自身抗原SSA/Ro-52kD抗原优势表位分析

探讨自身抗原ＳＳＡ／Ｒｏ－５２ｋＤ的抗原优势表位,为疾病机制的研究提供依据,根据计算机软件进行的蛋白质序列结构分析。采用ＰＣＲ法克隆自身抗原ＳＳＡ／Ｒｏ－５２ｋＤ多肽片段的ｃＤＮＡ,定向插入表达载体ＰＧＥＸ－５Ｘ－１,并且导入大肠杆菌中表达重组融合蛋白,用ＧＳＴ亲和层析柱进行纯化,经免疫印迹法与病人阳性血清进行反应,结果表明片段Ｒｏ５２３具有较强的抗原性,这提示ＳＳＡ／Ｒｏ－５２ｋＤ的抗原优势表位     

人血中CD3+CD16-及CD3-CD16+细胞在异种肾移植间接体内模型中的变化

目的:探讨人血中CD3+CD16及CD3-CD16+细胞在异种肾移植(猪/人)间接体内模型中的变化.方法:利用模拟人体生理条件的体外灌注系统,将人新鲜血灌注离体猪肾22只(实验组),人肾8只(对照组).经免疫荧光双标记,用流式细胞仪检测灌注前及灌注后不同时间内,人血中CD3+CD16-及CD3 CD16+细胞的变化.结果:最初经由猪肾灌注出来的人血中CD3+CD16细胞、CD3-CD16+细胞与灌注前相比,分别由(67.8±3.4)%降至(32.4±4.1)%和(17.3±1.8)%降至(6.9±1.2)%.随着灌注时间的延长,两种细胞减少的趋势逐渐减弱;而经由人肾灌注的人血与灌注前相比,两种细胞无明显变化.结论:人血中T细胞、NK细胞可能通过与猪肾血管内皮细胞的粘附,参与了异种肾移植的排斥反应.     

自身抗原Ro/SSA抗原优势决定簇分析

目的： 探讨自身抗原Ｒｏ／ＳＳＡ（Ｍｒ＝ ６０ ０００）的抗原决定簇,为自身免疫性疾病机制的研究提供依据。方法： 根据计算机软件进行的蛋白质序列结构分析,采用ＰＣＲ法克隆自身抗原Ｒｏ／ＳＳＡ（Ｍｒ＝ ６０ ０００）多肽片段的ｃＤＮＡ,定向插入表达载体ＰＧＥＸ－２Ｔ,并且导入大肠杆菌中表达重组融合蛋白,用ＧＳＴ亲和层析柱进行纯化,经免疫印迹法与患者阳性血清进行反应。结果： Ｒｏ／ＳＳＡ（Ｍｒ＝ ６０ ０００）的抗原优势决定簇主要存在于１００～１９０位和１９１～３００位,不同患者、不同病程抗原优势决定簇有所不同。结论：抗原驱动机制在自身免疫性疾病的发病中起重要作用。     

自身抗原La融合蛋白在大肠杆菌中的表达及免疫学鉴定

系统性自身免疫病患者血清中有多种针对核蛋白复合物 (ＲＮＰ)的自身抗体 ,它们在发病机制中的作用尚不清楚。抗Ｌａ抗体常出现在许多系统性自身免疫病患者的血清中 ,如系统性红斑狼疮 (ＳＬＥ)、干燥综合征(ＳＳ)、和新生儿狼疮 (ＮＬＥ)。因此 ,我们克隆了ＬａｃＤＮＡ ,并在大肠杆菌中表达其融合蛋白 ,经免疫印迹法证实其抗原性 ,以期进一步分析其分子结构及临床意义。1　材料与方法1.1　材料　ＰＧＥＸ 2Ｔ质粒 ;ＪＭ10 9菌株 ;ＬａｃＤＮＡｃｌｏｎｅｐＬａ (本中心所存 ) ;ＴａｑＤＮＡ多聚酶 ,ＥｃｏＲＩ内切酶 ,ＢａｍＨＩ内切酶 ,…     

关节炎中B7:CD28/CTLA-4共刺激途径的实验研究

目的：探讨Ｂ＆：ＣＤ２８／ＣＴＬＡ－４共刺激信号大关节炎发病机制中的作用。方法：经牛Ⅱ型胶原诱导ＳＤ大鼠建立关节炎动物模型;采用ＣＴＬＡ－４Ｉｇ作为负性调节因子,分析其对关节炎大鼠中特异性体液反应和组织病理学表现的影响。结果：ＣＴＬＡ＿４Ｉｇ可阻止ＳＤ大鼠发生胶原诱发 关节炎,降低大导ＢＩＩＣ的体液免疫反应。结论：Ｂ７：ＣＤ２８／ＣＴＬＡ－４共刺激信号在诱发Ｔ细胞介导的自身免疫病中起作用,ＣＴＬＡ     

