Effects of autoantibodies against AT1-receptor and angiotensin Ⅱ on refractory hypertension

Objective The study will explore effects of the autoantibodies against AT1 receptor and angiotensin Ⅱ on the refractory hypertension. Methods Seventy-seven patients (46 men and 31 women) with essential hypertension were divided into groups of refractory hypertension (RH) and hypertension (HT) according to the 1999 WHO - ISH Guidelines for the Management of Hypertension. Forty normotensives (22 men) were recruited as controls. The mean age was 54. 3±13 years old in RH group, 53. 5±9 years old in HT group and 51. 2 ±11. 9 years old in normotensives (NT) group. The mean blood pressure was 154. 2±9. 4/98. 4 ± 8. 2 mmHg in RH group and 130. 1±7. 6/80. 5±6. 7 mmHg in HT group after combination drug therapy of hypertension for 4 weeks. Blood pressure in NT group was 120. 8±11. 7/76. 4±7. 2 mmHg. The epitope of the 2nd extracellular loops of AT1 receptor was synthesized and used as antigens to screen the autoantibodies by ELISA. Plasma angiotensin (Ang) II were examined by a radioimmunoassay. Results T     

AT1受体短肽主动免疫自发性高血压大鼠对血压和心血管重塑的影响

目的观察血管紧张素Ⅱ的Ⅰ型(AT1)受体细胞外的不同肽段主动免疫自发性高血压大鼠(SHR)对血压、心脏及血管的影响.方法2月龄SHR,随机分成5组,以合成的AT1受体胞外3个多肽片段分别免疫,其余2组为氯沙坦灌胃组(10 mg/(kg·d),标记为SHR-L)和对照组(SHR-C).同龄Wistar大鼠免疫干预同SHR,对照组用免疫佐剂.ELISA法检测抗体滴度,大鼠尾动脉血压计测量血压.试验结束检测心脏及左心室重量、肠系膜三级动脉中层及内径和组织病理变化、心肌超微病理变化.结果SHR 2月龄血压开始升高,所有免疫组动物均产生针对特定短肽的抗体.ATR12181免疫组SHR收缩压于免疫后一个月降低,并持续至实验结束(145.42±8.46 mmHg,n=7),与SHR-C(197.00±7.70 mmHg,n=7,P＜0.05)相比明显降低,与SHR-L(139.28±17.19 mmHg,n=7,P＞0.05)相比无显著性差异;而ATR12185和ATR10014免疫组SHR收缩压无明显变化.与SHR-C相比,ATR12181免疫组心脏/体重比(4.66±0.50 mg/g vs 5.16±0.11 mg/g,P＜0.05)和左心室/体重比(3.64±0.45 mg/g vs 4.19±0.07 mg/g,P＜0.05)均显著降低;而ATR12181免疫组与SHR-L心脏/体重比(4.41±0.60 mg/g)及左心室/体重比(3.50±0.31 mg/g)相比无显著性差异,P＞0.05,肠系膜三级动脉中膜厚度/管腔半径及中膜面积/管腔面积降低.Wistar大鼠各组免疫前后均产生相应抗体,收缩压无明显变化,心脏及血管未见病理变化.结论用ATR12181主动免疫SHR,可降低SHR血压,减轻心脏重量,逆转心肌和动脉重塑;ATR12181主动免疫Wistar大鼠后未见心脏及血管病理变化.     

中性粒细胞和内皮细胞凋亡及相关因子改变在晚期创伤性脓毒症发病中的作用

目的探讨中性粒细胞及内皮细胞凋亡及相关细胞因子和凝血因子改变是否参与晚期创伤性脓毒症的发病。方法收集晚期创伤性脓毒症患者外周血,分离培养外周血单个核细胞(PBMC)及中性粒细胞,观察创伤性脓毒症患者中性粒细胞和内皮细胞凋亡情况,并检测PBMC培养上清白细胞介素(IL)-4、IL-10以及外周血组织因子(TF)、血管性血友病因子(vWF)的水平,比较晚期创伤性脓毒症组与对照组的差异。结果晚期创伤性脓毒症组中性粒细胞凋亡水平[(37±21)%]和循环内皮细胞凋亡[(774±211)个/ml]水平显著高于非脓毒症创伤组[(16±9)%,(92±72)个/ml]和正常对照组。晚期创伤性脓毒症组抗炎细胞因子(IL-4、IL-10)及凝血因子(TF、vwF)水平显著高于对照组。结论晚期创伤性脓毒症患者存在免疫功能抑制和凝血功能异常,这可能是晚期创伤性脓毒症的特征之一,并可能是晚期创伤性脓毒症多脏器功能障碍发生的重要机制。     

