小鼠胸腺和脾细胞对淋巴因子反应的辐射剂量效应关系

作者研究了Ｃ５７ＢＬ／６小鼠经０．１－８．０Ｇｙ Ｘ射线全身照射后淋巴因子效应细胞反应性的变。结果发现，照后２４小时胸腺细胞对ＩＬ－１反应的剂量效应曲线曲两个斜率不同的成分组成，其Ｄ３７分别为１．６５和４．０９Ｇｙ；照后１２和２４小时脾细胞对ＩＬ－２反应的Ｄ３７分别为５．５８和３．４６Ｇｙ；ＣＴＬＬ－２细胞在为０．５－１０Ｇｙ剂量范围内，对ＩＬ－２反应性呈剂量依赖性降低，Ｄ３７为８．７７Ｇｙ。提示     

裂变中子照射小鼠脾脏NK活性和IL—2产生能力的变化

研究了裂变中子照射对小鼠脾脏ＮＫ活性和ＩＬ－２产生能力的剂量效应关系，并与γ线作了比较。裂变中子照后２４ｈＮＫ活性的量效曲线不典型：低剂量时明显下降，１．５－５．５Ｇｙ时高于正常，以后又下降。以Ｄ３７或Ｄ０为指标，中子相对生物学效应（ＲＢＥ）分别约为１．７和１．６。脾细胞ＩＬ－２产生能力对裂变中子和γ线的辐射反应相近，Ｄ３７均约为２．５Ｇｙ，裂变中子ＲＢＥ为１。     

裂变中子照射小鼠脾脏NK活性和IL－2产生能力的变化

研究了裂变中子照射对小鼠脾脏ＮＫ活性和ＩＬ－２产生能力的剂量效应关系，并与γ线作了比较。裂变中子照后２４ｈＮＫ活性的量效曲线不典型：低剂量时明显下降，１．５—５．５Ｇｙ时高于正常，以后又下降。以Ｄ＿（３７）或Ｄ＿０为指标，中子相对生物学效应（ＲＢＥ）分别约为１．７和１．６。脾细胞ＩＬ－２产生能力对裂变中子和γ线的辐射反应相近，Ｄ＿（３７）均约为２．５Ｇｙ，裂变中子ＲＢＥ为１。     

电离辐射诱导小鼠胸腺细胞G1期阻滞的分子调控初探

目的研究电离辐射诱导小鼠胸腺细胞Ｇ１期阻滞的分子通路。方法ＰＩ染色,流式细胞术检测细胞周期。单克隆抗体免疫荧光标记,流式细胞术检测蛋白表达。结果０５、１．０及２．０ＧｙＸ射线全身照射后１２小时及２．０Ｇｙ照射后２４小时小鼠胸腺细胞Ｇ１期细胞数明显增高。２．０Ｇｙ照射后ｐ５３蛋白表达在照射后１～８小时明显增高;ｐ２１蛋白表达在照射后４～４８小时明显增高;ＭＤＭ２蛋白表达在照射后４小时及８小时明显增高;而ＧＡＤＤ４５蛋白表达未见明显变化。结论０５～２．０ＧｙＸ射线全身照射可诱导小鼠胸腺细胞Ｇ１期阻滞。其分子通路主要是ｐ５３－ｐ２１通路。     

低剂量X射线对淋巴细胞及各亚群细胞功能的刺激作用

作者在研究低剂量辐射对全淋巴细胞刺激性效应的同时，用３种单克隆抗体分离出分化抗原簇＋－４，分化抗原簇＋－８和Ｂ细胞亚群，进一步探讨了低剂量辐射对３种亚群细胞的刺激作用。结果表明，Ｐａｎｎｉｎｇ法分离的各亚群细胞的纯度及存活率均在９０％以上；全淋巴细胞在０．１Ｇｙ剂量范围内有刺激作用，尤以０．１Ｇｙ剂量点效应最大；各亚群细胞在０．２Ｇｙ照射内均有刺激性效应的发生．分化抗原簇＋－４和Ｂ细胞在０．１Ｇｙ剂量点效应最强，而分化抗原簇＋－８在０．０５Ｇｙ点效应最强；相同剂量，分化抗原簇＋－４的刺激效应大于分化抗原簇＋－８；０．５Ｇｙ照射则表现出明显的抑制作用．     

