携带报告基因EGFP的CXCR4 RNA干扰质粒的构建及生物活性的鉴定

目的构建携带报告基因EGFP的CXCR4RNA干扰质粒,证实其高效抑制靶基因表达的生物活性。方法设计有发夹状结构的两条DNA序列,用PCR扩增CXCR4特异性小干扰RNA(smallinterferingRNA,siRNA),转入带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和启动子U6的pGensil-1质粒,转化DH5a菌株,提取质粒行酶切及测序鉴定。重组质粒转染PC-3m细胞株,检测绿色荧光蛋白表达及对细胞CXCR4表达的抑制情况。结果成功构建了CXCR4靶向的RNA干扰质粒pGensil-1/siCXCR4,在靶细胞可同时表达siRNA及绿色荧光蛋白。结论pGensil-1/siCXCR4质粒的成功构建对利用基因干扰技术治疗前列腺癌转移方面的研究奠定了一定的实验基础。     

儿童完全性重复肾伴输尿管囊肿的手术方式选择及疗效分析

目的：探讨儿童完全性重复肾伴输尿管囊肿的手术治疗方式,并分析其手术疗效。方法：回顾分析2012年1月至2018年7月行手术治疗的60例完全性重复肾伴输尿管囊肿患儿临床资料。其中,因上肾段发育不良行重复肾及输尿管切除术34例;上肾段发育良好者中,合并重度膀胱输尿管反流（vesicoureteral reflux,VUR）或非囊肿所在输尿管末端狭窄5例,行输尿管再植术,余21例行经尿道膀胱镜下输尿管囊肿开窗引流术。通过临床表现、肾积水程度、输尿管扩张程度、输尿管囊肿大小、VUR、再手术率等指标评估手术疗效。结果：术后60例患儿均获随访,随访时间1~55个月,平均11.6个月。行重复肾及输尿管切除术34例中,术后尿路感染5例;再行输尿管囊肿开窗引流2例,余32例中,B超仍可见输尿管囊肿6例,囊肿直径与术前相比有显著性差异[（13.2±4.4） mm vs. （26.3±3.9） mm,P=0.004]。行经尿道膀胱镜下输尿管囊肿开窗引流术21例中,术后尿路感染6例;再行重复肾及输尿管切除3例,再行输尿管膀胱再植术1例,余17例术后上肾段积水较术前减轻,差异有统计学意义[（9.9±8.2） mm vs. （24.9±10.8） mm,P=0.000],其中8例仍有输尿管扩张,较术前有统计学差异[（7.0±2.5） mm vs. （10.0±3.3） mm,P=0.007]。行输尿管膀胱再植术5例中,术后尿路感染1例,无再手术者,上肾段积水较术前减轻,差异有统计学意义[（10.0±2.9） mm vs. （24.2±6.9） mm,P=0.004]。结论：膀胱镜下输尿管囊肿开窗、重复肾及输尿管切除和输尿管再植术均可作为完全性重复肾伴输尿管囊肿的治疗方式。对于上肾段发育不良者,建议行上肾段及输尿管切除术。若上肾段发育良好,且合并重度膀胱输尿管反流或其他输尿管末端畸形者,建议行输尿管再植术;而无其他合并畸形者,可选择创伤小的经尿道膀胱镜下输尿管囊肿开窗术。     

Expression and function analysis of dengue virus type 1 to 4 envelope domain Ⅲ recombinant fusion protein

Objecfive To observe the ability of dengue virus type 1-4 envelope domain Ⅲ fusion protein to inhibit virus infection and analyze the neutralizing ability of polyclonal antibodies against rEⅢ.Methods After being connected by linker peptide.EⅢ protein of Dengue virus serotypes 1-4 were expressed in E coli BL21(DE3) then purified.Fusion proteins were verified by Western Blot and ELISA.Rabbits were immunized with fusion proteins to produce anti-rE Ⅲ serum.The activity of anti-rEⅢ serum were detected through indirect immunofluorescence assay test.Inhibition of dengue virus type 1 to 4 infection in BHK-21 cells by rEⅢ fusion protein were tested.Neutralizing activity of anti-rEⅢ serum was analyzed.Results Dengue virus type 1 to 4 envelope domain Ⅲ recombinant fusion protein was expressed in Ecoli BL21 and purified successfully.Then rEⅢ fusion protein and anti-rEⅢ serum were analyzed respectively and rEⅢ fusion protein can effectively inhibit dengue virus type 1 to 4 from infecting BHK cells.The anti-rE Ⅲ serums can neutralize dengue virus type 1 to 4 but with different neutralizing titer.Conclusion Dengue virus type 1-4 envelope domain Ⅲ fusion protein can directly inhibit DV infeetion.Antibodies induced by rE Ⅲ fusion proteins can neutralize dengue virus type 1-4.     

