妊娠高血压综合征胎盘组织差异表达基因的筛选与确定

目的 了解妊娠高血压综合征(妊高征)胎盘组织基因表达的改变，确定与妊高征发病相关的基因，为研究妊高征的发病机理提供线索。方法 收集2001年3月至2002年9月西安地区以剖官产终止妊娠的42例妊高征患者及22例正常产妇的产前、产后临床资料；收集胎盘组织，制作胎盘组织芯片；建立妊高征患者数据库。采用抑制消减杂交技术(suppression subtractive hybridization，SSH)建立妊高征胎盘组织cDNA消减文库i利用差异筛选技术筛选出妊高征胎盘高表达基因，用RT-PCR和免疫组织化学技术验证部分高表达基因。结果 建立了由42例中、重度妊高征患者和22例正常产妇组成的数据库；用66例胎盘组织制成150点的胎盘组织芯片。利用SSH和差异筛选共分离出103个阳性克隆，测序成功90个。测序结果显示90个cDNA片断与GenBank／EM-BL中36条已知功能基因有95％以上的同源性。结论 妊高征患者胎盘组织基因表达发生较大变化；有必要研究血管内皮生长因子受体、卵巢抑制素、丝氨酸蛋白酶抑制素、细胞角蛋白7以了解妊高征的发病机理。     

妊娠高血压综合征患者外周血及脐血端粒酶活性的检测

在高血压的发生、发展中 ,端粒的损伤不仅限于血管壁细胞 ,也涉及造血细胞[1] 。有研究证实 ,外周血细胞的端粒酶激活程度与端粒的损伤程度呈正比[2 ] 。也有文献报道 ,高血压患者外周血单个核细胞端粒酶活性明显增高[3] 。我们检测了妊娠高血压综合征 (妊高征 )患者外周血及胎儿脐血中端粒酶活性 ,旨在探讨孕妇外周血及脐血单个核细胞端粒酶活性与妊高征的关系。一、资料与方法1.研究对象 :妊高征组 :选择 2 0 0 1年 2月至 2 0 0 1年 7月在我院产科住院的妊高征患者 3 5例 ,按乐杰主编的《妇产科学》(第 4版 ) [4 ] 分类 ,其中轻度妊高征 7…     

猕猴异体子宫移植技术的应用研究

目的探讨猕猴异体子宫移植活体捐赠手术技巧应用,为下一步人体子宫移植临床试验提供实验数据。方法选用性成熟、月经规律的雌性猕猴2只,根据血型和体重选取供体1例和受体1例,将切除的供体子宫及髂血管给予器官保存液冷保存、灌注后原位移植到受体盆腔,供体的髂内动脉、髂外静脉与受体的髂外动、静脉使用端-侧吻合法间断吻合,术中根据移植血管的搏动、子宫的色泽判断移植是否成功,术后给予他克莫司、环孢霉素、泼尼松三联免疫抑制剂预防移植免疫排斥。结果受体猕猴移植双侧髂血管吻合成功,可触及移植血管搏动,移植子宫恢复血流灌注后子宫颜色由灰白逐渐转为暗红。受体动物于子宫移植术后28d死亡,评估死亡原因可能为慢性衰竭。结论猕猴是适用于异体子宫移植研究的大型动物模型,使用髂内动脉与受体的髂外动脉进行端-侧吻合法吻合是可行的,三联免疫抑制剂可有效预防移植免疫排斥。     

针对HLA-G的siRNA的载体构建与表达及效应检测

目的构建针对HLA-G的siRNA的表达载体,研究其对NK细胞杀伤效应的影响。方法构建针对HLA-G的siRNA真核表达质粒pSuppressor-U6-neo-HLA-G,转染JEG-3滋养细胞系。采用RT-PCR、Western blot检测转染的JEG-3细胞中HLA-G的表达水平。将NK-92MI细胞(效应细胞)与滋养细胞(靶细胞)共同培养,以LDH释放法观察不同效靶比例时NK-92MI细胞对靶细胞的杀伤效应。结果NK-92MI细胞对转染针对HLA-G的siRNA的JEG-3细胞的杀伤作用较未转染细胞明显升高(P<0.001)。结论针对HLA-G的SiRNA增加NK细胞对滋养细胞的杀伤,HLA-G具有保护滋养细胞免受NK细胞杀伤的作用。     