NF-κB和Jak-STAT信号途径参与血管紧张素Ⅱ介导的大鼠主动脉平滑肌细胞增殖效应

目的进一步探讨JakSTAT信号途径在血管紧张素Ⅱ介导的主动脉平滑肌细胞增殖效应的作用。方法培养大鼠主动脉平滑肌细胞并行免疫组织化学鉴定,用血管紧张素Ⅱ以不同时间梯度刺激传代培养的大鼠主动脉平滑肌细胞,采用BrdU法测定细胞增殖,裂解细胞后提取细胞总蛋白,分别经免疫共沉淀、Western印迹和细胞免疫荧光化学等方法分析胞内NFκB和Jak/STAT信号分子激活及表达的情况,行不同组间并与阴性对照组做对比。结果在6～30h的平滑肌细胞增殖实验中,6、12h时间段增值最明显;其中12h时AngⅡ组490nm处吸光度值(0.590±0.029)显著高于AG490 AngⅡ组(0.381±0.019),PDTC AngⅡ组(0.481±0.024),氯沙坦 AngⅡ组(0.519±0.026)和SerumFree组(0.30±0.02),P<0.01。Western印迹显示AngⅡ组中NFκB及磷酸化的Jak2、STAT1分别在5、15、60min表达明显达高峰;免疫荧光则表明NFκB及STAT1分子随时间梯度可逆的由胞浆转至胞核,在AngⅡ刺激15min组中STAT1表达水平比对照组(P<0.01)及刺激60min高(P<0.05)。结论AngⅡ能导致VSMC增殖,同时NFκB和磷酸化的Jak2,STAT1表达增加并随刺激时间梯度改变。因此可说明在NFκB和Jak/STAT信号通路激活参与了血管紧张素Ⅱ导致的主动脉平滑肌细胞增殖作用。     

高血压脑卒中患者血清抗血管紧张素Ⅱ1型受体和α1肾上腺素受体自身抗体的观察

目的观察抗血管紧张素Ⅱ1型(AT1)受体和α1肾上腺素受体自身抗体的产生是否由高血压脑卒中所引起.方法以合成的AT1受体、α1肾上腺素受体细胞外第二带多肽片段作为抗原,用ELISA 法检测高血压脑卒中患者及正常人(各281例)血清中的抗AT1和α1受体自身抗体.结果281例高血压脑卒中患者中128例抗AT1受体自身抗体阳性(阳性率45.6%),97例抗α1受体自身抗体阳性(阳性率34.5%),两种抗体阳性均明显高于正常血压对照者(分别为9.3%、6.8%,P<0.01),但在3种类型脑卒中亚组中,抗AT1和α1受体自身抗体阳性率无明显差异(P>0.05),按脑卒中发病时间分亚组,抗体阳性率也无明显差异.结论高血压脑卒中患者抗AT1和α1受体自身抗体检出频率显著增高,该抗体并非继发于脑卒中,而是与原发性高血压本身有关.     

老年人冠心病与凝血因子VII基因多态性的关系

近年来,有学者认为外源性凝血途径在血栓形成过程中具有重要意义,凝血因子VII在外源性凝血途径的启动中起关键性作用,在动脉血栓形成过程中意义重大.凝血因子VII水平受遗传因素与环境因素及其相互作用的影响,遗传因素主要指存在于凝血因子VII基因中的多态性,其中比较重要的多态性位点有: (1)位于凝血因子VII启动子区域323 bp处的10 bp插入/缺失多态性;(2)位于凝血因子VII 8号外显子353位氨基酸(R353Q);(3)凝血因子VII基因内含子7的37 bp串联可变重复序列多态性(HVR4).我们采用了PCR-RFLP的方法研究老年冠心病患者的凝血因子VII 5′F7、R353Q、HVR4多态性,探讨老年人冠心病与凝血因子VII基因多态性的关系.     

抗血管紧张素Ⅱ受体1型和α1-肾上腺素受体自身抗体在高血压患者检测结果分析

目的探讨抗血管紧张素Ⅱ受体1型(AT1-受体)和α1-肾上腺素受体自身抗体在高血压发病中的作用.方法收集2级以上高血压病患者194例,给予规范抗高血压联合药物治疗,根据治疗效果,将高血压病患者分为降压达标组和降压未达标组,40例正常血压志愿者作为对照.以合成的抗AT1-受体和α1-肾上腺素受体多肽片段为抗原,酶联免疫吸附法检测血清抗AT1-受体和α1-肾上腺素受体自身抗体.同时检测血浆肾素活性、血管紧张素Ⅱ和儿茶酚胺浓度.结果高血压病组抗AT1-和α1-受体抗体阳性率分别为26.8%(52/194)和 25.3%(49/194),较正常血压组(7.5% 和 5.0%)明显升高(P<0.01).进一步分析表明,降压未达标组抗AT1-受体和α1-肾上腺素受体抗体阳性率分别为42.9%(42/98)和36.7%(36/98),明显高于降压达标组(10.4%和13.5%)(P<0.01).降压未达标组血浆血管紧张素Ⅱ水平、儿茶酚胺水平、蛋白尿和血清肌酐水平等指标亦明显高于降压达标组.结论高血压病患者血清存在抗AT1-受体和α1-肾上腺素受体自身抗体,这些抗体主要在难治性高血压病患者中检出,可能是高血压发病的机制之一.     

