低剂量X射线全身照射诱导小鼠胸腺细胞CD_3分子表达的适应性反应

采用免疫荧光流式细胞术（ＦＣＭ）观察了昆明种小鼠胸腺细胞ＣＤ３分子表达的变化。首次报道了０．０７５ＧｙＸ射线单次全身照射可诱导小鼠胸腺细胞ＣＤ３分子表达对其后１．５Ｇｙ攻击剂量照射的适应性反应。证实，１．５Ｇｙ全身照射后胸腺ＣＤ３阳性细胞明显减少，照后１８小时仅为假照射组的３３．７４％。当１．５Ｇｙ照射前６小时预先照射０．０７５Ｇｙ时，可明显减轻其后攻击剂量对ＣＤ３分子表达的抑制作用，此时，ＣＤ３阳性细胞数显著高于单纯攻击剂量对照组（Ｐ＜０．０１）。对其机理进行了讨论。     

低剂量X射线照射诱导G1期阻滞的适应性反应

目的观察低剂量Ｘ射线照射能否诱导Ｇ１期细胞阻滞。方法采用碘化丙啶（ＰＩ）荧光探针标记细胞，流式细胞术（ＦＣＭ）检测并分析细胞周期。结果证实１．５ＧｙＸ射线全身照射后１２小时，小鼠胸腺细胞发生明显Ｇ１期阻滞。而０．０７５Ｇｙ低剂量预照射可明显减轻其后１．５Ｇｙ攻击剂量所致Ｇ１期阻滞。离体照射ＥＬ－４淋巴瘤细胞也得到类似结果。结论０．０７５ＧｙＸ射线照射能诱导胸腺淋巴细胞及ＥＬ－４细胞Ｇ１期阻滞的适应性反应。     

电离辐射诱导小鼠胸腺细胞G1期阻滞的分子调控初探

目的研究电离辐射诱导小鼠胸腺细胞Ｇ１期阻滞的分子通路。方法ＰＩ染色,流式细胞术检测细胞周期。单克隆抗体免疫荧光标记,流式细胞术检测蛋白表达。结果０５、１．０及２．０ＧｙＸ射线全身照射后１２小时及２．０Ｇｙ照射后２４小时小鼠胸腺细胞Ｇ１期细胞数明显增高。２．０Ｇｙ照射后ｐ５３蛋白表达在照射后１～８小时明显增高;ｐ２１蛋白表达在照射后４～４８小时明显增高;ＭＤＭ２蛋白表达在照射后４小时及８小时明显增高;而ＧＡＤＤ４５蛋白表达未见明显变化。结论０５～２．０ＧｙＸ射线全身照射可诱导小鼠胸腺细胞Ｇ１期阻滞。其分子通路主要是ｐ５３－ｐ２１通路。     

低剂量辐射诱导小鼠胸腺细胞及其亚组的适应性反应

目的研究低剂量辐射预先照射以及随后大剂量照射后小鼠胸腺细胞Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）、ＣＤ３、ＣＤ４和ＣＤ８分子表达的变化。方法ＴＣＲ、ＣＤ３表达采用间接荧光流式细胞术检测,ＣＤ４、ＣＤ８表达采用双参数直接免疫荧光流式细胞术检测。结果实验结果表明：单纯１５ＧｙＸ射线全身照射后ＴＣＲ,ＣＤ３阳性细胞数以及ＣＤ４－Ｄ８－,ＣＤ４＋ＣＤ８＋,ＣＤ４＋ＣＤ８－和ＣＤ４－ＣＤ８＋细胞数明显减少,当１５ＧｙＸ射线全身照射前６小时预先照射００７５Ｇｙ时,可明显减轻其后１５Ｇｙ照射对ＴＣＲ＋,ＣＤ３＋,ＣＤ４＋ＣＤ８＋,ＣＤ４＋ＣＤ８－和ＣＤ４－ＣＤ８＋的损伤作用。表现为各亚组细胞数显著高于单纯１５Ｇｙ照射组。ＣＤ４－ＣＤ８－亚组的细胞数无明显变化。结论００７５ＧｙＸ射线全身照射能够诱导胸腺细胞ＴＣＲ＋,ＣＤ３＋,ＣＤ４＋ＣＤ８＋,ＣＤ４＋ＣＤ８－和ＣＤ４－ＣＤ８＋亚组细胞的适应性反应。     