脂蛋白脂酶基因在子痫前期胎盘中的变化及意义

目的研究脂蛋白脂酶(lipoproteinlipase,LPL)mRNA在于痫前期患者胎盘组织中的表达与定位,探讨其在子痫前期病理生理过程中的作用。方法利用cDNA表达谱芯片检查子痫前期胎盘组织与正常胎盘组织之间的差异表达基因;根据筛选结果,采用半定量RT-PCR检测子痫前期患者胎盘组织(研究组)和正常孕妇胎盘组织(对照组)中LPLmRNA的表达;以原位杂交方法进行定位。结果在4轮杂交过程中,共筛选出22条有差异表达的基因,其中LPL基因为表达降低基因之一;正常胎盘组织和子痫前期胎盘组织中均存在LPLmRNA,子痫前期胎盘组织中LPLmRNA表达明显低于正常胎盘组织(0.208±0.067vs0.524±0.139,P<0.05);LPLmRNA分布在胎盘绒毛滋养细胞胞浆。结论胎盘组织中LPL的低表达可能参与子痫前期的发病过程。     

正常孕妇不同孕周血清中sHLA-G的水平

目的: 探讨正常妊娠妇女不同孕周血清可溶性人类白细胞抗原G(sHLA-G)在妊娠过程中的作用.方法: 采用ELISA法检测20例正常孕妇不同孕周血清中的sHLA-G水平.结果: 血清sHLA-G的水平在正常妊娠的早、中、晚孕期的均值依次为(11.96±4.27)ìg/L、 (11.50±4.17)ìg/L、 (10.72±3.40)ìg/L; 差异无统计学意义.结论: 血清sHLA-G的水平在正常妊娠的整个过程中差别不大, 对维持胎儿的正常发育具有重要意义.     

缺氧诱导因子1α在妊高征和正常妊娠胎盘组织中的差异表达

目的:探讨缺氧诱导因子1α(HIF-1α)蛋白及其mRNA在妊高征和正常妊娠胎盘组织中的表达的差异。方法:应用Westernblot检测10例妊高征和10例年龄匹配的正常妊娠的胎盘组织中HIF-1α蛋白表达的水平;应用实时定量PCR,检测两种组织中HIF-1αmRNA表达的水平。结果:与正常妊娠胎盘组织相比较,妊高征胎盘组织中HIF-1α蛋白和mRNA的表达水平明显增加(P<0.05)。结论:HIF-1α在妊高征胎盘组织中表达增高,可能与妊高征的病因及病理生理有关。     

妊娠合并宫颈癌4例报告及文献复习

<正>宫颈癌是最常见的妇女生殖道恶性肿瘤。近年宫颈癌发病日趋年轻化,<35岁患者的比例逐渐增大,生育年龄日趋后移,妊娠合并宫颈癌越来越受到人们的重视。但对于妊娠合并宫颈癌的治疗,目前仍无规范可循。本文回顾性分析了2005年至2010年我院收治的4例妊娠合并宫颈癌,现报告如下。1临床资料1.1病例1患者,女,32岁,因"停经33+3周,不规则阴道     

小鼠着床前胚胎miR-125a,miR-295和miR-181b的表达

目的：研究小鼠着床前胚胎发育过程中miRNA表达水平的变化，探讨miRNA对着床前胚胎发育过程的作用．方法：建立小鼠超排、交配系统，收集着床前胚胎，提取smallRNA；采用miRNA特异RT引物进行反转录，采用SYBRGreen实时定量PCR技术，研究miR-125a，miR-295和miR-181b在小鼠着床前胚胎发育过程中表达水平的变化．结果：着床前胚胎发育的各阶段均表达miR-125a，miR-295和miR-181b；随着胚胎发育进程，miR-295的表达呈逐渐上升的趋势；miR-125a在卵母细胞到2细胞发育阶段呈下降趋势，以后随发育进程呈逐渐上升趋势．结论：小鼠着床前胚胎中表达miRNA，着床前胚胎的发育和分化过程可能受到miRNA的调控．