电离辐射对小鼠移植性肝癌作用的实验研究

目的研究不同剂量γ射线照射对小鼠移植性肝癌形成的影响。方法γ射线照射后６小时，给予小鼠右肩胛尾侧部皮下接种Ｈ２２肝癌细胞，观察各组小鼠的肿瘤形成及生长情况。另外，观察了γ射线对小鼠足垫迟发性超敏反应（ＤＴＨ）、ＮＫ细胞活性及血清ＳＯＤ含量的影响。结果０．３及０．６Ｇｙγ射线照射后，小鼠肿瘤潜伏期延长，０．１５及０．３Ｇｙ照射后，小鼠ＮＫ细胞活性及ＤＴＨ反应增强，０．１５～１．２Ｇｙ照射后，小鼠血清总ＳＯＤ及Ｍｎ－ＳＯＤ含量均显著升高。结论电离辐射对小鼠移植性肝癌的作用与照射对小鼠免疫功能及ＳＯＤ水平的影响密切相关。     

X线对脑胶质瘤细胞系增殖的影响

为探讨不同Ｘ线处理对脑胶质瘤细胞增殖的影响，选用人脑星形细胞瘤ＳＷＯ－３８系，采用ＭＴＴ法观察Ｘ线对胶质瘤细胞生长的影响，ＡＢＣ法检测增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）基因表达的变化。结果显示：①不同剂量（５，１０，１５，２０，２５Ｇｙ）Ｘ线对胶质瘤细胞生长具有明显的抑制作用，生长曲线低平，照射后４８ｈ的抑制率分别为３３％、４７％、５１％、５８％和６６％；②不同剂量率（８０，１６０，２４０，３２０，４００ｃＧｙ／ｍｉｎ）Ｘ线照射后４８ｈ的抑制率分别为５８％、５４％、４７％、２５％和３０％；③超分割照射后４８ｈ的抑制率为６２％，而单次照射组为５０％；④不同剂量（５，１０，１５，２０，２５Ｇｙ）Ｘ线照射后ＰＣＮＡ－标记率（ＬＩ）分别为９１％，８７％，８１％，７８％，６９％，ＰＣＮＡ－ＬＩ与存活细胞ＯＤ值呈显著性正相关关系（Ｐ＜０．０５）。说明①ＳＷＯ细胞生长曲线、抑制率与Ｘ线剂量、剂量率和照射方式之间密切相关；②ＰＣＮＡ－ＬＩ与存活细胞ＯＤ值呈正相关关系，ＰＣＮＡ是胶质瘤细胞增殖的标志之一。     

不同剂量X射线对同步化HeLaS3细胞周期的影响

目的　研究不同剂量Ｘ射线对同步化ＨｅＬａＳ３ 细胞周期的影响,为进一步探讨其分子调控机理和临床肿瘤放疗提供基础资料。方法　采用胸苷（ＴｄＲ） 双阻断法和流式细胞术（ＦＣＭ） 检测了ＨｅＬａＳ３ 细胞同步化后分别于其细胞周期各时相进行７５ ｍ Ｇｙ 和２－０ Ｇｙ Ｘ 射线照射以及于Ｇ２＋ Ｍ 期进行０－０２５～２－０ Ｇｙ 照射后其细胞周期进程的变化。结果　２－０ Ｇｙ 照射时细胞无论处于Ｇ０／Ｇ１ 、Ｓ期还是Ｇ２ ＋ Ｍ 期,从释放点后９～１５ 小时内均发生明显的Ｓ期延迟和Ｇ２ 阻滞,但其中以Ｇ２ 期照射者阻滞最显著;于Ｇ０／Ｇ１ 和Ｇ２ ＋ Ｍ 期进行７５ ｍ Ｇｙ 照射,分别在９ 和１２ ｈ 时发生一过性的明显的Ｇ２ 阻滞,至１１ 和１５ｈ 时完全从这一阻滞中脱离,甚至促进了其细胞周期的进程;而在Ｓ期进行７５ ｍ Ｇｙ 照射时,并没有发生这种阻滞,反而加速了其细胞周期由Ｇ２ ＋ Ｍ→Ｇ０／Ｇ１ 的移行,其中尤以９ｈ 时最为显著。剂量效应关系研究表明,于Ｇ２ ＋ Ｍ 期进行０－０２５ ～２－０ Ｇｙ 照射后,在释放点后１１ ｈ 时均发生Ｇ０／Ｇ１ 期细胞数减少,Ｇ２ 阻滞,且有剂量依赖性,而Ｓ期细胞数的变化在０－０２５ ～０－１ Ｇｙ 和０－５ ～２－０ Ｇｙ     