高血压脑卒中患者血浆抗血管紧张素Ⅱ受体1型自身抗体的作用

目的：分析抗血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ，AngⅡ)受体1型(ATt)自身抗体与AngⅡ在高血压脑卒中的作用及其关系。方法：以合成的AT1-受体胞外第二环多肽片段作为抗原，用酶联免疫吸附试验法检测高血压脑卒中患者及正常人(各281例)血浆中的抗AT1-受体自身抗体，AngⅡ肾素活性用放射免疫方法测定。结果：高血压脑卒中组抗AT1-受体自身抗体的阳性率(45．6％)显著高于对照组(9．3％，χ^2=93．6，P&;lt;0．01)；高血压脑卒中组及对照组血浆AugⅡ分别为(62．00&;#177;58．58)pmol／L和(42．70&;#177;28．65)pmol／L(t=4．962，P&;lt;0．01)，肾素活性分别为(0．64&;#177;0．61)ng／(mL&;#183;h)和(0．46&;#177;0．44)ng／(mL&;#183;h)(t=4．027，P&;lt;0．01)，均有显著差异。按脑卒中类型及脑卒中发病时间分组，抗AT1-受体自身抗体的阳性率、AngⅡ及肾素活性差异无显著意义；AngⅡ水平较高者抗AT1-受体自身抗体的阳性率显著高于AngⅡ较低者。结论：抗AT1-受体自身抗体、AngⅡ肾素可能参与高血压脑卒中的进展，AngⅡ水平升高引起血管损伤可能是抗AT1受体自身抗体产生的原因。     

原发性高血压患者中抗血管紧张素Ⅱ1型受体自身抗体所致大鼠主动脉平滑肌细胞增殖及胞内信号研究

目的 在妊高征和恶性高血压患者血清中检测到抗血管紧张素Ⅱ1型受体自身抗体(AT1 RAb)的存在,同时有研究表明该自身抗体有类似血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)的激动样作用.本文探讨原发性高血压患者血清中该自身抗体是否也具有类似Ang Ⅱ的激动样效应及胞内信号机制. 方法 大鼠主动脉细胞培养及鉴定.同时将收集的20例高血压病人血清经硫酸铵沉淀粗提、免疫亲和层析法纯化,ELISA检测其滴度后以1∶40刺激细胞,并设立不同的处理组用BrdU法观察细胞增殖情况.将AT1RAb刺激后的细胞裂解提取总蛋白,经Western印迹方法分析胞内JAK-STAT信号分子激活及表达状况. 结果 在0～24 h的平滑肌细胞增殖实验中,AT1RAb组12 h时间段增值明显,其450 nm处吸光度值(0.236±0.012)显著高于AG490 AT1RAb组(0.175±0.009),氯沙坦 AT1RA组(0.119±0.006)和空白对照组(0.127±0.006,P＜0.01).Western印迹显示AT1RAb组中磷酸化的JAK2、STAT1和STAT3分别较空白对照组明显增强,同时,其表达可被AT1R阻滞剂氯沙坦和JAK2特异性拮抗剂AG490明显抑制. 结论 高血压病人血清中AT1RAb确有类似血管紧张素Ⅱ致平滑肌细胞增殖的激动样效应,并且在该效应中伴有JAK-STAT信号通路的活化.     

老年急性心肌梗死患者危险因素聚集及治疗现状分析

目的:探讨老年急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者危险因素聚集、再灌注治疗及口服药物治疗方面的特征。方法:回顾性分析2006年1～12月间住院的105例老年(≥60岁)STEMI患者的临床资料,并与同期的77例非老年(<60岁)患者进行比较。结果:老年组高血压患病率(70.48:50.65)、高血压病程(12.88年:8.20年)、糖尿病患病率(40.95:22.08)及HDL-C水平(1.104mmol/L:1.014mmol/L)均明显高于非老年组;吸烟史(51.43:80.52)、吸烟量(21.60支/d:27.80支/d)、冠心病家族史(1.90:12.99)及TG水平(1.380mmol/L:1.862mmol/L)均明显低于非老年组。老年组溶栓(10.48:22.08)、β受体阻滞剂(51.43:72.73)、阿司匹林(67.62:89.61)及氯吡格雷(70.48:87.01)治疗率均明显低于非老年组。结论:与非老年患者相比,老年STEMI患者高血压和糖尿病的患病率更高,冠心病家族史、吸烟及血脂异常情况相对低,溶栓、β受体阻滞剂、阿司匹林及氯吡格雷的治疗率低。