裂变中子照射对小鼠脾脏淋巴细胞增殖功能的影响

小鼠经梯度剂量的裂变中子和６０Ｃｏγ射线照射，照后１天脾脏淋巴细胞数的变化，显示了其是由对中子和γ射线辐射敏感和辐射抗性两种成分组成，而同一种成分对中子辐射的敏感性又高于对γ射线的辐射敏感性。对中子和γ射线辐射敏感成分的Ｄ０值分别为０．４０Ｇｙ和０．９６Ｇｙ，ＲＢＥ值为２．４０。用丝裂原刺激后的３Ｈ－ＴｄＲ掺入法测定照后小鼠脾脏淋巴细胞的增殖反应，表明脾脏的Ｔ、Ｂ淋巴细胞也是由辐射敏感性不同的两种成分组成。对中子和γ射线敏感性高的Ｔ细胞的Ｄ３７值约为０．８２和０．７５Ｇｙ，Ｂ细胞的Ｄ３７值约为１．０５和２．３８Ｇｙ，ＲＢＥ值相应为０．９１和２．２７。裂变中子２．３Ｇｙ和６０Ｃｏγ射线等效致死剂量４．５Ｇｙ照射后，小鼠脾脏Ｔ淋巴细胞转化功能的损伤和恢复的趋势基本一致。Ｂ淋巴细胞转化功能的损伤和恢复的趋势也基本一致。     

低剂量辐射诱导免疫适应性反应的剂量效应

本实验采用Ｘ射线全身照射，观察辐射诱导免疫适应性反应的预照射剂量（Ｄ１剂量）及其后损伤性剂量（Ｄ２剂量）的剂量范围．结果表明：Ｄ１在２５ｍＧｙ～１００ｍＧｙ范围内（剂量率为１２．５ｍＧｙ／ｍｉｎ），Ｄ２在１．０～１．５Ｇｙ范围内（剂量率为０．３３Ｇｙ／ｍｉｎ），Ｄ１与Ｄ２的时间间隔６小时，可诱导昆明小鼠胸腺细胞自发增殖力及丝裂原（ＣｏｎＡ和ＬＰＳ）刺激的脾细胞增殖反应等免疫适应性反应。     

小鼠受亚致死剂量60Co γ 射线照射后胸腺细胞凋亡的研究

目的探讨小鼠受亚致死剂量６０Ｃｏγ射线照射后胸腺细胞凋亡的变化规律，为研究辐射后免疫功能的重建打下基础。方法采用６０Ｃｏγ射线，２．０，４．０，６．０Ｇｙ单次全身照射，用ＰＩ染色流式细胞仪分析，ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳及细胞激活增殖能力的测定等方法观察胸腺细胞凋亡的规律。结果胸腺细胞照后２小时即出现明显的细胞凋亡，４～８小时达高峰，后渐减少，４．０Ｇｙ，６．０Ｇｙ在３６小时内的凋亡率均比２Ｇｙ高，照后１０天三个剂量组的凋亡率基本接近正常；ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳有大量的小分子片断，呈典型的梯状图谱；４Ｇｙ组用ＰＨＡ、ｒＩＬ－２不同组合刺激受照组细胞，发现胸腺细胞凋亡率有不同程度的下降。结论亚致死剂量６０Ｃｏγ射线照射后小鼠胸腺细胞出现明显的凋亡，４Ｇｙ照射剂量可能是胸腺细胞达凋亡高峰的最适剂量，ＰＨＡ、ｒＩＬ－２联合对辐射诱导的胸腺细胞的凋亡有明显的保护作用。     