低剂量辐射适应性反应对辐射诱发小鼠胸腺淋巴瘤 …

目的 探讨低剂量对致癌剂量辐射诱发小鼠胸腺淋巴瘤的影响及其免疫学机理。方法 采用４次１．７５ＧｙＸ射线全身照射Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小鼠诱发胸腺淋巴瘤模型,观察不同剂量照后６个月小鼠胸腺淋巴瘤发生率,照后１个月脾脏ＮＫ细胞毒活性、ＩＬ－２和γ－ＩＦＮ分泌活性、腹腔巨噬细胞吞洚功能及其ＴＮＦ６分泌活性以及胸腺细胞分化的变化。结果 每次１．７５Ｇｙ照射前６ｈ、１２ｈ接受２５ｍＧｙ、７５ｍＧｙ全身照射均可降你     

p21在电离辐射诱导EL-4细胞G1期阻滞中的作用

目的 探讨ｐ２１在电离辐射诱导ＥＬ－４细胞Ｇ１期阻滞中的作用。方法 采用Ｎｏｒｔｈ－ｅｒｎ ｂｌｏｔ检测ｐ２１ＷＡＦ１ ｍＲＮＡ水平的变化;采用流式细胞术检测ｐ ２１蛋白表达及细胞周期的变化。结果 ４．０ＧｙＸ射线照射后１２ｈ、２４ｈ、４８ｈＧ１期ＥＬ－４细胞百分数明显高于假照射组：ｐ２１ＷＡＦ１ｍＲＮＡ水平从照射后１ｈ开始升高,４ｈ达峰值,持续至照后１２ｈ;ｐ２１ｘ蛋白表达在照射后２～４８ｈ明显增高。结论 ４．０ＧｙＸ射线照射可诱导ＥＬ－４细胞Ｇ１期阻滞,ｐ２１在电离辐射诱导ＥＬ－４细胞Ｇ１期阻滞中起重要作用。     

低剂量γ射线与噪声对豚鼠听觉的复合作用

本文研究了低剂量γ射线与噪声对豚鼠听觉的复合效应。实验动物分为６组：正常对照组、噪声组、照射组（１，２）和复合暴露组（１，２）。复合１组日照射线剂量率为０．００７５Ｇｙ／２ｈ，累计剂量０．３０Ｇｙ。复合２组为０．０３７５Ｇｙ／２ｈ，每周连续作用５ｄ，持续２个月。噪声与照射组的暴露条件分别与复合组相同。暴露结束后４８ｈ测定各组听阈，计算听阈偏移。结果表明，两低剂量照射组的听阈，分别比正常对照组高３．     