1．5Gy X射线全身照射对小鼠胸腺细胞CD_3、CD_4、CD_8分子表达及

采用单克隆抗体免疫荧光技术，流式细胞术检测，观察了１．５ＧｙＸ射线单次全身照射（剂量率０．２８６Ｇｙ／ｍｉｎ）对小鼠胸腺细胞ＣＤ３分子表达的影响，及胸腺细胞亚群和细胞周期的变化。结果表明，中等剂量照射后，胸腺细胞ＣＤ３分子的百分率明显增高，胸腺细胞ＣＤ３阳性细胞比例为对照组的１７７．６１％。同时，胸腺中ＣＤ４＋及ＣＤ８＋细胞比例亦显著增加，分别为对照的２０２．５％及１６５．８７％。然而，胸腺中ＣＤ４＋、ＣＤ８＋细胞的比例显著降低，为对照组的６８．２８％，与此同时，胸腺细胞周期中Ｓ期细胞比例明显降低，为对照组的５５．１４％。     

低剂量辐射诱导免疫适应性反应的剂量效应

本实验采用Ｘ射线全身照射，观察辐射诱导免疫适应性反应的预照射剂量（Ｄ１剂量）及其后损伤性剂量（Ｄ２剂量）的剂量范围．结果表明：Ｄ１在２５ｍＧｙ～１００ｍＧｙ范围内（剂量率为１２．５ｍＧｙ／ｍｉｎ），Ｄ２在１．０～１．５Ｇｙ范围内（剂量率为０．３３Ｇｙ／ｍｉｎ），Ｄ１与Ｄ２的时间间隔６小时，可诱导昆明小鼠胸腺细胞自发增殖力及丝裂原（ＣｏｎＡ和ＬＰＳ）刺激的脾细胞增殖反应等免疫适应性反应。     

0.075 Gy X射线诱导EL-4细胞凋亡及细胞周期的适应性反应

观察低剂量Ｘ射线照射能否诱导ＥＬ－４细胞凋亡及细胞周期的适应性反应。方法采用流式细胞术（ＦＣＭ）检测细胞凋亡及细胞周期。结果单纯２ＧｙＸ射线照射后１２小时ＥＬ－４细胞凋亡显著增多，并伴有明显Ｇ１阻滞；０．０７５Ｇｙ预照射可明显减轻间隔６小时后２Ｇｙ攻击剂量照射所致的细胞凋亡和Ｇ１阻滞。结论０．０７５ＧｙＸ射线离体照射可诱导ＥＬ－４细胞凋亡及Ｇ１阻滞的适应性反应     

0.075Gy射线诱导EL—4细胞凋及细胞周期的适应性反应

目的 观察低剂量Ｘ射线照射能否诱导ＥＬ－４细胞凋亡及细胞周期的适应性反应。方法 采用流式细胞术（ＦＣＭ）检测细胞凋恨及细胞周期。结果 单纯２ＧｙＸ射线照射后１２小时ＥＬ－４细胞凋亡显著增多，并伴有明显Ｇ１阻滞；０．０７５Ｇｙ预照射可明显减轻间隔６小时后２Ｇｙ攻击剂量照射所致的细胞凋亡和Ｇ１阻滞。结论０．０７５Ｇｙ射线离照射可诱导ＥＬ－４细胞凋亡及Ｇ１阻滞的适应性反应。     

小鼠胸腺和脾细胞对淋巴因子反应的辐射剂量效应关系

作者研究了Ｃ５７ＢＬ／６小鼠经０．１－８．０Ｇｙ Ｘ射线全身照射后淋巴因子效应细胞反应性的变。结果发现，照后２４小时胸腺细胞对ＩＬ－１反应的剂量效应曲线曲两个斜率不同的成分组成，其Ｄ３７分别为１．６５和４．０９Ｇｙ；照后１２和２４小时脾细胞对ＩＬ－２反应的Ｄ３７分别为５．５８和３．４６Ｇｙ；ＣＴＬＬ－２细胞在为０．５－１０Ｇｙ剂量范围内，对ＩＬ－２反应性呈剂量依赖性降低，Ｄ３７为８．７７Ｇｙ。提示     