低剂量γ射线诱导的淋巴细胞DNA断裂的适应性反应

利用ＤＮＡ解旋荧光测定法（ＦＡＤＵ）研究了低剂量γ射线诱导的淋巴细胞ＤＮＡ断裂的适应性反应，并观察了不同浓度的３－氨基苯甲酰胺（３－ＡＢ）对适应性反应的影响。结果表明：０．５～４．０ｃＧｙγ射线照射（Ｄ１），均可诱导淋巴细胞对１５Ｇｙγ射线照射的抗性，８．０ｃＧｙ引起的适应性反应不明显，２．０，４．０ｃＧｙ的γ射线为诱导适应性反应的最适剂量。５～２０Ｇｙ的Ｄ２照射均可显现出Ｄ１（２．０ｃＧｙ）诱导的适应性反应，以１５Ｇｙ照射后适应性反应最强。０．５ｍｍｏｌ／Ｌ的３－ＡＢ就可明显地抑制适应性反应。当浓度增至５．０ｍｍｏｌ／Ｌ时，适应性反应几乎完全受抑。     

低剂量X射线全身照射诱导小鼠胸腺细胞CD3分子表达的适应性反应

采用免疫荧光流式细胞术（ＦＣＭ）观察了昆明种小鼠胸腺细胞ＣＤ３分子表达的变化。首次报道了０．０７５ＧｙＸ射线单次全身照射可诱导小鼠胸腺细胞ＣＤ３分子表达对其后１．５Ｇｙ攻击剂量照射的适应性反应。证实，１．５Ｇｙ全身照射后胸腺ＣＤ３阳性细胞明显减少，照后１８小时仅为假照射组的３３．７４％。当１．５Ｇｙ照射前６小时预先照射０．０７５Ｇｙ时，可明显减轻其后攻击剂量对ＣＤ３分子表达的抑制作用，此时，ＣＤ３     

X射线全身照射对小鼠脾细胞转铁蛋白受体表达的影响

目的转铁蛋白受体（ＴｆＲ）是Ｔ淋巴细胞受抗原或丝裂原刺激后表达在细胞表面的重要受体之一,与Ｔ细胞的活化和增殖有着密切关系。目前尚未见国内外有关ＴｆＲ辐射效应研究的报道。研究大剂量电离辐射后ＴｆＲ表达的变化及作用,对阐明辐射抑制机体免疫功能的机制有着重要意义。方法本文采用流式细胞术的方法观察了不同剂量Ｘ射线全身照射对小鼠脾细胞ＴｆＲ表达的影响以及４ＧｙＸ射线全身照射后不同时间ＴｆＲ表达的变化。结果０５～６ＧｙＸ射线全身照射后２４小时,脾脏ＴｆＲ阳性细胞数从１Ｇｙ开始随照射剂量的增加而下降,且呈明显的剂量依赖性。４ＧｙＸ射线全身照射后１２～７２小时,脾脏ＴｆＲ阳性细胞数于照后１２小时开始下降,２４、４８小时降至最低值（Ｐ＜０．０５,Ｐ＜０．０１）,７２小时开始回升。结论大剂量电离辐射抑制小鼠脾细胞ＴｆＲ的表达,并有明显剂量依赖性;ＴｆＲ表达的下降可能与辐射抑制ＩＬ２的分泌和ＩＬ２受体的表达有关。     

电离辐射对小鼠脾淋巴细胞IL-10表达的影响

目的 观察75mGy、2GyX射线全身照射对小鼠脾淋巴细胞中IL－10的影响。方法 采用Northern blot检测IL－10转录水平的变化，并同时通过流式细胞术检测其蛋白合成的变化。结果 ①蛋白合成结果表明，75mGy X射线全身照射后脾淋巴细胞IL－10合成在照后2h开始即呈时间依赖性降低，至48h仍无恢复迹象（P＜0．01），而2Gy照射后则出现IL－10合成升高，于照射后8h达到峰值（P＜0．05）。②Northern blot结果表明，75mGy照射后脾细胞IL－10 mRNA转录水平从照后1h即降低，并维持较低水平一直到48h开始恢复，达到假照射组的88．35％；2GyX射线全身照射后早期mRNA水平即有所升高，2h达到假照组的134．06％，4h略有下降，随后逐渐恢复至假照射组水平。结论 不同剂量X射线全身照射可引起不同的辐射效应，IL－10在其中起着重要的作用。     

