋白质组差异表达,这些蛋白可能与大肠癌表达CEA有关。  相似文献   

17.
目的 采用双向电泳-质谱技术优化肿瘤抗原筛选方法,筛选鼻咽癌肿瘤抗原.方法 鼻咽癌转移组、鼻咽癌未转移组和正常对照组血清先采用高丰度蛋白去除、脱盐预处理等以优化双向电泳,图像分析3组血清图谱寻找差异蛋白质点,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱对差异蛋白质点进行鉴定.结果 通过调整、优化各个阶段的实验条件,实验结果比较稳定,重复性也比较好,分辨率得到一定的提高.图谱比较所得29个差异蛋白质点,成功鉴定了23种蛋白质.与正常组比较,转铁蛋白、锌指蛋白544、甲状腺激素结合蛋白、NM23-H1蛋白和FAD合成酶在两组鼻咽癌患者中低表达,12-脂氧合酶、血清淀粉样蛋白A1前体、细胞色素P450、sICAM-1、组织蛋白酶G和组蛋白赖氨酸特异性脱甲基酶1等在两组鼻咽癌中均高表达.其中12-脂氧合酶、sICAM-1、组织蛋白酶G和组蛋白赖氨酸特异性脱甲基酶1在鼻咽癌转移组中比未转移组中表达增高,而热休克蛋白70则只在鼻咽癌转移组表达.结论 双向电泳-质谱技术可发现鼻咽癌发生发展过程中血清蛋白表达谱质或量的变化,从而为鼻咽癌的早期诊断和治疗奠定基础.  相似文献   

18.
目的利用蛋白质组学方法研究慢性乙型肝炎肝郁脾虚、湿热中阻同病异证病人外周血总蛋白表达谱的变化,分析差异表 达蛋白质与证型之间的关系。方法通过双向凝胶电泳,获得了外周血浆差异蛋白表达图谱,经基质辅助激光解析飞行时间质 谱分析鉴定出差异表达的蛋白质。结果获得了慢性乙型肝炎中医肝郁脾虚和湿热中阻同病异证病人及健康人对照组血浆总 蛋白双向凝胶电泳银染图谱,健康组蛋白点为278±16个,肝郁脾虚证组为320±14个,湿热中阻证组为343±19个;通过对差异蛋 白质点进行质谱鉴定,共发现7个差异表达蛋白,主要包括免疫相关蛋白,炎症蛋白以及脂类代谢相关蛋白。结论慢性乙肝肝 郁脾虚和湿热中阻证型间存在多个差异表达蛋白,提示不同的蛋白质表达谱可能是同病异证的分子标签和证侯基础。  相似文献   

19.
BACKGROUND: The identification of factors related to obesity is very important for an early diagnosis of susceptibility to obesity and, accordingly, its prevention. The objective of the current study was to search for specific obesity-related factors in serum, as they can be measured non-invasively. MATERIAL/METHODS: Male Sprague-Dawley rats were fed a high-fat (HF) diet for eight weeks to generate obesity-prone (OP) and obesity-resistant (OR) rats. After blood sampling, serum proteome analysis was conducted using two-dimensional gel electrophoresis (2-DE) combined with mass spectrometry (MS). RESULTS: Apolipoprotein A-I (apo A-I), beta-actin, and vitamin D-binding protein (DBP) prepeptide were up-regulated in both the OP and OR rats. Two down-regulated haptoglobulins were observed in the OP and OR rats. Alpha1-macroglobulin (alpha1-M) and an unknown protein product were decreased in the OP rats compared with the OR rats. Alpha1-M was nearly undetectable in the OP rats from the 2-DE map and was further confirmed to be down-regulated by ELISA. CONCLUSIONS: The syntropic changes in the proteins apo A-I, beta-actin, DBP prepeptide, and haptoglobulin in the OP and OR rats might be a reflection of the HF diet. The unknown protein product should be isolated and identified. Alpha1-M is proved to be a potential serum factor related to obesity proneness and obesity resistance.  相似文献   

20.
目的:建立吗啡耐受大鼠腰段脊髓组织蛋白质组双向凝胶电泳(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)图 谱,比较分析吗啡耐受大鼠腰段脊髓组织中蛋白质组的变化和差异表达,鉴定出差异表达的蛋白质点并进行验证。 方法:将16只鞘内置管雄性SD大鼠随机分为吗啡耐受组(MT组,n=8)和生理盐水组(NS组,n=8),取其腰段脊髓组织 蛋白以固相pH梯度等电聚焦(immobilized pH gradients isoelectric focusing,IPGIEF)为第一向,十二烷基硫酸钠-聚丙烯 酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electroporesis,SDS-PAGE)为第二向进行2-DE,应用PDQuest分析 软件对考马斯亮蓝染色的2-DE图谱进行图像分析,对差异蛋白质点进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrixassisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)分析,并利用Mascot查询软件搜索Swiss- Prot数据库进行生物信息学分析。采用蛋白质印迹法验证部分差异蛋白。结果:MT组和NS组大鼠脊髓组织2-DE图谱 中各分离出约1 000个清晰的蛋白质点,其中明显差异表达的蛋白有36个。采用MALDI-TOF-MS分析,并利用Mascot查 询软件搜索Swiss-Prot数据库,共搜索到14个蛋白质,与NS组比较,MT组中表达下调的蛋白质点有2个,表达上调的 蛋白点有12个。采用蛋白质印迹法对其中的NADH脱氢酶及伽玛烯醇化酶蛋白质点进行验证,结果与蛋白质组学结 果一致。结论:初步建立了吗啡耐受大鼠脊髓组织蛋白质组双向电泳图谱,证明吗啡耐受可以引起脊髓中多种蛋白 质的表达改变。  相似文献   

设为首页 | 免责声明 | 关于勤云 | 加入收藏

Copyright©北京勤云科技发展有限公司    京ICP备09084417号-23

京公网安备 11010802026262号