G418抗性HEK293细胞的培育

目的　培育具有G418抗性的HEK2 93细胞 ,用于建立猪内源性反转录病毒感染人HEK2 93细胞的模型。方法　通过脂质体转染的方法 ,将含有neo基因的质粒pIRESneo导入HEK2 93细胞中 ,利用G418的选择特性 ,对转染细胞进行压力筛选 ,并对其进行了PCR鉴定。结果　经 6 0 0 μg ml的G418压力筛选后 ,获得了抗性细胞克隆。抗性细胞的形态和生长速度与筛选前细胞没有差异 ,特异性核苷酸引物检测抗性细胞基因组DNA ,可以扩增出对应的核苷酸片段。结论　成功地培育了G418抗性HEK2 93细胞 ,为建立猪内源性反转录病毒感染人HEK2 93细胞的模型奠定了基础。     

裂变中子照射对小鼠脾脏淋巴细胞增殖功能的影响

小鼠经梯度剂量的裂变中子和６０Ｃｏγ射线照射，照后１天脾脏淋巴细胞数的变化，显示了其是由对中子和γ射线辐射敏感和辐射抗性两种成分组成，而同一种成分对中子辐射的敏感性又高于对γ射线的辐射敏感性。对中子和γ射线辐射敏感成分的Ｄ０值分别为０．４０Ｇｙ和０．９６Ｇｙ，ＲＢＥ值为２．４０。用丝裂原刺激后的３Ｈ－ＴｄＲ掺入法测定照后小鼠脾脏淋巴细胞的增殖反应，表明脾脏的Ｔ、Ｂ淋巴细胞也是由辐射敏感性不同的两种成分组成。对中子和γ射线敏感性高的Ｔ细胞的Ｄ３７值约为０．８２和０．７５Ｇｙ，Ｂ细胞的Ｄ３７值约为１．０５和２．３８Ｇｙ，ＲＢＥ值相应为０．９１和２．２７。裂变中子２．３Ｇｙ和６０Ｃｏγ射线等效致死剂量４．５Ｇｙ照射后，小鼠脾脏Ｔ淋巴细胞转化功能的损伤和恢复的趋势基本一致。Ｂ淋巴细胞转化功能的损伤和恢复的趋势也基本一致。     

猪内源性反转录病毒在中国实验小型猪中的存在与表达

目的对中国实验小型猪中内源性反转录病毒的存在与mRNA的表达进行检测,摸清中国实验小型猪中内源性反转录病毒的携带情况.方法根据已发表的PERV的序列设计并合成了三对引物,分别用于检测PERV核心蛋白基因(gag)、多聚酶基因(pol)及囊膜基因(env)的存在与表达;同时,根据目前通用的env基因分型方法合成了三对用于分型检测的引物env-A、env-B、env-C.应用PCR、RT-PCR扩增的方法,对来自于中国实验小型猪外周血淋巴细胞的DNA和RNA样品进行了检测.结果在6个被检DNA样品中均检出了PERV特异性DNA的存在;同样,在被检RNA样品中均有PERV特异性RNA的表达,且所表达的PERV均为A型和B型,在所有样品中均未检出C型PERV的表达.结论初步表明中国实验小型猪中存在内源性反转录病毒序列,且能以mRNA的形式表达,这一结果为我国特有小型猪的开发、利用及其病毒安全性评价奠定了基础.     