不同运动负荷对大鼠cNOS和iNOS活性的影响及其机理探讨

方法：４０只ＳＤ大鼠，随机分为对照组、４５ｍｉｎ训练组、９０ｍｉｎ训练组、１５０ｍｉｎ训练组和急性力竭组，进行无负重游泳训练８周，每周６次。测定大鼠胸主动脉构建型一氧化氮合酶（ｃＮＯＳ）、诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）及腹腔巨噬细胞ｉＮＯＳ的活性和血液中ＮＯ、ＣＤ４＋／ＣＤ８＋的变化。结果：９０ｍｉｎ训练组、１５０ｍｉｎ训练组胸主动脉ｃＮＯＳ活性显著上升，与之相对应的血浆ＮＯ的水平也显著上升（Ｐ＜０．０５）。急性力竭组胸主动脉ｉＮＯＳ水平显著上升（Ｐ＜０．０５）。１５０ｍｉｎ训练组及力竭运动组腹腔巨噬细胞ｉＮＯＳ与对照组相比显著上升（Ｐ＜０．０５）。血液ＣＤ４＋／ＣＤ８＋的比值在９０ｍｉｎ训练组、１５０ｍｉｎ训练组均显著上升（Ｐ＜０．０５），而在急性力竭组则显著下降。结论：（１）适量的运动训练可引起胸主动脉ｃＮＯＳ活性增强，可能是适量运动改善心血管功能的机制之一。（２）适量的运动训练可以引起腹腔巨噬细胞ｉＮＯＳ活性适度增加，增强机体的非特异性免疫力。而力竭运动引起的腹腔巨噬细胞ｉＮＯＳ的活性的过度增强，则可能与大强度运动引起的细胞免疫抑制有关。     

低水平X射线照射对巨噬细胞吞噬消化功能的影响

本实验观察了不同剂量（０，５０，７５，１５０ｍＧｙ和２，４Ｇｙ）Ｘ射线单次全身照射昆明系小鼠后腹腔巨噬细胞（ＭΦ）对鸡红细胞（ＣＲＢＣ）吞噬消化功能的影响。其结果表明：５０和７５ｍＧｙ照射后３和５天巨噬细胞对ＣＲＢＣ的吞噬功能有非常明显增加（Ｐ＜０．０１），７５ｍＧｙ照射后巨噬细胞其消化功能也非常显著（Ｐ＜０．０１），而２和４Ｇｙ照射后其吞噬和消化功能降低。提示，低剂量辐射能够刺激机体非特异性免疫功能，大剂量照射使之受抑制。     

电离辐射诱导小鼠胸腺细胞G1期阻滞的分子调控初探

目的研究电离辐射诱导小鼠胸腺细胞Ｇ１期阻滞的分子通路。方法ＰＩ染色,流式细胞术检测细胞周期。单克隆抗体免疫荧光标记,流式细胞术检测蛋白表达。结果０５、１．０及２．０ＧｙＸ射线全身照射后１２小时及２．０Ｇｙ照射后２４小时小鼠胸腺细胞Ｇ１期细胞数明显增高。２．０Ｇｙ照射后ｐ５３蛋白表达在照射后１～８小时明显增高;ｐ２１蛋白表达在照射后４～４８小时明显增高;ＭＤＭ２蛋白表达在照射后４小时及８小时明显增高;而ＧＡＤＤ４５蛋白表达未见明显变化。结论０５～２．０ＧｙＸ射线全身照射可诱导小鼠胸腺细胞Ｇ１期阻滞。其分子通路主要是ｐ５３－ｐ２１通路。     

内皮型一氧化氮合酶在急性放射性脑水肿中的表达

目的：探讨大剂量＾６０Ｃｏγ刀照射后脑血管内皮细胞内皮型一氧化氮合酶（ｅＮＯＳ）表达变化及其与急性放射性脑水肿的关系。方法单次２００Ｇｙ＾６０Ｃｏγ刀照射大鼠右侧尾状核头部,于照射后１４ｄ内分批活杀动物,采用光镜,电镜、免疫组化及原位杂交技术研究照射后急性放射性脑水肿的发生发展及脑血管内皮细胞ｅＮＯＳ表达变化。结果照射后２ｈ出现急性放射性脑水肿病理改变。照射后３ｄ达高峰;脑血管内皮细胞ｅＮＯＳ于照     

X射线全身照射对免疫细胞共刺激分子表达的影响

目的：探讨低剂量电离辐射对免疫细胞表面分子的影响，方法：用流式细胞术FITC－CD28／PE－CTLA－4双染染法观察了小鼠胸腺和脾细胞的CD28和CTLA－4表达变化，用免疫细胞化学（ABC）法观察了小鼠腹腔巨噬细胞B7－1和B7－2的表达变化。结果：低剂量电离辐射和较高剂量电离辐射均能增强腹腔巨噬细胞B7分子的表达；同时发现，低量电离辐射显著增强胸腺和脾细胞CD28的表达，而CTLA－4的表达降低，脾细胞较胸腺细胞更明显。较高剂量电离辐射显著增强胸腺和脾细胞CTLA－4的表达，同时抑制两种细胞CD28的表达，以脾细胞为更显著，结论：共刺激分子CD28和B7的表达上调可能是低剂量电离辐射免疫兴奋效应机理中的重要因素。     

