新型光敏剂黑色二氧化钛介导的光动力学反应对前列腺癌细胞的体外杀伤作用研究

目的:探讨新型光敏剂黑色二氧化钛b-TP-700介导的光动力学反应对前列腺癌细胞株PC-3的体外杀伤作用。方法:利用固相原位热还原法成功制备b-TP-700。用31.25、62.5、125、250、500、1 000 μg/ml b-TP-700处理PC-3细胞12、24、48 h,采用CCK-8法检测细胞活性,荧光共...     

808nm近红外光激发黑色二氧化钛对前列腺癌细胞的杀伤作用

目的 探讨自主研发的黑色二氧化钛（TiO₂）介导的光动力学疗法对前列腺癌的杀伤作用。方法 利用固相原位热还原法成功制备黑色TiO₂,用不同浓度（0、31.25、62.50、125.00、250.00、500.00μg/mL）的黑色TiO₂（b-TP-700）处理LNCaP细胞12、24、48 h,利用CCK-8及荧光共聚焦显微镜来检测黑色TiO₂对前列腺癌细胞的毒性。利用不同浓度的黑色TiO₂（31.25、62.50、125.00、250.00、500.00μg/mL）处理LNCaP细胞后,利用激光（1 W/cm, 808 nm）照射细胞0～7 min。利用CCK-8来检测黑色TiO₂介导的光动力学疗法对前列腺癌细胞的杀伤作用,利用荧光共聚焦显微镜检测黑色TiO₂介导的光动力疗法过程中产生活性氧的量。利用黑色TiO₂介导的光动力疗法处理LNCaP细胞后,通过裸鼠成瘤实验检测LNCaP细胞的裸鼠成瘤能力。结果 不同...     

尿源性脓毒血症死亡因素的回顾性分析

目的分析影响尿源性脓毒血症死亡的危险因素。方法回顾性分析302例尿源性脓毒血症患者的病例资料。患者院内死亡或者出院后30天内死亡的病例纳入死亡组,其他纳入存活组。比较两组人口统计学资料、临床和实验室资料,采用多变量Logistic回归分析。结果两组糖尿病、年龄、查尔森合并症指数(CCI)、入院时神志改变、入院时快速感染相关器官衰竭评分系统评分(qSOFA)、发病时呼吸频率、发病时神志改变、发病时qSOFA有统计学意义(P＜0.05)。死亡组患者诊断当天感染相关器官衰竭评分系统评分(SOFA)、中枢神经系统(CNS)评分、心血管评分较存活组升高(P＜0.05)。诊断第2天和诊断第3天,死亡组SOFA较存活组升高更显著(P＜0.05)。两组脑钠肽、肌酐、血钾、尿素氮、血浆渗透压、尿RBC、尿WBC、尿蛋白有统计学意义。Logistic分析结果显示,死亡独立预测因素为发病时CNS评分、诊断第3天SOFA升高值和诊断当天尿WBC。结论尿源性脓毒血症患者发病时的CNS评分、诊断第3天SOFA升高值和诊断当天尿WBC是患者死亡的独立预测因素。     

肠道菌群和心血管疾病的免疫调节

心血管疾病是人类健康的第一杀手,发病率和死亡率逐年增加。数万亿微生物寄居于人类肠道,在心血管疾病及其相关的代谢、免疫反应中发挥着至关重要的作用。先天性和适应性免疫机制都参与了心血管疾病的发生发展,菌群组分和代谢产物可调节巨噬细胞、淋巴细胞等免疫细胞的分化及功能,并通过循环系统影响机体免疫稳态。本文将通过肠道菌群及其代谢产物与免疫系统的相互作用,讨论肠道菌群与心血管疾病发展之间潜在的免疫机制,为预防和治疗心血管疾病提供新思路。     

视蛋白基因启动子-绿色荧光蛋白融合基因转基因小鼠模型的建立

目的：从小鼠基因组中克隆小鼠视蛋白基因启动子（ROP）并建立ROP－绿色荧光蛋白（GFP）融合基因转基因小鼠模型。方法：用PCR法从基因组内扩增ROP，通过基因重组的方法构建pmROP-EGFP表达载体，并用限制性内切酶消化和DNA测序进行鉴定。纯化的pMOP-EGFP表达质粒经Not I酶切线性化后，用原核显微注射的方法将其注射入小鼠受精卵雄原核，制作转基因小鼠。新生鼠通过PCR检测在基因组水平筛选首建小鼠，基因组表达阳性的小鼠与正常小鼠交配传化后，取眼球进行冰冻切片，在荧光显微镜下观察视网膜下GFP的表达。结果：从基因组内扩增出了2.1kb的小鼠ROP，成功构建了小鼠ROP－GFP融合基因表达载体pmROP-EGFP。获得了3只转基因小鼠首建，分别命名为C57－TgN(mROP-EGFP)SMMU21,C57-TgN(mROP-EGFP)SMMU26,C57-TgN(mROP-EGFP)SMMU27。结论：成功建立了视网膜表达GFP蛋白的C57－TgN(mROP-EGFP)SMMU转基因小鼠，它们可用于研究脑和视网膜发育以及视网膜病变机制，还可为进行视网膜移植实验提供哺乳类动物模型。     