小鼠胸腺和牌细胞对淋巴因子反应的辐射剂量效应关系

作者研究了Ｃ５７ＢＬ／６小鼠经０．１～８．０ＧｙＸ射线全身照射后淋巴因子效应细胞反应性的变化．结果发现，照后２４小时胸腺细胞对ＩＬ－１反应的剂量效应曲线由两个斜率不同的成分组成，其Ｄ３７，分别为１．６５和４．０９Ｇｙ；照后１２和２４小时脾细胞对ＩＬ－２反应的Ｄ３７分别为５．５８和３．４６Ｇｙ；ＣＴＬＬ－２细胞在为０．５～１０Ｇｙ剂量范围内，对ＩＬ－２反应性呈剂量依赖性降低，Ｄ３７为８．７７Ｇｙ。提示ＩＬ－２效应细胞的辐射抗性高于ＩＬ－１效应细胞．     

1.5Gy X射线全身照射对小鼠胸腺细胞CD、CD4、CD8分子表达及

采用单克隆抗体免疫荧光技术,流式细胞术检测,观察了1.5GyX射线单次全身照射(剂量率0.286Gy/min)对小鼠胸腺细胞CD₃分子表达的影响,及胸腺细胞亚群和细胞周期的变化。结果表明,中等剂量照射后,胸腺细胞CD₃分子的百分率明显增高,胸腺细胞CD₃阳性细胞比例为对照组的177.61%.同时,胸腺中CD₄⁺及CD₈⁺细胞比例亦显着增加,分别为对照的202.5%及165.87%.然而,胸腺中CD₄⁺、CD₈⁺细胞的比例显着降低,为对照组的68.28%,与此同时,胸腺细胞周期中S期细胞比例明显降低,为对照组的55.14%.     

Intraindividual Comparison of Conventional Three-Dimensional Radiotherapy and Intensity Modulated Radiotherapy in the Therapy of Locally Advanced Non-Small Cell Lung Cancer A Planning Study