电离辐射对小鼠骨髓细胞cyclinB1、cdc2基因转录的影响

目的　研究X射线全身照射对小鼠骨髓细胞cyclinB1、cdc2基因转录的影响 ,以探讨电离辐射诱导小鼠骨髓细胞G2 期阻滞的分子机理。方法　采用流式细胞仪检测了X射线全身照射后小鼠骨髓细胞周期进程的变化。采用半定量RT PCR方法分别检测cyclinB1、cdc2基因转录水平变化。结果　 2GyX射线全身照射后 4及 1 2hG2 +M期细胞百分率升高 (P <0 0 5) ;0 5～ 6Gy照射后 1 2hG2 +M细胞百分率呈剂量依赖性增加 (P <0 0 5～P <0 0 1 )。 2GyX射线照射后 2～ 48h小鼠骨髓细胞cyclinB1转录水平在各个时间点未见明显变化 ,0 5～ 6GyX射线照射后 1 2h ,骨髓细胞cyclinB1基因转录在各剂量点均未见明显改变 ;2GyX射线照射后小鼠骨髓细胞cdc2转录水平从照后 4h即开始不同程度下降 ,1 2h达最低值 (为假照射组的 46 % ) ,照射后 48h开始恢复 ,0 5～ 6GyX射线照射后 1 2h ,骨髓细胞cdc2基因转录水平在各剂量点均明显降低 ,分别达到假照射组的40 %～ 70 %。结论　电离辐射可诱导小鼠骨髓细胞发生G2 期阻滞 ,cdc2激酶活性下降在G2 期阻滞中起重要作用。     

电离辐射对p16基因转录及蛋白表达的影响

目的　研究电离辐射对p16基因转录及蛋白表达的影响。方法　采用Northernblot检测p16mRNA水平的变化 ;采用单克隆抗体免疫荧光标记及流式细胞术检测p16蛋白表达的变化。结果　研究证实 ,2 0Gy照射后 2～ 2 4h ,胸腺细胞p16mRNA水平明显增高 ,8～ 4 8hp16蛋白表达显著增高 (P <0 0 5～P <0 0 1) ;照射后 2～ 8h脾细胞p16mRNA水平明显增高 ,2 4hp16蛋白表达显著增高 (P <0 0 5 )。研究还证实 ,0 5～ 6 0Gy照射后 ,胸腺细胞p16mRNA水平呈剂量依赖性增高 ,p16蛋白表达在 1 0～ 4 0Gy组显著增高 (P <0 0 5～P <0 0 1) ;脾细胞p16mRNA水平亦增高 ,但增幅远低于胸腺细胞 ,p16蛋白表达在 1 0～ 4 0Gy组显著增高 (P <0 0 5～P <0 0 1)。结论　电离辐射可诱导p16基因转录及蛋白表达增高 ,其增高幅度表现出一定的细胞异质性。     

X射线全身照射诱导小鼠派伊氏板细胞凋亡及其机理的研究

目的 研究不同剂量X射线全身照射后小鼠派伊氏板细胞凋亡相关基因蛋白表达的变化规律。初步阐明凋亡调控的部分分子机理。方法 应用光、电镜技术观察小鼠派伊氏板细胞凋亡的形态改变,并用流式细胞术检测小鼠派伊氏板细胞Bcl-xL及Fas-L蛋白表达的变化。结果 2GyX射线全身照射后派伊氏板细胞凋亡增加,且Bcl-xL蛋白表达下降,Fas-L蛋白表达升高;75mGyX射线全身照射后,派伊氏板细胞凋亡减少,且Bcl-xL蛋白表达升高,Fas-L蛋白表达下降。结论 凋亡相关基因Bcl-xL、Fas-L在电离辐射诱导的派伊氏板细胞凋亡方面起重要的调控作用。     

