重组乙型肝炎病毒变异s基因疫苗诱导小鼠产生特异性体液免疫应答

目的：构建乙型肝炎病毒(HBV)变异s基因真核表达载体，检测其诱导小鼠产生特异性体液免疫应答。方法：利用限制性内切酶定位克隆构建s基因nt587 G→A的真核表达载体pcMV-S2．S 145R(PR).用其转染人肝癌细胞系Hep G2后，用EIA、EILISA及免疫细胞化学法，观察其抗原性。以重组变异型s基因真核表达载体(PR)和载体pcDNA3．0分别免疫C57BL／6小鼠各5只。每只小鼠各肌肉注射纯化质粒100μg.用ELISA法检测血清抗-HBs及抗-HBs2抗体的效价。结果：体外实验证实，变异型HBs矩可与抗-HBs结合；PR免疫小鼠可诱导其产生抗-HBs抗体及抗．HBs2抗体，但抗-HBs2抗体的出现早于抗-HBs抗体约1～2wk。结论：HBV变异s基因(nt587G→A)的真核表达载体的表达产物具有良好的抗原性，能够诱导C57BL／6小鼠产生体液免疫应答。     

在疑有染色体异常人群中较严重的染色体异常的发生率——357例的报告

近来,各种显带技术的出现,促进了临床细胞遗传学和实验细胞遗传学的发展。这些技术的应用,使人们加深了对染色体重排特征的认识,在婴幼儿的染色体异常方面,有的研究已提供了资料。本文是描述在临床上疑有染色体异常的人群中,较严重的染色体异常的发生率。鉴于在这类人群中,其染     

Gc血清型与精神分裂症

1978年,Book等报导了在北瑞典Norrbotten县隔离种群中,精神分裂症的遗传学和流行病学的研究结果。他们认为精神分裂症与血小板单胺氧化酶(MAO)、血清多巴胺β羟化酶(DBH)的活力降低和Gc血清型中的Gc~2因子联系在一起是有意义的。并且发现,在不考虑精神分裂症存在与否的条件下,Gc 2-1型中的MAO和DBH的     

DNA修复:医学遗传学的新领域

DNA修复是核酸代谢研究的一个重要领域,它广泛地涉及到生命科学的许多学科,在基础理论和实践应用方面都有相当重要的意义。早在1949年,Kelner就描述了DNA修复现象~1,随着DNA结构的发现及其研究的不断深入,通过对原核细胞、低等     

小鼠受精卵显微操作方法的改进

目的：改进小鼠受精卵显微操作方法，提高小鼠受精卵的存活率、假孕母鼠生产率及得仔率。方法：以一定长度大小及浓度的DNA片段为材料，分别进行常规及改进的显微操作后，统计分析受精卵存活率、假孕母鼠生产率及得仔率。结果：经改进后缩短操作时间的显微操作法与常规显微操作法相比，小鼠受精卵的存活率由60．3％提高至79．5％、假孕母鼠生产率由35．7％提高至56．8％、得仔率由10．1％提高至14．1％，均有显著差别（P＜0．01）。结论：改进的显微操作法可推广应用于常规的转基因小鼠制备。     

乙型肝炎转基因小鼠品系C57-TgN(HBV adr2.0)SMMU的生物学特征

目的：评价乙肝转基因小鼠品系C57－TgN(HBV adr2.0)SMMU生物学特征的稳定性。方法：以F6代乙肝转基因小鼠C57－TgN(HBV adr2.0)SMMU为研究对象，采用基因组DNA PCR，血清ELISA检测，Western印迹分析，免疫组织化学，血清DNA PCR，透射电镜和H－E染色的方法分析HBV基因在转基因小鼠中的整合，表达，复制和组织这变化。结果：F6代乙肝转基因小鼠基因组中稳定整合有HBV基因，肝组织中可检测用HBsAg,HBcAg和X蛋白3种病毒蛋白，血清中HBsAg和HBeAg的表达率分别为19．54％和3．39％，且在血清和肝组织中存在病毒NA和病毒样颗粒；长期的病毒DNA整合，表达和复制可以引起转基因小鼠肝，肺等组织的病理性损伤。结论：乙肝转基因小鼠品系C57－TgN(HBV adr2.0)SMMU具有基因组中稳定整合病毒DNA，血清和肝组织中有病毒蛋白表达和病毒复制的特征，并具有一定的组织这变化，作为生物医药研究的实验动物模型具有推广应用价值。     

乙肝病毒X蛋白诱导HeLa细胞和转基因小鼠肝细胞凋亡的研究

背景与目的:探讨乙型肝炎病毒X蛋白在细胞凋亡中的作用.材料与方法:采用基因重组技术构建乙型肝炎病毒x基因的真核表达载体pcDNA3-HBx.脂质体FuGENE6转染HeLa细胞,并用蛋白印迹检测pcDNA3-HBx在HeLa细胞中的表达.流式细胞术检测细胞凋亡率.结果:成功构建了可在真核细胞中稳定表达X蛋白的HBx基因真核表达载体pcDNA3-HBx.稳定转染pcDNA3-HBxDNA的HeLa-Xs细胞的凋亡率为9.8%,较空白HeLa细胞的凋亡率(0.4%)以及对照细胞HeLa-Vs细胞的凋亡率(1.3%)高;两只转基因小鼠肝细胞的细胞凋亡率分别为54.4%和40.4%,较正常小鼠肝细胞的细胞凋亡率(6.8%)明显增高.结论:X蛋白可在体外和体内诱导细胞凋亡.     

癌干细胞的研究现状

1 癌干细胞理论 肿瘤是危害人类健康的一大顽症。在发生机理方面，影响力比较大的假说主要有：基因突变假说、非整倍体假说以及表遗传改变假说。这是因为肿瘤细胞中总是存在着基因突变、染色体结构和数目改变以及表遗传改变等。但是。不论哪种假说都不能完全解释有关肿瘤的所有现象。癌干细胞假说最早是在20世纪70—80年代提出的。该假说认为：肿瘤组织与正常组织一样，是由处于各种分化等级的细胞组成的。其中。有一种在数量上占少数的干细胞样细胞，它具有无限的增殖能力和分化潜能，是肿瘤形成的起始细胞。它能够通过分裂产生大量的增殖能力有限的其它肿瘤细胞以及增加自身细胞的数量，所以，它在肿瘤的发生、恶化、转移中起重要作用。     

MafA逆转录病毒表达载体的构建及其在肝原始细胞中的稳定表达

目的:构建表达MafA(v-maf musculoaponeurotic fibrosarcoma oncogene homologue A)的逆转录病毒表达载体,并建立稳定表达MafA的肝原始细胞系(liver epithelial progenitor cells,LEPCs).方法:通过PCR方法克隆MafA基因全长,将其构建到pBMN-Z-IRES-Neo逆转录病毒载体中获得pBMN-MafA-Neo载体;将该载体导入Phoenix包装细胞系,收集病毒上清并感染LEPCs,筛选稳定表达MafA的LEPCs;RT-PCR方法检测MafA表达对LEPCs分子表型的影响.结果:成功构建pBMN-MafA-Neo载体,并获得稳定表达MafA基因的肝原始细胞系(LEPCs-MafA).LEPCs-MafA细胞GK和GLUT2基因表达高于LEPCs.结论:成功获得稳定表达MafA的肝原始细胞系,为研究MafA诱导肝干细胞向胰腺细胞转分化奠定了基础.