Background: Local failure is the one of the most frequent cause of tumor related death in locally advanced non-small cell lung cancer (LAD-NSCLC). Dose escalation has the promise of increased loco-regional tumor control but is limited by the tolerances of critical organs. Patients and Methods: To evaluate the potential of IMRT in comparison to conventional three-dimensional conformal planning (3DCRT) dose constraints were defined: Maximum dose (D_max) to spinal cord < 48 Gy, mean lung dose h 24 Gy, D_max esophagus > 70 Gy in not more than 5 cm of the total length. For ten patients two plans were compared: (1) 3DCRT with 5 weekly fractions (SD) of 2 Gy to a total dose (TD) of 50 Gy to the planning target volume of second order (PTV2). If the tolerance of the critical organs was not exceeded, patients get a boost plan with a higher TD to the PTV1. (2) IMRT: concomitant boost with 5 weekly SD of 2 Gy (PTV1) and 1.5 Gy to a partial (p)PTV (pPTV=PTV2 š PTV1) to a TD of 51 Gy to the pPTV and 68 Gy to the PTV1. If possible, patients get a boost plan to the PTV1 with 5 weekly SD of 2 Gy to the highest possibly TD. Results: Using 3DCRT, 3/10 patients could not be treated with TD > 50 Gy, but 9/10 patients get higher TD by IMRT. TD to the PTV1 could be escalated by 16% on average. The use of non-coplanar fields in IMRT lead to a reduction of the irradiated lung volume. There is a strong correlation between physical and biological mean lung doses. Conclusion: IMRT gives the possibility of further dose escalation without an increasing mean lung dose especially in patients with large tumors. Hintergrund: Lokale Rezidive sind eine häufige Todesursache bei Patienten mit lokal fortgeschrittenen nichtkleinzelligen Bronchialkarzinomen (LAD-NSCLC). Dosiseskalation verspricht hier eine Verbesserung der lokalen Kontrolle, ist aber limitiert durch die Toleranz der Nachbarstrukturen. Patienten und Methoden: Um das Potential der IMRT im Vergleich zur konventionellen 3-D-Planung herauszuarbeiten, wurden folgende Dosis-Volumen-Vorgaben definiert: Maximale Dosis (D_max) des Myelons < 48 Gy, mittlere Lungendosis (MLD) h 24 Gy, D_max des Ösophagus > 70 Gy in h 5 cm der Gesamtlänge. Für zehn Patienten mit LAD-NSCLC wurden verglichen: 1. 3DCRT mit fünf wöchentlichen Einzeldosen (ED) von 2 Gy bis zu einer Gesamtdosis (GD) von 50 Gy für das Planungszielvolumen zweiter Ordnung (PTV2). Wenn die Toleranz der umliegenden Gewebe dies zuließ, erhielten die Patienten einen Boostplan für das PTV1. 2. IMRT: Concomitant Boost mit fünf söchentlichen ED von 2 Gy für das PTV1 und 1,5 Gy für das partielle PTV (pPTV=PTV2 š PTV1) bis zu einer GD von 51 Gy im pPTV und 68 Gy im PTV1. Falls die Belastung des Normalgewebes dies erlaubte, erfolgte ein Boostplan für das PTV1 mit fünf wöchentlichen ED von 2 Gy bis zur höchstmöglichen GD. Ergebnisse: Konventionell konnten 3/10 Patienten mit GD > 50 Gy behandelt werden - mittels IMRT konnten bei 9/10 Patienten höhere Dosen appliziert werden. Im PTV1 konnte im Mittel eine Dosiseskalation von 16% erreicht werden. Besonders Patienten mit großen Tumoren profitierten von der IMRT. Die Verwendung nonkoplanarer Techniken führte zur Verringerung der Dosis innerhalb des kritischen Lungenvolumens. Die physikalischen mittleren Lungendosen waren hoch korreliert mit den biologisch gewichteten mittleren Lungendosen. Schlussfolgerung: Im Vergleich zur 3DCRT ermöglicht die IMRT eine Dosiseskalation in der Behandlung von LAD-NSCLC ohne Erhöhung der mittleren Lungendosis. Von der Technik profitieren insbesondere Patienten mit größeren Tumoren.     

形变配准在宫颈癌近距离放疗分次间剂量评估中的可行性研究

目的:比较近距离放疗分次间靶区和正常组织在形变配准(DIR)和简单累加剂量体积直方图(DVH)情况下,累积剂量的剂量学差异,分析在宫颈癌三维近距离放疗计划中,形变配准技术应用于靶区和正常组织剂量评估的可行性。方法:回顾性选取13例宫颈癌近距离放疗病例,每个病例均进行了4次CT定位的近距离放疗。对每个病例的4次CT进行形...     

宫颈癌内外照射后放射性直肠损伤临床预测模型的研究

目的 探讨宫颈癌内外照射放疗不同剂量叠加方式的剂量学差异,建立宫颈癌放疗后慢性放射性直肠损伤(RLRI)的临床预测模型。方法 回顾性分析2020年1月1日至2021年11月30日于川北医学院附属医院肿瘤科接受根治性同步放化疗宫颈癌患者的临床资料,放疗采用外照射+近距离治疗方式,内外照射剂量评估采用内、外照射生物等效剂量(EQD2)参数直接叠加和内外照射三维计划图像形变配准(DIR)剂量叠加,分析两种剂量评估方式剂量学差异。RLRI分级标准采用肿瘤放射治疗协作组标准。运用两种剂量评估方式构建RLRI的预测模型,使用受试者工作特征(ROC)曲线计算曲线下面积,以评估不同剂量评估方式的预测准确性。结果 多次近距离治疗剂量叠加的EQD2参数较DIR剂量叠加高危临床靶区D_95%和D_90%分别高2.18和2.92 Gy,直肠D_{2 cm³}、D_{1 cm³}、D_{0.1 cm³}分别高1.74、2.28、2.26 Gy(t=3.82、5.21、4.58、5.17、2.05,P<0.05)。外照射与近距离治疗,直肠D_{2 cm³}、D_{1 cm³}、D_{0.1 cm³}的EQD2参数直接叠加比DIR剂量叠加高6.22、7.61、9.56 Gy(t=9.40、10.59、7.87,P<0.001)。联合预测模型ROC曲线下面积为0.788,最佳预测阈值的灵敏度为0.850,特异度为0.660,Hosmer-Lemeshow拟合优度检验显示,拟合优度较好(P>0.05)。传统预测指标DIR剂量叠加的预测模型:直肠D_{2 cm³}、D_{1 cm³}的ROC曲线下面积分别为0.784、0.763,最佳预测阈值的灵敏度分别为0.850、0.750,特异度分别为0.679、0.717。结论 内外照射EQD2参数直接叠加与三维计划图进行DIR剂量叠加评估剂量参数有剂量学差异。DIR剂量叠加直肠D_{2 cm³}、D_{1 cm³}与联合预测模型预测RLRI的价值较高,但联合预测模型预测RLRI计算复杂,建议临床上通过DIR剂量叠加直肠D_{2 cm³}、D_{1 cm³}预测RLRI。     