电离辐射对胸腺细胞及脾细胞p16、CyclinD1、CDK4蛋白表达的影响

目的　研究电离辐射对小鼠胸腺细胞及脾细胞中p16、CyclinD1及CDK4蛋白表达的影响。方法　采用单克隆抗体免疫荧光标记及流式细胞术检测蛋白表达的变化。结果　时效实验证实 ,2 0GyX射线全身照射后 8,2 4及 48h ,胸腺细胞p16蛋白表达显著增高 (分别P <0 0 5、P <0 0 1及P <0 0 5) ;照射后 2 4h ,脾细胞p16蛋白表达显著增高 (P <0 0 5)。然而 ,照射后 8～ 2 4h ,胸腺细胞CDK4蛋白表达显著降低 (P <0 0 5～P <0 0 1) ;照射后 8～ 72h ,脾细胞CDK4蛋白表达显著降低(P <0 0 5～P <0 0 1)。量效实验证实 ,1 0 ,2 0及 4 0Gy全身照射后 2 4h ,胸腺细胞及脾细胞p16蛋白表达均显著增高 (P <0 0 5～P <0 0 1)。然而 ,2 0Gy照射后胸腺细胞CDK4蛋白表达显著降低(P <0 0 5) ;0 5～ 6 0Gy照射后脾细胞CDK4蛋白表达显著降低 (P <0 0 5～P <0 0 1)。研究还发现 ,胸腺细胞及脾细胞中CyclinD1蛋白表达于照射后均明显降低。结论　电离辐射可诱导胸腺细胞及脾细胞中p16蛋白表达增高。p16 CyclinD1 CDK4通路可能在X射线诱导胸腺细胞G1期阻滞中起重要作用     

低剂量辐射诱导小鼠睾丸生精细胞凋亡的适应性反应

目的：研究低剂量辐射诱导小鼠睾丸生精细胞凋亡的适应性反应。方法：应用原位末端标记（TUNEL）和常规HE染色法分别结合光镜定量地观察75mGyX射线照射诱导小鼠睾丸生精细胞在生精周期中凋亡的适应性反应。结果：当1．0、2．0或3．0Gy（攻击剂量，D2）X射线照射前6h给予75mGy（诱导剂量，D1）预照射时明显减轻D2对睾丸精原细胞和精母细胞的凋亡损伤作用，而对精子细胞影响不明显，当1．0、1．5、2．0、2．5、3．0Gy（D2）X射线照射前3、6、12、24h给予75mGy（D1）预照射时，发现当D2剂量较小（1．0、1．5、2．0Gy）时，精原细胞和精母细胞的凋亡百分率减少出现较早，较明显，而且持续时间较长；反之，当D2剂量较大（2．5和3．0Gy）时，精原细胞和精母细胞的凋亡百分率减少只有照后6h）出现，而且不显著。结论：低剂量电离辐射可以诱导精原细胞和精母细胞凋亡的适应性反应，并与D1和D2间隔时间及D2剂量有关。     

电离辐射对小鼠骨髓细胞p53、waf1、gadd45基因转录水平的影响

目的：研究X射线全身照射对小鼠骨髓细胞p53、wafl、gadd45基因转录水平的影响，以探讨电离辐射诱导小鼠骨髓细胞G1阻滞的分子机理。方法：采用Northern blot和半定量RT-PCR方法分别检测p53、wafl、gadd45基因转录水平变化。结果：2Gy射线全身照射后2-72hp53基因转录水平均有不同程度的升高，wafl基因在照射后2h开始升高，4h达峰值，一直持续到照后48h开始恢复，gadd45转录水平除在照射后2h一过性升高外，从8h即开始不同程度下降，照射后72h开始恢复。分别以0.5-6.0Gy X射线全身照射后12h取小鼠骨髓细胞作量效研究表明，p53的改变在照射后各组虽有不同程度的升高，但未见明显的剂量依赖，wafl基因转录呈明显的剂量依赖性升高，6.0Gy X射线照射后达对照组的3.41倍，gadd45未见升高趋势。结论：在电离辐射诱导的小鼠骨髓细胞周期G1阻滞后p53-wafl通路起重要作用，而gadd45可能不参与该过程调控。     