X射线全身照射对小鼠骨髓细胞CyclinD、CDK4表达的影响

目的 研究X射线全身照射对小鼠骨髓细胞CyclinD、CDK4表达的影响，以探讨电离辐射诱导小鼠骨髓细胞G1阻滞的分子机理。方法 采用Northern blot和半定量RT－PCR方法分别检测CDK4、CyclinD基因转录水平变化；流式细胞仪检测了X射线全身照射小鼠骨髓细胞CyclinD、CDK4的表达及周期时程的变化。结果 2Gy X射线全身照射后12h骨髓细胞出现G1期细胞百分数升高（P＜0．05），G2＋M期细胞百分数于照后4h及12h升高（P＜0．05）；CyclinD基因转录水平从2h开始下降，48h达到最低，照后72h恢复至正常水平，CDK4的变化趋势与CyclinD相似，只是从8h开始下降，48h达到最低，照后72h恢复假照组水平；CyclinD蛋白表达在照射后2、4、24、48h显著降低（P＜0．01），CDK4蛋白表达在照射后2h开始急剧下降，持续至照射后48h仍未恢复到对照水平（P＜0．01）。结论 2Gy X射线全身照射可诱导小鼠骨髓细胞发生G1、G2阻滞；CyclinD、CDK4基因及其蛋白产物可能在电离辐射诱导的小鼠骨髓细胞周期阻滞中起重要作用。     

X射线全身照射对小鼠腹腔巨噬细胞NO产生的影响

目的：观察７５ｍＧｙ、２．０ＧｙＸ射线全身照后不同的时间,小鼠腹腔巨噬细胞ＮＯ产生的时程变化及不同剂量照射后２４ｈ时ＮＯ、ｉＮＯＳ的含量变化。方法分光光度法及免疫组织化学方法。结果：ｉＮＯＳ和ＮＯ产的生与剂量呈正相关。２．０Ｇｙ照射后,ＮＯ从６ｈ到４８ｈ随时间推移产生量逐渐增加,４８ｈ达峰值,为对照的３．８倍,而后回降。结论电离辐射可刺激巨噬细胞合成ｉＮＯＳ及产生ＮＯ。     

用^3H—TdR释放法测定小鼠NK细胞的辐射敏感性

用~3H—TdR释放法测定C_(57)BL/6小鼠脾细胞对YAC-1细胞林的NK活性,首次将该法应用于研究NK细胞对γ线的辐射敏感性,得出如下结论:(1)小鼠整体照射后24h脾脏NK活性的D_(37)约为17Gy,D_0约为11Gy;在24～32Gy范围内仍保留着30%的NK活性,存活曲线为反“S”形,验证了NK细胞总体对辐射的相对耐受性。(2)脾细胞离体或整体照射1～2Gy后即刻NK活性均迅速下降,在2～24Gy内,离体和整体照射组的NK活性分别维持在40%～80%和50%,前者高于后者,说明NK细胞对离体照射比对整体照射更不敏感。(3)小鼠整体照射后24h,全脾细胞数在较小剂量(<4Gy)内急剧下降,然后随剂量增大变化平缓。可以推测NK活性的变化与脾细胞总数的改变有一定关系。(4)综合分析本实验结果,可以设想NK细胞本身可能存在着辐射敏感性不同的亚群。(5)用~3H—TdR释放法测定NK细胞的辐射敏感性,自然释放率低,重复性好,可靠易行。