腹腔镜下子宫恶性肿瘤根治术患者及其配偶术前焦虑状况

目的了解腹腔镜下子宫恶性肿瘤根治术患者及其配偶术前焦虑情况,为手术前实施针对性的指导提供依据。方法将志愿参加本研究并符合入组条件的患者及其配偶分为患者组（20例）和配偶组（20例）,在患者接受腹腔镜下子宫恶性肿瘤根治术前,采用Zung焦虑自评量表调查两组术前焦虑情况。结果患者组焦虑分值46.31±6.98,配偶组焦虑分值43.08±9.05,两组焦虑分值均显著大于常模分值29.78±10.07,而两组间无统计学差异。结论腹腔镜下子宫恶性肿瘤根治术患者及配偶术前普遍存在显著的焦虑,术前对患者及其配偶进行心理指导非常必要。     

2例多数牙先天缺失患儿及其父母的Pax9基因突变检测

目的:探讨多数牙先天缺失患者的基因突变位点.方法:从两例多数牙先天缺失患者与家庭成员的静脉血中提取DNA,在Pax9基因内设计引物,采用PCR方法扩增Pax9基因的外显子2、3、4,而后通过对分段PCR纯化产物的测序,并结合系谱进行单核甘酸多态性分析.结果:外显子3的第88、89位点上发现两个单核甘酸多态性位点(single nucleotide polymorphisms,SNPs),其中第88位为C变为T,第99位为G变为C,前者是同义突变,后者是错义突变,由丙氨酸变为脯氨酸.结论:多数牙先天缺失可能与Pax9基因外显子3的第88、89位点上的两个SNPs有关.     

高功率微波辐照后大鼠生精细胞凋亡的变化

目的 :研究高功率微波 (HPM)辐照对大鼠生精细胞凋亡的影响。　方法 :12 5只健康成年雄性SD大鼠分为对照组 (2 5只 )和实验组 (10 0只 )。实验组应用S波段平均功率密度为 10、2 0mW/cm2 的HPM ,分别固定持续照射5、10min ,并随机分为 10mW/cm2 、5min组 ,10mW/cm2 、10min组 ,2 0mW/cm2 、5min组 ,2 0mW/cm2 、10min组 (每组2 5只 )。再根据取材时间不同随机分为 6h组 ,2 4h组 ,4 8h组 ,72h组和 5d组 ,共 2 0小组 ,每组 5只。应用原位末端标记技术 (TUNEL)检测各组凋亡细胞。　结果 :10、2 0mW/cm2 辐照 5min后的 6、2 4、4 8h组 ,大鼠睾丸凋亡生精细胞数量明显高于对照组 (P <0 .0 1) ,以 10mW/cm2 、5min、6h组凋亡细胞数量最多 ,达 (16 1.2 7± 5 .90 )个 /5个精曲小管。 72h组、5d组及 10、2 0mW/cm2 辐照 10min ,各组与对照组间差异无显著性 (P均 >0 .0 5 )。　结论 :HPM诱导大鼠睾丸组织发生凋亡与照射时间和取材时间有关 ,本实验条件下的HPM辐照大鼠 5min可触发生精细胞凋亡数增加 ,影响大鼠生殖功能。     

VEGF111b的表达载体构建及抗体制备

目的克隆VEGF111b基因,构建真核表达载体pc DNA3.1-VEGF111b,并进行测序,制备VEGF111b多克隆抗体。方法丝裂霉素C诱导处理卵巢癌SKOV3细胞24 h,设计VEGF111b酶切引物,以SKOV3细胞的c DNA为模板,通过PCR得到VEGF111b特异性基因产物,克隆入真核表达载体pc DNA3.1中,获得重组真核表达载体pc DNA3.1-VEGF111b,测序验证。用KLH耦联VEGF111b特异性短肽,制备多克隆抗体,Western blot检测其特异性。结果成功扩增了VEGF111b基因,双酶切、测序鉴定证实目的基因成功克隆到真核表达载体pc DNA3.1中,测序结果与预测完全一致,成功制备了VEGF111b多克隆抗体,使用其多克隆抗体,Western blot能够检测到VEGF111b对应分子量的蛋白条带。结论本研究鉴定了pc DNA3.1-VEGF111b真核表达载体,并验证了VEGF111b多克隆抗体的特异性,为进一步研究VEGF111b蛋白的功能奠定了基础。     

人类白细胞抗原G在宫颈癌组织中的表达及临床意义

目的探讨人类白细胞抗原G（human leukocyte antigenG,HLA—G）在宫颈癌组织中的表达及其临床意义。方法应用S—P免疫组织化学方法检测于2006年1月-2011年12月就诊我院的98例宫颈鳞癌患者术后病理标本,并分析HLA—G的表达与病理参数之间的关系。结果HLA—G分子在宫颈癌组织中表达率为43．9％（43／98）,而在癌旁正常宫颈组织的表达率为0。HLA—G分子表达与淋巴结转移、脉管浸润有相关性（P〈0．01）。结论HLA—G分子在宫颈癌组织中表达上调,并与宫颈癌的侵袭性生长相关。HLA—G分子参与肿瘤细胞免疫逃逸过程,促进肿瘤的发生和发展。     