X射线全身照射后脾细胞内［Ca2+］i对ConA反应性的变化

目的研究电离辐射对ＣｏｎＡ激活的脾细胞内游离钙离子（［Ｃａ２＋］ｉ）动员的影响,以探讨电离辐射免疫抑制作用的发生机理。方法采用Ｆｕｒａ２／ＡＭ双波长荧光测定法检测了Ｘ射线全身照射后的小鼠脾细胞内［Ｃａ２＋］ｉ对ＣｏｎＡ反应性的变化。结果小鼠接受０、０５、１、２、４和６Ｇｙ吸收剂量的Ｘ射线全身照射后２４小时,脾细胞内［Ｃａ２＋］ｉ对ＣｏｎＡ反应性呈剂量依赖性下降,表现为［Ｃａ２＋］ｉ上升幅度减小、上升至峰值时间延长。２ＧｙＸ射线全身照射后的时程观察表明,照后２小时细胞内［Ｃａ２＋］ｉ对ＣｏｎＡ反应性开始下降,２４小时达最低点,照后５天才略有回升。结论电离辐射所致免疫功能抑制与其抑制淋巴细胞内［Ｃａ２＋］ｉ动员等信息传递过程有关     

电离辐射对不同肿瘤细胞细胞周期的影响

目的 研究电离辐射对不同肿瘤细胞细胞周期的影响为肿瘤放疗及化疗提供科学依据。方法 处于细胞周期各时相的细胞百分数采用流式细胞术进行检测。结果 研究表明：电离辐射作用后,ＨｅｌａＳ３和Ｓ１８０细胞发生了Ｓ和Ｇ２期阻滞,而ＤＬ－４细胞则发生Ｇ１和Ｇ２期阻滞,Ｂ１６各时相细胞数无列出较高的辐射抗性。结论 电离辐射作用后,不同肿瘤细胞的辐射抗性、即辐射敏感性有较大差异。其细胞周期的变化规律亦不相同。     

辐射对EL-4、J774A.1细胞CD2、CD48表达的影响

目的　通过时程及量效研究观察不同剂量X射线照射对EL 4和J774A 1细胞株中表面分子CD2、CD4 8的影响。方法　采用荧光免疫流式细胞术检测蛋白表达的变化。结果　 (1)EL 4细胞CD2分子表达结果显示 ,0 0 75GyX射线照射后CD2合成在照射后 4h即开始升高 ,至 8～ 16h达峰值 (P <0 0 5～ 0 0 1) ,2Gy照射后则从照射后 4h开始下降 ,至 8h达最低点 (P <0 0 1) ,一直持续较低至 4 8h恢复 ;8h量效结果显示 ,在低剂量区 0 0 5 0 ,0 0 75Gy使CD2表达上调 ,而高剂量范围中 1,2Gy使CD2表达下调。 (2 )J774A 1细胞CD4 8分子表达结果显示 ,0 0 75GyX射线照射后CD4 8合成在照射后 2h即开始升高 ,至 4h达峰值 (P <0 0 5 ) ,随后急剧下降 ,8h恢复至假照射水平 ,16～4 8h下降明显低于假照射水平 (P <0 0 5 ) ,2Gy照射后则从照射后 2h开始下降 ,至 8h达最低点(P <0 0 1) ,随后有所恢复 ,但直至 4 8h仍未能恢复至假照射水平。 4h量效结果显示 ,在低剂量区0 0 5 0 ,0 0 75 ,0 10 0Gy使CD4 8表达上调 ,而高剂量范围中 1～ 6Gy均使CD4 8表达下调 (P <0 0 5～0 0 1)。结论　X射线照射可引起CD2、CD4 8不同的辐射效应 ,两者的相互作用体现出低剂量辐射具有不同于高剂量辐射的兴奋效应。