Construction of retroviral vectors to induce a strong expression of human interferon-β gene in human hepatoma cells

ClassIinterferonisapotent1mmunemodu-latingfactorinvivo,andplaysanimportantrolelnactivatinganti-tumorcytotoxicTlymphocytesandnonuspecificeffectorcellssuchasNKcellsLlJ.ln-terferonandmanyothercytokinegeneswereintro-ducedintotumorcells,tumorinterstitialcellsandtumorinfiltratinglymphocytes['-']inordertosustainaneffectiveanti-tumorconcentrationofcy-tokinelocatedattumorsites.Itwasshownthatsomecytokinegenemodifiedtumorcellslosttheirtumorigenicityandinhibitedthegrowthofparentaltumorinanimalmodels.Pra…     

候选HCVE1蛋白疫苗在健康志愿者中的耐受性和免疫原性

比利时Ghent大学和医院的Leroux-Roels等在Vero细胞中表达了1b丙型肝炎病毒（HCV）的E1蛋白，即羧基端截短的重组E1蛋白（192～326位氨基酸）。它装配形成20nm的病毒样颗粒后，在免疫小鼠中显示了良好的免疫原性。他们以之为候选疫苗，在20名男性志愿者中进行Ⅰ期临床试验。     

噬菌体作为疫苗和药品开发的工具

近几十年来,疫苗的不断发展使得接种疫苗在某些感染性疾病的预防、治疗方面成为最有效的方法。不过与在这方面所投入的巨大人力、财力相比,疫苗的成功率还很低。至今尚未研制成功有效的疫苗以预防结核病、麻风、HIV、HCV及大部分寄生虫病。其中最具代表性的是艾滋病疫苗,虽然一     

Studies on hepatitis C virus and prevalence of its infection in China

PrinceandGoldfieldfirstreportedthenon--A,non--Bpost--transfusionhepatitis(NANBH)byexclusivediagnosisin1974.Theepidemiologicda.talaterconfirmedthatthereweretwokindsofNANBH,parenterallytransmittedNANBHandenterallytransmittedNANBH.'In1989,Chooandhiscolleagues['JidentifiedhepatitisCvirus(HCV)genomiccDNAbyimmunoscreeningtheAgtllcDNAlibraryofthevirus,themajorcausativeagentofparenterallytransmittedNANBH.TheanalysisofthegenomeshowedthatHCVisamemberofflavivirusfamilywithasinglepositiv…     

携带hIL-2cDNA的逆转录病毒载体的构建及其在人肝癌细胞中的特异表达研究

将人白细胞介素２（ｈＩＬ-２）ｃＤＮＡ克隆到逆转录病毒载体ＭＮＳＭ的ＰＬ位点　，分别构建了转录受ＳＶ４０早期启动子和人甲胎蛋白增强子调控的重组逆转录病毒载体ＭＮＳＩ和ＭＮＳＩＡ。用脂质体转染法将ＭＮＳＩ和ＭＮＳＩＡ分别转导ＰＡ３１７包装细胞，测质粒转染率为（５～２０）×１０~(－３)克隆／μｇＤＮＡ·１０~６细胞，病毒感染率为（５．４～４５０）×１０~４ＣＦＵ／ｍｌ。重组病毒在４μｇ／ｍｌ ｐｏｌｙｂｒｅｎｅ存在条件下感染人肝癌细胞、肾癌细胞和黑色素瘤细胞，Ｎｅｏ~Ｒ克隆经Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析证明ｈＩＬ－２ｃＤＮＡ转入人肿瘤细胞并整合，　Ｒ　ＮＡ斑点杂交及ＩＬ－２活性表达分析证明，人甲胎蛋白增强子可促进异源启动子启动ｈＩＬ－２ｃＤ－ＮＡ在合成甲胎蛋白的人肝癌细胞中高效特异转录和表达。该研究对肝癌特异性免疫增强基因治疗有重要意义。     