妊高征胎盘组织脂代谢相关基因的异常表达

目的：了解妊娠高血压综合征患胎盘组织有关代谢基因的表达，寻找妊高征血管内皮损伤的原因．方法：选择4例重度妊高征胎盘组织为研究对象，以混合的4例正常胎盘总RNA为对照，用cy5dUTP和cy3dUTP分别标记妊高征胎盘组织cDNA和对照cDNA．将与代谢、凋亡等有关基因的cDNA点在特殊的硅化玻片上，制成4000点的cDNA表达谱芯片，用该芯片检查相关基因的表达．结果：在4次芯片杂交过程中，共有58-131条不等的基因发生差异表达，其中出现2次以上重复一致的异常表达基因共22条：表达增高的有13条，表达降低的有9条．脂代谢相关基因脂肪分化相关蛋白(ADRP)基因在3例胎盘组织中表达增高；脂蛋白脂酶(LPL)基因在4例妊高征胎盘组织中表达均降低．结论：脂代谢相关基因表达异常可能是血管内皮损伤的原因之一．     

男性无精子症和严重少精子症患者SPGY1基因微缺失的检测

目的：研究Y染色体上无精子因子(AZoospermia Factor,AZF)的缺失与无精症和严重少精子症的关系．方法：应用PCR方法检测了40例正常男子、42例无精子症和31例严重少精子症男子基因组DNA中AZFc区的SPGYl(SPer-matogenesis Gene locus on the Y)基因．结果：无精子症患中6例SPGYl基因缺失(6／42)；严重少精子症患中5例SP—GYl基因缺失(5／31)；73例男性不育患AZFc区SPGYl基因缺失率为15％(11／73)．40例已生育的正常男性对照均未检测到SPGYl基因的缺失．结论：Y染色体SPGYl基因缺失可能是造成男性不育的原因之一，有必要对男性不育患进行Y染色体基因缺失的检测。     

在小鼠着床前胚胎中c-myc的表达

目的: 观察小鼠着床前胚胎细胞中c-myc基因的表达, 了解其对早期胚胎发育可能影响的作用. 方法: 采用原位杂交及免疫组织化学ABC法,分别检测小鼠着床前胚胎细胞中c-myc mRNA及c-myc蛋白. 结果: 在小鼠2细胞、4细胞、6细胞、8细胞和囊胚期胚细胞中均检测到原癌基因c-myc转录产物的表达,c-myc mRNA分布于胚细胞的胞质和胞核. 免疫组织化学方法也发现,2细胞至囊胚期胚胎细胞的 c-myc蛋白均呈免疫反应阳性, 阳性物质分布于胞质和胞核中, 胚胎透明带则呈阴性反应. 结论: 小鼠早期胚胎有c-myc基因表达,c-myc基因对小鼠着床前胚胎发育可能起重要调节作用.     

特发性无精症与严重少精症患者DAZ基因缺失的研究

目的：探讨无精子缺失（deleted in azoospermia，DAZ）基因与精子发生的关系，以及特发性无精症与严重少精症患者DAZ基因缺失的发生率。方法：应用聚合酶链反应对特发性无精症或严重少精症患者DAZ基因进行检测，并结合患者的生殖激素水平及临床表型进行分析。结果：38例特发性无精症或严重少精症患者中有3例DAZ基因缺失，缺失率为7.9%，3名患者的血清FSH水平均升高。20名精子计数正常、有生育能力的男性无DAZ基因缺失。结论：DAZ基因可能与精子发生相关，DAZ的微缺失可能是造成男性不育的原因之一。     

线粒体DNA与早期胚胎发育的研究进展

线粒体是胞质中独特的细胞器,为细胞各种代谢提供能量。线粒体具有自己独立的遗传物质——线粒体DNA(mt DNA),是细胞核基因组外的遗传物质。在早期胚胎发育过程中,线粒体会呈现不同的形态及分布,mtDNA的突变及拷贝数变化会对胚胎发育结局产生重要影响。最新研究表明,线粒体DNA突变增多则mt DNA拷贝数增加;囊胚期mt DNA拷贝数多,则胚胎移植成功率高;反之亦然。尽管进行了染色体形态学和遗传学检查,仍有卵母细胞不能成功受精并发育成完好的胚胎;即使胚胎完好,仍有部分胚胎移植失败。因此,从mt DNA角度探讨提高卵母细胞质量的方法对改善辅助生殖技术中移植成功率具有重要意义。