新免疫抑制剂的临床试用

在第三届免疫及传染病药物研究国际会议上报道了新的免疫抑制剂这—mycophenolate mofetil(RS-61443)和雷怕霉素(rapamycin)的试用结果。 mycophenolate mofetil(MM)在Ⅲ期临床试用于治疗严重的排异危象和风湿性关节     

裂变中子照射对小鼠胸腺淋巴细胞亚群的影响 Ⅱ.小鼠经裂变中子照射后胸腺淋巴细胞及亚群的动力学变化

目的：研究小鼠胸腺细胞及其亚群在裂变中子照射后损伤和修复的规律，并与大约相同致死效应的６０Ｃｏγ射线照射后的规律进行比较。方法：测定照后不同时间小鼠胸腺细胞总数和胸腺重量指数，并采用间接免疫荧光法，测定照后不同时间小鼠胸腺淋巴细胞Ｌｙｔ＋２和Ｌ３Ｔ＋４细胞亚群的百分数。结果和结论：裂变中子和６０Ｃｏγ射线照射后小鼠胸腺重量指数均在照后第３天降至最低，而后的恢复速度差不多，但恢复水平前者一直低于后者，３１ｄ时的水平二者无显著差异。两种辐射照射后第３天胸腺细胞数几乎降至为０，随后的恢复中子照射稍逊于γ射线照射，３１ｄ的恢复水平基本一致。小鼠经裂变中子２．３Ｇｙ和６０Ｃｏγ射线４．５Ｇｙ照射后，第１天Ｌｙｔ＋２和Ｌ３Ｔ＋４细胞百分率均下降，水平基本一致。中子照射第３天的Ｌｙｔ＋２和Ｌ３Ｔ＋４细胞百分率降至更低（７０％以下），而γ射线照射的Ｌｙｔ＋２和Ｌ３Ｔ＋４细胞百分率则开始恢复。中子照射后经第７天明显恢复后，又出现第２次下降，３１ｄ仍未恢复至照前水平。γ射线照射后第３１天，Ｌｙｔ＋２细胞已恢复至照前水平，Ｌ３Ｔ＋４细胞则仍低于照前水平。     

裂变中子照射对小鼠胸腺淋巴细胞亚群的影响Ⅰ.胸腺淋巴细胞亚群对裂变中子的辐射敏感性

小鼠经梯度剂量的裂变中子和６０Ｃｏγ射线照射后１ｄ，其胸腺细胞数和胸腺重量指数的变化，都显示了对中子和γ射线有辐射敏感和辐射抗性两种成分的存在，而同一种成分对中子辐射的敏感性又高于对γ射线的辐射敏感性。对中子辐射敏感成分的Ｄ０值依次为０．６４和０．３４Ｇｙ，对γ射线的Ｄ０值则相应为０．８３和０．８７Ｇｙ。ＲＢＥ值分别为１．３０和２．５６。照射后小鼠胸腺Ｔ细胞亚群的变化表明，两种Ｔ细胞亚群的辐射敏感性也是非均质性的，粗略评价，对中子和γ射线的辐射敏感性均是Ｌｙｔ＋２细胞高于Ｌ３Ｔ４＋细胞，而两类细胞对中子的辐射敏感性又均高于对γ射线的辐射敏感性，经计算各类细胞对中子照射的Ｄ３７值，Ｌ３Ｔ４＋细胞为６．１４Ｇｙ，Ｌｙｔ＋２细胞为３．２８Ｇｙ；对γ射线则分别为１１．３８和１０．４２Ｇｙ，由此得到的ＲＢＥ值分别为１．８５和３．１８。     

快中子束的临床前实验研究

本文为高能所快中子治疗装置的临床前先导研究。比较了35MeV P→Be产生的快中子和γ一次照射的生物效应。体外培养的V_(79)细胞,人鼻咽癌细胞和人黑色素瘤细胞的D_0值的中子RBE分别为1.4,1.8和2.4。小鼠移植性S-180肉瘤生长延迟的RBE值为3.2～3.3,皮肤早期损伤的RBE值为2.2～2.0,由此得出的中子治疗增益系数(TGF)为1.5～1.6。小鼠睾丸重最下降50％的RBE为2.0。小肠干细胞的RBE值约为1.5和1.4。人血淋巴细胞染色体畸变(双着丝点 环)的RBE不是固定值。当中子剂量为1.0Gy时,RBE为2.3,当剂量提高到4.0时,RBE值为1.3。