电离辐射对p16基因转录及蛋白表达的影响

目的　研究电离辐射对p16基因转录及蛋白表达的影响。方法　采用Northernblot检测p16mRNA水平的变化 ;采用单克隆抗体免疫荧光标记及流式细胞术检测p16蛋白表达的变化。结果　研究证实 ,2 0Gy照射后 2～ 2 4h ,胸腺细胞p16mRNA水平明显增高 ,8～ 4 8hp16蛋白表达显著增高 (P <0 0 5～P <0 0 1) ;照射后 2～ 8h脾细胞p16mRNA水平明显增高 ,2 4hp16蛋白表达显著增高 (P <0 0 5 )。研究还证实 ,0 5～ 6 0Gy照射后 ,胸腺细胞p16mRNA水平呈剂量依赖性增高 ,p16蛋白表达在 1 0～ 4 0Gy组显著增高 (P <0 0 5～P <0 0 1) ;脾细胞p16mRNA水平亦增高 ,但增幅远低于胸腺细胞 ,p16蛋白表达在 1 0～ 4 0Gy组显著增高 (P <0 0 5～P <0 0 1)。结论　电离辐射可诱导p16基因转录及蛋白表达增高 ,其增高幅度表现出一定的细胞异质性。     

γ源放射事故受照者呕吐开始时间与全身剂量关系

目的探讨γ源放射事故受照者呕吐开始时间与全身吸收剂量之间的关系。方法采用STATA统计软件包对39例γ源放射事故受照者资料进行回顾性分析。结果全身吸收剂量等于或大于1Gy的受照者呕吐发生率(2227)显著大于剂量在1Gy以下的受照者(112,P<0.001)。出现呕吐的受照者,呕吐开始时间(TD,以h表示)与全身吸收剂量D(Gy)之间的关系符合幂函数模型,其方程式可描述为:TD=(17.45±1.77)D-(2.21±0.30)(n=23,F=50.01,P<0.01,经校正的R2=0.8099)。受照后呕吐开始时间在2h以内的P25、P50和P75剂量分别为4.1、7.6和11Gy;呕吐开始时间大于2h的P25、P50和P75剂量分别为2.0、2.4和2.6Gy。结论在突发核或放射事件可能涉及大量患者的情形下,呕吐开始时间可作为早期分类的一个快速而实用的观察指标,但应注意其局限性。     

Murine Haemopoietic Stem Cells with Long-term Engraftment and Marrow Repopulating Ability are More Resistant to Gamma-radiation than are Spleen Colony Forming Cells

