C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU小鼠血清和肝组织中HBsAg的表达模式分析

目的:分析C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU"3号"品系转基因小鼠的月龄、性别和遗传背景与其血清和肝组织中HBsAg表达模式的关系.方法:采用血清ELISA检测和免疫组织化学的方法检测转基因小鼠血清和肝组织中HBsAg的表达,统计学方法分析转基因小鼠血清和肝组织中HBsAg的表达与小鼠的月龄、性别、遗传背景的相关性.结果:转基因小鼠在出生后1～3个月时,血清中HBsAg的表达较低或甚至不表达,8个月龄左右时最高,此后逐渐降低,但肝组织中HBsAg的表达相对稳定在较高水平,能真实反映转基因小鼠中HBsAg的表达.雄性小鼠血清和肝组织中HBsAg的表达量高于雌性小鼠(P＜0.05).转基因小鼠与C57BL/6品系、DAB品系和129s品系正常小鼠交配后的子代,其血清和肝组织中HBsAg表达量均未发生变化.血清阳性的小鼠中肝组织HBsAg阳性率为94.05%,两者呈正相关关系(r=0.257,P＜0.01).结论:C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU"3号"品系转基因小鼠血清和肝组织中HBsAg的表达具有发育调节和性别差异.     

C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU转基因小鼠肝脏的组织病理学观察

目的:研究乙型肝炎转基因小鼠品系C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU肝脏的组织学及免疫病理学特征.方法:以168只SPF级乙肝转基因小鼠及15只正常C57BL/6小鼠为研究对象,取肝组织连续切片,常规H-E染色,并选取20例有明显单个核细胞肝内浸润的肝标本,免疫组化原位鉴定白细胞分化抗原的肝内分布.结果:37.5%的转基因小鼠肝脏出现人慢性轻度乙型肝炎样的病理改变,病变率随月龄增大显著增高;32.7%有更轻微的非特异性炎症反应;肝内浸润的单个核细胞多数为CD3 、CD4 细胞,未发现CD57 、CD8 细胞浸润.结论:乙肝转基因小鼠C57 TgN(HBVadr2.0)SMMU肝脏可出现不同程度的病理改变,与人慢性轻度乙肝组织学相类似.     

乙型肝炎病毒核心抗原转基因小鼠的建立

目的：建立乙型肝炎病毒核心抗原（ayw亚型）转基因小鼠模型。方法：采用受精卵显微注射的方法制备转基因小鼠，以PCR、免疫组化和H－E染色法分析导入基因在小鼠基因组中的整合，肝脏中的表达及肝组织的病理变化。结果：得到6只基因组中整合了核心抗原基因的首建者（founder）小鼠，其中1只在肝细胞核和胞浆均有HBcAg的表达。将肝脏中表达的小鼠继续传代，F1代10只小鼠中的4只小鼠肝细胞有HBcAg的表达。结论：建立了乙型肝炎病毒核心抗原转基因小鼠，核心抗原基因能够在小鼠肝脏中表达，并且可以遗传。     

EST技术及其在基因全长cDNA克隆上的应用策略

随着人类基因组计划的顺利进行 ,EST技术被广泛应用于基因识别、绘制基因表达图谱、寻找新基因等研究领域。利用人类基因组研究不断产生的数据 ,从 ESTs即 c DNA的部分序列入手 ,通过同源筛选 ,获得基因部分乃至全长 c DNA序列 ,避免或减轻了构建与筛选 c DNA文库等繁琐的实验室工作。本文从原理、应用及其在科学研究上产生的影响等方面对EST技术进行了概述     

乙型肝炎病毒X基因转基因小鼠的建立及其表型分析

乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus，HBV)x基因(HBx)是HBV复制和扩散所必需的基因，在乙肝慢性化和肝细胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC)的发生中具有重要作用。为了建立研究HBx基因功能的转基因小鼠模型并在体内研究X蛋白的功能，本研究采用基因重组技术构建了含有CMV启动子和HBx基因开放阅读框的HBx基因表达载体pcDNA3-HBx，     

HBV表面抗原DNA疫苗对小鼠脏器影响的实验研究

目的：用乙型肝炎病毒（ＨＢＶ,Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ Ｖｉｒｕｓ）表面抗原ＤＮＡ疫苗对小鼠进行基因免疫,观察主要脏器病理形态改变,探讨该ＤＮＡ疫苗是否对肝、肾、脾等有损伤作用。方法：用乙型肝炎表面抗原（ＧＢｓＡｇ）ＤＮＡ疫苗经肌肉注射法免疫小鼠;ＥＬＩＳＡ法检测小鼠血清抗ＨＢｓＡｇ抗体水平。免疫１２周后取小鼠肝、肾、脾等组织,观察其病原形态改变情况。结果：ＤＮＡ疫苗接种１周后,免疫组小鼠血清中可检测到抗ＨＢｓＡｇ抗体,１２周后多只小鼠脾脏明显增大,肝、肾组织切片染色观察,可见免疫组小鼠的肝、肾组织均有不同程度的病理改变。结论：ＨＢｓＡｇ ＤＮＡ疫苗可诱导小鼠机体产生特异性抗体（可诱发全面、持久的免疫应答）持续１２周以上,同时伴有脾脏肿大和肝肾损伤提示,该ＤＮＡ疫苗表达产物与免疫小鼠脏器病变有一定的关系,对其临床     

TNF家族的新成员TRAIL cDNA的克隆及其在E.coli中的表达

目的：克隆Ｔｒａｉｌ基因ＣＤＮＡ全长,构建Ｔｒａｉｌ的原核表达载体,从而建立其原核表达体系。方法：通过抽提我周血淋巴细胞总ＲＮＡ进行ＲＴ－ＰＣＲ克隆ＴｒａｉｌｃＤＮＡ,构建Ｔｒａｉｌ的原核表达载体,用限制性酶切和ＤＮＡ测序进行鉴定,以温度进行诱导表达,通过ＳＤＳ－ｐａｇｅ分析表达产物。结果：（１）克隆了Ｔｒａｉｌ基因ＣＤＮＡ全长,ＤＮＡ测序结果与报道的完全一致;（２）构建了Ｔｒａｉｌ基因核表达载体     

药品生产车间洁净室压差自控系统的构建讨论

主要介绍了药品生产车间洁净室压差自控系统的构建原理,目的希望有助于持续稳定地控制药品生产车间洁净室合适的压差.     

家庭新“独立运动”

时下一种崭新的家庭理念正在悄然出现,其中较为突出的表现就是—家庭掀起新一轮的“独立运动”。 过去家庭“男主外,女主内”,丈夫挣钱回家,妻子当家理财是司空见惯的事情,如今情况可大不一样了。男女平等,同工同酬,女性也有了固定收入,她们经济上也要求有一定的独立性,于是AA制家庭便