脑源性神经营养因子与帕金森病

帕金森病 (PD)的最主要病理特征是中脑黑质致密部(substantia nigra pars com pacta,SNpc)多巴胺 (DA)能神经元的进行性退化变性 ,由于其机制还不清楚 ,因而限制了此病的临床治疗。脑源性神经营养因子 (brain- derived neu-rotrophic factor,BDNF)由 Barde等于 1982年在猪脑中首次发现 ,其氨基酸序列有 5 5 %～ 6 0 %与神经生长因子 (nervegrowth factor,NGF)完全相同 ,也属神经营养素 (neu-rotrophin)家族的成员 ,BDNF可通过其高亲和力受体 trk B和低亲和力受体 p75 NTR发挥生物活性 ,能够促进多种神经元的存活 ,尤其对 DA能神经…     

霍乱弧菌单克隆抗体诊断应用的研究——Ⅱ.酶标霍乱弧菌单克隆抗体快速检测霍乱弧菌的实验研究

本文就所获得的12株霍乱弧菌单克隆抗体中有种特异性的三株(2B_1H_1C_6,2B_1H_1F_6及2B_1H_1F_3)单克隆抗体及抗霍乱弧菌多克隆抗体,作酶标抗体直接法和间接法,对霍乱弧菌模拟标本进行快速检测,探究在临床诊断应用中的价值。结果表明,酶标McAb较酶标多克隆抗体敏感,前者在10~4/ml菌时可以检出,后者要在10~4～10~6/ml菌时才能检出;同时表明酶标间接法比直法敏感,特异性实验结果显示酶标单克隆抗体对10株霍乱弧菌有很高的     

霍乱弧菌单克隆抗体诊断应用的研究——Ⅳ.McAb吖啶橙(McAb-AO)简易免疫荧光菌团法快速检定霍乱弧菌的实验研究

将获得的12株霍乱弧菌单克隆抗体中的一株“2B_1H_1C_6”的McAb与荧光素吖啶橙标记制成简易AOFA、对霍乱弧菌模拟标本进行快速检测,研究其敏感性,特异性和实用性同时以霍乱弧菌多克隆抗体比较。结果表明:McAb-AO比PcAb-AO敏感度高,特异性强(前者仅对霍乱弧菌呈现荧光菌团,对其它肠道菌无交叉反应),在每毫升类模拟标本中含10个     

血管生成抑素endostatin的表达、纯化及活性研究

目的：将从人胎肝组织克隆的血管生成抑素endostatin基因进行原核表达、纯化,检测重组endostatin的生物学活性。方法：利用原核表达载体pBV220在大肠杆菌DH5α中表达endostatin,利用肝素Sepharose亲和层析及SephacrylS-200分子筛纯化;通过体外内皮细胞（ECV304）增殖实验及体内鸡胚尿囊膜（CAM）新生血管实验检测其抑制活性。结果：Endo-statin在DH5α中的表达率为28.5%,纯化后纯度可达90.5%.En dostatin可明显抑制体外培养的内皮细胞增殖.IC50为72ug/ml;20时使细胞于48h发生明显凋亡;200ug/ml的endostatin可使CAM新生血管化率下降30%.结论:研究结果表明endostatin对内皮细胞具有明显抑制作用.提示其在肿瘤及新生血管性疾病的治疗中有潜在的应用前景。     

血液透析患者中TT病毒感染的检测及序列分析

目的：研究血液透析患中TT病毒（TTV）的感染状况及其致病性。方法：针对病毒基因保守区设计引物,采用套式PCR方法对69例血液透析患血清标本进行TTVDFNA检测及序列分析。并同时检测患血清丙氨酸转氨酶（ALT）及丙型肝炎病毒抗体（抗-HCV）。结果：患血清TTVDNA总阳性率为27.5%。对其中1例PCR扩增产物测序。结果与其他TVV分离株如GH1、TA278、TTVCHN1和TTVCHN2的核苷酸序列同源性为89%-100%,推测的氨基酸序列同源性为87%-100%。抗-HCV阳性与阴性患的TTV DNA阳性率无明显差异。所有患均未见ALT明显升高。结论：血液透析患存在较严重的TTV感染与HCV感染无明显相关性。未发现TTV感染导致ALT明显升高的证据。