亚致死剂量γ射线照射后小鼠脾脏CD95阳性淋巴细胞变化规律的研究

观察γ射线照射后小鼠脾脏淋巴细胞凋亡的变化规律与ＣＤ９５（Ｆａｓ）表达的关系。方法采用ＰＩ染色及双荧光流式细胞术研究不同剂量γ射线照射后不同时间，小鼠脾脏淋巴细胞凋亡及ＣＤ９５表达的规律。结果小鼠脾脏淋巴细胞对不同剂量照射的凋亡敏感性差异有显著性，４Ｇｙ照射后凋亡率最高（在２～６Ｇｙ之间观察），淋巴细胞表面Ｆａｓ的表达随照射后细胞凋亡率的变化而改变。结论脾脏淋巴细胞在辐射后表现出明显的Ｆａｓ介导的凋亡，Ｂ细胞较Ｔ细胞具有更高的辐射凋亡敏感性。     

多发性骨髓瘤患者血清自身抗体的跟踪测定

应用间接荧光免疫试验和免疫印迹两种方法,对经多项试验确证的59例多发性骨髓瘤(MM)患者分别检测血清抗核抗体(ANA)和抗可提取核抗原(ENA)抗体.结果表明,ANA阳性率为39/59(66.1%), 其中ANA出现动态变化者占27/39(69.2%),ANA阳性者中抗ENA阳性率为12/39(30.8%),提示自身免疫在MM的发病机制中有一定的作用.     

利用重组抗原检测抗SSA/Ro-52kD自身抗体及其临床意义

目的重组表达SSA/Ro-52kD融合蛋白,并用于检测自身抗体. 方法应用DNA重组技术构建SSA/Ro-52kD工程菌,并表达SSA/Ro-52kD融合蛋白.经谷胱甘肽巯基转移酶(GST)柱层析纯化后,作为抗原,分别用免疫印迹法(IBT)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测20份SS患者血清、60份SLE患者血清和30份正常人血清. 结果重组抗原检测抗SSA/Ro-52kD自身抗体敏感性较高,而且抗体滴度与病程相关. 结论利用重组抗原对自身抗体进行定性、定量分析有助于自身免疫病的诊断和监控.     

小鼠受亚致死剂量60Co γ 射线照射后胸腺细胞凋亡的研究

目的探讨小鼠受亚致死剂量６０Ｃｏγ射线照射后胸腺细胞凋亡的变化规律，为研究辐射后免疫功能的重建打下基础。方法采用６０Ｃｏγ射线，２．０，４．０，６．０Ｇｙ单次全身照射，用ＰＩ染色流式细胞仪分析，ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳及细胞激活增殖能力的测定等方法观察胸腺细胞凋亡的规律。结果胸腺细胞照后２小时即出现明显的细胞凋亡，４～８小时达高峰，后渐减少，４．０Ｇｙ，６．０Ｇｙ在３６小时内的凋亡率均比２Ｇｙ高，照后１０天三个剂量组的凋亡率基本接近正常；ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳有大量的小分子片断，呈典型的梯状图谱；４Ｇｙ组用ＰＨＡ、ｒＩＬ－２不同组合刺激受照组细胞，发现胸腺细胞凋亡率有不同程度的下降。结论亚致死剂量６０Ｃｏγ射线照射后小鼠胸腺细胞出现明显的凋亡，４Ｇｙ照射剂量可能是胸腺细胞达凋亡高峰的最适剂量，ＰＨＡ、ｒＩＬ－２联合对辐射诱导的胸腺细胞的凋亡有明显的保护作用。     

流式细胞术检测狼疮患者白细胞分化抗原40配体

目的　了解在系统性红斑狼疮（ Ｓ Ｌ Ｅ） 患者血液中辅助性 Ｔ细胞（ Ｔｈ） 与 Ｂ 细胞间的白细胞分化抗原（ Ｃ Ｄ）４０ Ｃ Ｄ４０ 配体（ Ｌ） 的共刺激作用。方法　用抗 Ｃ Ｄ３ 单克隆抗体（ 单抗） 刺激 Ｓ Ｌ Ｅ 活动期和缓解期各１０ 例患者外周血单个核细胞（ Ｐ Ｂ Ｍ Ｃ） ,采用流式细胞术检测不同时段 Ｃ Ｄ４０ Ｌ 的表达水平,并与正常对照组比较。结果　活动期 Ｓ Ｌ Ｅ 组 Ｃ Ｄ４０ Ｌ 的表达在抗 Ｃ Ｄ３ 单抗刺激前后均显著高于正常对照组,差异均有非常显著意义;而缓解期 Ｓ Ｌ Ｅ 组 Ｔ 细胞在抗 Ｃ Ｄ３ 单抗刺激前的 Ｃ Ｄ４０ Ｌ 表达在正常范围内,在刺激后显著高于正常对照组,差异有非常显著意义。结论　 Ｃ Ｄ４０ Ｌ Ｃ Ｄ４０ 共刺激作用在 Ｓ Ｌ Ｅ发病机制和病程中起着重要作用。