The radiation sensitivity of various subsets in the haemopoietic stem cell hierarchy was defined using a limiting dilution type long-term bone marrow culture technique that was previously shown to allow quantification of cells with spleen colony-forming potential (day-12 CFU-S) and in vivo marrow repopulating ability (MRA). Primitive stem cells that generate new in vitro clonable colony-forming cells (CFU-C) in the irradiated marrow (MRA) and have long-term repopulation ability (LTRA) in vitro (cobblestone area forming cell, CAFC day-28) had D₀ values of 1·25 and 1·38 Gy, respectively. A lower D₀ was found for the less primitive CFU-S day-12, CAFC day-12 and cells with erythroid repopulating ability (0·91, 1·08 and 0·97 Gy, respectively). CFU-S day-7 were the most radiosensitive (D₀ equalling 0·79 Gy), while CFU-C and CAFC day-5 were relatively resistant to irradiation (D₀ 1·33 and 1·77 Gy). Split-dose irradiation with a 6 h interval gave dose sparing for stem cells with MRA and even more with in vitro LTRA, less for CFU-S day-12 and CAFC day-10 and none for CFU-S day-7. The cell survival data of the specified stem cell populations were compared with the ability of a fixed number of B6-Gpi-1^a donor bone marrow cells to provide for short- and long-term engraftment in single- and split-dose irradiated cognenic B6-Gpi-1^b mice. Serial blood glucose phosphate isomerase (Gpi) phenotyping showed less chimerism in the split as compared to the single radiation dose groups beyond 4 weeks after transplant. Radiation dose-response curves corresponding to stable chimerism at 12 weeks for single and fractionated doses revealed appreciable split-dose recovery (D₂–D₁) in the order of 2 Gy. This was comparable to D₂–D₁ estimates for MRA and late-developing CAFC (1·27 and 1·43 Gy, respectively), but differed from the poor dose recovery in cells corresponding to the committed CFU-S day-7/12 and CAFC day-10 population (0·14–0·33 Gy). These data are together consistent with differential radiosensitivity and repair in the haemopoietic stem cell hierarchy, and provide a cellular basis for explaining the dose-sparing effect of fractionated total-body irradiation conditioning on long-term host marrow repopulation.     

X射线全身照射对免疫细胞共刺激分子表达的影响

目的：探讨低剂量电离辐射对免疫细胞表面分子的影响，方法：用流式细胞术FITC－CD28／PE－CTLA－4双染染法观察了小鼠胸腺和脾细胞的CD28和CTLA－4表达变化，用免疫细胞化学（ABC）法观察了小鼠腹腔巨噬细胞B7－1和B7－2的表达变化。结果：低剂量电离辐射和较高剂量电离辐射均能增强腹腔巨噬细胞B7分子的表达；同时发现，低量电离辐射显著增强胸腺和脾细胞CD28的表达，而CTLA－4的表达降低，脾细胞较胸腺细胞更明显。较高剂量电离辐射显著增强胸腺和脾细胞CTLA－4的表达，同时抑制两种细胞CD28的表达，以脾细胞为更显著，结论：共刺激分子CD28和B7的表达上调可能是低剂量电离辐射免疫兴奋效应机理中的重要因素。     

基于3D U-net的宫颈癌近距离治疗剂量分布预测

目的 基于三维（3D） U-net深度学习模型,建立预测CT引导下宫颈癌近距离治疗计划的3D空间剂量分布。方法 2021年4-9月收集114例宫颈癌患者三维近距离放疗计划（处方剂量6 Gy）组成数据集,按84 ∶11 ∶19划分为训练集、验证集、测试集。利用3D U-net模型进行500次（epoch）训练,分别评估测试集病例体素级的平均剂量偏差（MDD）与绝对剂量偏差（MADD）、等剂量面包围体积的戴斯系数（DSC）、处方剂量适形度指数（CI）、高危临床靶区（HRCTV）的D₉₀和平均剂量D_mean、膀胱、直肠、小肠、结肠的D_{1 cm³}与D_{2 cm³}剂量学参数。结果 测试集中19例患者的3D剂量矩阵MDD与MADD分别为-0.01±0.03和（0.04±0.01） Gy。50%到150%处方剂量的DSC在0.89到0.94之间,处方剂量CI为0.70±0.04。HRCTV的D₉₀的平均偏差为2.22%,D_mean的偏差为-4.30%。膀胱、直肠、小肠、结肠的D_{1 cm³}与D_{2 cm³}最大偏差分别为2.46%和2.58%。模型预测平均耗时2.5 s。结论 本研究实现了一种基于3D U-net的预测宫颈癌3D剂量分布的深度学习模型,为宫颈癌近距离治疗自动化设计奠定基础。