网络电话干预在高血压患者健康教育中的应用

目的通过定期网络干预及电话干预,对高血压病患者进行强化教育,探索更符合实际的、医患互动的社会化管理模式。方法建立高血压病俱乐部的网络平台,为本院门诊和出院的高血压病患者、下级医院和社区服务中心的高血压病患者、登陆网络咨询的高血压患者服务。建立病友档案,通过网络、电话实施干预,定期举办讲座,强化高血压相关知识的健康教育。结果实施2年多来,共回访3 800余例次,计1 467例患者。网络及电话干预后,患者血压平均值下降。血压控制在（120～140/70～90）mmHg（1 mmHg=0.133 kPa）的有1 115例,占76.01%,血压在（140～180/90～110）mmHg的有352例,占23.99%,杜绝了Ⅲ级高血压的高危人群。结论高血压的网络及电话干预是一种切合实际的、效果显著、医患互动的新管理模式。     

乙型肝炎转基因小鼠品系C57-TgN(HBV adr2.0)SMMU的生物学特征

目的：评价乙肝转基因小鼠品系C57－TgN(HBV adr2.0)SMMU生物学特征的稳定性。方法：以F6代乙肝转基因小鼠C57－TgN(HBV adr2.0)SMMU为研究对象，采用基因组DNA PCR，血清ELISA检测，Western印迹分析，免疫组织化学，血清DNA PCR，透射电镜和H－E染色的方法分析HBV基因在转基因小鼠中的整合，表达，复制和组织这变化。结果：F6代乙肝转基因小鼠基因组中稳定整合有HBV基因，肝组织中可检测用HBsAg,HBcAg和X蛋白3种病毒蛋白，血清中HBsAg和HBeAg的表达率分别为19．54％和3．39％，且在血清和肝组织中存在病毒NA和病毒样颗粒；长期的病毒DNA整合，表达和复制可以引起转基因小鼠肝，肺等组织的病理性损伤。结论：乙肝转基因小鼠品系C57－TgN(HBV adr2.0)SMMU具有基因组中稳定整合病毒DNA，血清和肝组织中有病毒蛋白表达和病毒复制的特征，并具有一定的组织这变化，作为生物医药研究的实验动物模型具有推广应用价值。     

乙型肝炎病毒preS2蛋白在转基因小鼠肝脏中的表达

目的：分析乙型肝炎病毒preS2蛋白在3’末端缺失的preS/S基因转基因小鼠肝脏中的分布及其病理学作用。方法：采用原核显微注射法将质粒pcDNA3.1-preS/S^t注射入小鼠受精卵雄原核，制备转基因小鼠。PCR法在基因组小平筛选3’末端缺失的preS/S基因转基因小鼠首建者（founder）及后代；免疫组织化学法在蛋白水平检测preS2蛋白在这些小鼠中的表达；H－E染色分析转基因小鼠肝组织的病理学变化。结果：以原核显微注射法将目的片段注射入受精卵雄原核后，共出生15只新生小鼠，其中存活7只，经PCR检测后获得2只founder转基因小鼠，命名为C57－TgN(preS/S^t）SMMU。免疫组织化学检测发现转基因小鼠肝细胞质中有preS2蛋白表达，H－E染色发现转基因小鼠肝组织中央静脉周围有淋巴细胞聚集。将这2只转基因小鼠与正常同系异性小鼠交配，进行传代培育，PCR法筛选阳性转基因小鼠，目前已传至F2代。结论：本研究成功建立了稳定遗传3’末端缺失的preS/S基因并表达preS2蛋白的转基因小鼠C57－TgN(preS/S^t)SMMU，它将是体内研究3’末端缺失的preS/S基因的表达产物在体内的生物学作用及其与肝细胞内细胞癌基因的转录激活之间关系的理想动物模型。     

乙型肝炎病毒x基因转基因小鼠的表型分析

目的：研究乙型肝炎病毒X蛋白致转基因小鼠的表型效应。方法：采用免疫组织化学和组织病理学方法分析转基因小鼠中X蛋白的表达部位及其病理学改变。结果：免疫组织化学检测发现X蛋白在转基因小鼠的肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和皮肤组织中均有表达，从F0代到F3代小鼠，X蛋白在肝细胞中的分布逐渐从细胞质向细胞核转移。病理学分析显示，表达X蛋白的转基因小鼠出现了皮肤组织结构异常、肝组织和肺组织轻度变性等病理学变化。结论：乙型肝炎病毒x基因转基因小鼠的肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和皮肤等组织中表达X蛋白，部分转基因小鼠出现的皮肤组织、肝组织和肺组织病理性损伤可能与X蛋白有关；各代转基因小鼠肝细胞中X蛋白的分布具有规律性的变化，可用于研究X蛋白在不同部位发挥功能的途径。