128层螺旋CT在经导管肝动脉化疗栓塞术前血供及术后疗效 评价中的应用

目的 探讨128层螺旋CT在肝癌经动脉化疗检塞术(TACE)前血供情况及疗效评价的应用价值.方法 选取2013年1月至2017年1月在六安市中医院住院的28例肝癌患者,在TACE治疗前先行上腹部平扫、增强及肝部腹腔动脉血管成像检查,观察肝癌供血血管的起源和走行,评价128层螺旋腹腔血管成像对肝癌介入治疗的指导作用,观察介入治疗后碘油沉积情况.结果 经TACE治疗4周后,CT观察碘油情况,7例全瘤均匀致密,21例病灶内散在沉积高密度碘化油影,密度不均匀,形态不规整,增强128层螺旋CT扫描显示17例患者肿瘤较治疗前缩小.结论 128层螺旋CT能清楚显示肿瘤供血血管的解剖结构,肝脏肿块内的碘油沉积分布情况,对介入栓塞治疗后的疗效进行评价,有助于临床制定肝癌介入治疗计划、治疗方案.     

薯蓣丸的应用研究概况

正薯蓣丸出自《金匮要略·血痹虚劳病脉证并治第六》,该方由21味药物组成,组方精当、严谨,体现出了补益脾胃、益气养血、祛风散邪的治疗思路,仲景立此方本是治疗"虚劳诸不足,风气百疾",历代医家经过发挥,将此方视为调理脾胃,治疗虚劳疾病之主方。随着中医学事业的不断发展,现代临床各医家将此方广泛运用于治疗各种经年不愈的慢性虚损性疾病,尤其是各种疑难杂症,取得了一定的疗效。现将近年来薯蓣丸在临床治疗中的应用研究现状综述如下。     

嗜铬细胞瘤50例分析

目的：总结嗜铬细胞瘤的诊治体会。方法：回顾性分析50例嗜铬细胞瘤的临床资料。结果：82％的患者有高血压史，平均病程28个月。血儿茶酚胺和尿香草基苦杏仁酸增高者分别为68％，84％。B超、CT定位诊断阳性率为90％，95％；术前诊断正确率为94％。良性嗜铬细胞瘤43例，恶性嗜铬细胞瘤7例，其中：2例临床病程为良性而病理诊断为恶性，1例初次发病即为恶性，4例为复发性。2例恶性嗜铬细胞瘤伴肝转移放弃治疗，1年后死亡。结论：患者延迟就诊，基层医生对该病缺乏认识是导致误诊的主要原因。复发性嗜铬细胞瘤有很高的恶变性，应尽可能完整切除肿瘤，并加强随访。     

登革2型病毒ZS01/01株E蛋白在真核细胞中的分泌表达研究

目的 对登革2型病毒(DENV-2)ZS01/01株E蛋白在哺乳动物细胞及昆虫细胞中的分泌表达进行研究.方法 RT-PCR扩增DENV-2 prM/E基因,通过融合PCR在prM基因前添加来自乙型脑炎病毒的信号肽序列,并将E基因羧基末端20%区域缺失或替换为乙型脑炎病毒SA14-14-2株E基因相应序列,将上述基因元件分别克隆入哺乳动物细胞表达载体pcDNA5/FRT及昆虫细胞表达载体pAcUW51-M中,将重组质粒转染293T细胞或S19细胞,利用间接免疫荧光(Immunofluoreseence assay,IFA)及Western Blot检测E蛋白的表达与分泌.结果 各重组质粒分别转染293T细胞或Sf9细胞后,E蛋白在细胞内均有效表达,而仅有携带乙脑信号肽且缺失或替换E基因羧基末端20%区域的重组质粒转染293T细胞后,上清中可检测到明显的E蛋白分泌.结论 信号肽及E基因羧基末端20%区域对登革病毒E蛋白的分泌至关重要,宿主细胞对其亦有一定影响.     

从“开玄充络”谈热证用灸法

热证是否可灸一直为历代医家所争论,近年来,虽然热证施灸在临床上应用逐渐增多,达成共识,但其理论解释难免繁杂,缺乏说服力,本研究从“开玄充络”理论入手,阐释热证可灸的中医理论.     

不同方式高蛋白营养支持对危重症患者的影响

目的 探讨不同方式高蛋白营养支持对危重症患者营养状态、免疫功能及治疗结局的影响。 方法 选取我院危重症患者90例,随机分为对照组、蛋白粉组与氨基酸组,各30例。3组在给予相等非蛋白质热量［25 kcal·kg-1·d-1］摄取条件下,对照组仅给予肠内营养乳剂TPF（瑞先）,蛋白粉组按照1.5~2.0 g·kg-1·d-1给予乳清蛋白粉,氨基酸组按照1.5~2.0 g·kg-1·d-1给予复方氨基酸,3组均干预2周。统计3组治疗情况（住ICU时间、机械通气时间）、不良事件发生率、干预前及干预1周、2周后营养相关指标、T淋巴细胞亚群。 结果 蛋白粉组、氨基酸组住ICU时间、机械通气时间短于对照组;蛋白粉组、氨基酸组干预1周、2周后营养状态及免疫功能均高于对照组（P＜0.05）;3组不良反应发生率差异无统计学意义（P＞0.05）。 结论 通过高蛋白营养支持,有助于增强机体免疫功能,纠正营养不良,改善治疗结局。     

生物芯片技术在中药研发与海洋活性物质筛选方面的应用及展望

目的 对生物芯片技术在中药研发与海洋活性物质筛选方面的应用作一综述.方法 检索归纳相关文献,按照生物芯片技术的基本概念、形式分类,操作流程、应用状况等分类综述.结果 与结论生物芯片技术在中药研发与海洋活性物质筛选领域中已得到较广泛应用,并有着乐观的发展前景.