正常人骨髓细胞培养在小鼠体内扩散合中的增殖情况

业经证明,正常人的骨髓细胞置入受照射小鼠腹腔的纤维蛋白凝块扩散合中能形成造血细胞集落。在纤维蛋白凝块培养中,最常见的细胞集落种类有中性粒细胞、嗜酸粒细胞、巨核细胞和类巨噬细胞。在扩散合中的集落形成单位(CFUD)是指在照射小鼠体内纤维蛋白凝块培养中形成的集落     

RNA干扰p21基因对X射线诱导细胞周期解耦联的影响

目的 研究RNA干扰p21基因对X射线诱导细胞周期解耦联的影响。方法构建RNA 干扰质粒pSilencer3.1-H1 neo-p21,并采用脂质体转染将质粒转入EL-4细胞。 采用单克隆抗体免疫荧光标记及流式细胞术 (FCM) 检测蛋白表达的变化。采用碘化丙啶(PI)荧光标记及FCM检测多倍体细胞数的变化。结果量效实验证实, 1.0~4.0 Gy X射线照射后24 h,EL-4细胞中P21蛋白表达与对照组相比较显著增高。 时效实验证实, 4.0 Gy X射线照射后8~72 h, EL-4细胞中P21蛋白表达与对照组相比较显著增高。 实验证实, 0.5~6.0 Gy X射线照射后,EL-4细胞的八倍体细胞数未见明显变化,X射线照射不诱导EL-4细胞周期解耦联。RNA干扰实验证实, p21基因沉默后, P21蛋白表达于 4.0 Gy照射后24 及48 h, 干扰质粒组与空质粒对照组相比较显著降低;与此同时,干扰质粒组的八倍体细胞数与空质粒组相比较显著增高。结论RNA干扰p21基因使P21蛋白表达抑制后,X射线照射可诱导EL-4细胞周期解耦联。提示,P21蛋白可能在电离辐射诱导细胞周期解耦联中起重要作用。     

ANAE染色检测正常与照射后小鼠外周血和脾脏淋巴细胞亚群的变化

本实验建立了小鼠脾细胞酸性α醋酸茶酯酶(ANAE)细胞化学染色方法。并采用ANAE染色方法检测了经羊红细胞(SRBC)免疫后的C57BL/6小鼠外周血及脾脏淋巴细胞染色结果,并对ANAE~+细胞进行了颗粒分型。结果表明,外周血中ANAE~+细胞数为69.0±5.4％,其中斑点型占54.5±5.0％,分散型占14.5±4.6％。小鼠脾脏ANAE~+细胞为43.1±12.1％,其中斑点型占35.7±10.6％,分散型占7.4±2.9％。同时观察了小剂量γ射线照射对小鼠外周血及脾脏淋巴细胞ANAE染色的影响,结果在24.4mGy至122.0mGy剂量范围内未见淋巴细胞亚群有明显变化。     

DNA甲基化与电离辐射效应

随着人类基因组计划的完成,表观遗传学开始成为关注的热点.DNA甲基化是研究最早且较深入的表观遗传学标志之一.越来越多的研究表明,DNA甲基化在肿瘤的发生及演进过程中起着重要的作用.笔者着重综述了DNA甲基化及电离辐射诱导的DNA甲基化改变,探讨在辐射致癌表观遗传学机制研究中的作用.     

辐射对小鼠骨髓细胞周期的影响及其分子机理

辐射细胞周期效应的研究近年来倍受重视[1 ,2 ] ,笔者就电离辐射对骨髓细胞周期的影响及其分子机理进行了研究 ,现报道如下。一、材料和方法1 动物 :本校实验动物部饲养繁殖的昆明系小白鼠 ,雄性 ,体重 (2 0± 2 )ｇ ,随机分组 ,每组 1 5只 ,每 3只骨髓细胞混合为一个样本以减少个体差异。采用Ｐｈｉｌｉｐｓ深部Ｘ射线治疗机照射动物。2 照射 :电压 2 0 0ｋＶ ,电流 1 0ｍＡ ,滤板 0 5ｍｍＣｕ、1 0ｍｍＡｌ。吸收剂量 0 5～ 6 0Ｇｙ,吸收剂量率为 0 2 87Ｇｙ ｍｉｎ。球靶与皮肤距离 50ｃｍ。观察 0 5～ 6 0Ｇｙ照射后 1 2ｈ小鼠骨…     

辐射诱发胸腺淋巴瘤与Ikaros及p16基因多态性

目的 探讨Ikaros及p16基因多态性与辐射诱发小鼠胸腺淋巴瘤的相关性.方法 采用Promega公司基因组DNA纯化试剂盒提取胸腺淋巴瘤细胞基因组DNA.采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-PEEP)方法检测Ikaros基因rs28185870位点(C/T)、rs28185923位点(C/T)及p16基因rs3695947位点(A/G)单核苷酸多态性(SNPs).结果 C57BL/6J及BALB/c小鼠rs28185870位点基因型分别为T/T、C/C;rs28185923位点基因型分别为C/C、T/T;rs3695947位点基因型分别为A/A、G/G.结论 辐射敏感性不同的C57BL/6J、BALB/c小鼠的rs28185870、rs28185923及rs3695947位点基因型不同,推测Ikaros及p16基因多态性与辐射诱发胸腺淋巴瘤相关.     

Ku70在宫颈癌组织中的表达及意义

目的:探讨Ku70在宫颈胞癌组织中的表达水平与宫颈癌发生、发展的关系。方法:应用免疫组化方法检测Ku70蛋白在15例正常宫颈组织、30例宫颈上皮内瘤变、56例宫颈鳞癌组织中的表达。结果:Ku70在正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变和宫颈癌组织中都有不同程度的表达,但宫颈癌组织中Ku70的表达明显高于正常宫颈组织和宫颈内瘤变,且宫颈癌组织分化程度越差则Ku70的阳性率越高,表达强度越强;不同组织类型的宫颈癌Ku70的表达无差异。结论:Ku70蛋白可能在宫颈癌的发生、发展过程中起重要作用。     

电离辐射诱导EL-4细胞Caspase-3、P53蛋白表达及其生物学作用

目的研究电离辐射对EL-4细胞中Caspase-3和P53蛋白表达的影响，及其对辐射诱导细胞凋亡及多倍体细胞的作用。方法采用单克隆抗体免疫荧光标记及流式细胞术检测蛋白表达的变化，采用PI荧光标记及流式细胞术检测细胞凋亡及多倍体细胞的变化。结果实验表明，4．0GyX射线照射后8及12h，EL-4细胞中Caspase-3蛋白表达与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；照射后2、4、8、12及24h，P53蛋白表达与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。实验还表明，4．0Gy照射后2、4、8、12、24、48及72h，EL-4细胞凋亡与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05～P〈0．001）；而照射后2～48h，多倍体细胞数与对照组比较则未见明显变化。结论电离辐射可诱导EL-4细胞Caspase-3及P53蛋白表达增高，可能在辐射诱导细胞凋亡中起重要作用，而辐射诱导多倍体细胞的分子通路则可能是P53非依赖性的。     

DNA甲基化与电离辐射效应

随着人类基因组计划的完成,表观遗传学开始成为关注的热点.DNA甲基化是研究最早且较深入的表观遗传学标志之一.越来越多的研究表明,DNA甲基化在肿瘤的发生及演进过程中起着重要的作用.笔者着重综述了DNA甲基化及电离辐射诱导的DNA甲基化改变,探讨在辐射致癌表观遗传学机制研究中的作用.     

电离辐射诱导细胞周期解偶联的实验研究

目的　观察电离辐射能否诱导细胞周期解偶联。方法　采用PI荧光标记及流式细胞术 (FCM)测定细胞周期并分析细胞倍体的变化。结果　 1 0、2 0、4 0和 6 0GyX射线照射后 2 4h ,SKOV 3的二倍体细胞数明显减少 (分别为P <0 0 1) ,且呈现明显的剂量依赖性 ;而四倍体细胞数明显增加 (分别为P <0 0 1) ,亦呈现明显的剂量依赖性 ;与此同时 ,八倍体细胞数显著增高 (分别为P <0 0 1)。结论　电离辐射可诱导人卵巢癌SKOV 3细胞周期解偶联。