肥大细胞负调控分子与变态反应性疾病

Ⅰ型变态反应病的发生率逐年上升，目前缺乏有效的治疗方法，严重影响人类的健康和患者的生活质量。近年来，利用免疫负调控作用的信号分子，抑制肥大细胞和嗜碱粒细胞释放炎性介质和细胞因子，为Ⅰ型变态反应性疾病的免疫治疗开辟了新的途径。肥大细胞和嗜碱粒细胞表面表达的IgE高亲和力受体（FceRI）在Ⅰ型变态反应发生中起着重要作用，     

HIV-1/HCV合并感染者中HCV基因亚型流行情况调查

目的 了解中国部分地区HIV-1和HCV合并感染人群中HCV基因亚型的流行、分布及其与HIV-1感染疾病进展的关系.方法 对186份获自河南、云南、新疆、吉林和辽宁省HIV-1/HCV合并感染人群标本(HCV病毒载量>1000 cop/ml),用反转录巢式聚合酶链反应方法扩增血浆HCV核心基因区并进行基因亚型分型,同时检测HIV-1和HCV载量以及CD4+T细胞计数.结果 (1)HCV不同基因亚型比例分别为1a(1.7%)、1b(39.9%)、2a(17.9%)、3a(10.4%)、3b(15.6%)、6a(1.2%)、6n(6.4%)和6型未鉴定亚型(7.5%).HCV 2a和1b主要流行于河南省既往有偿献血浆人员中;3a和3b亚型主要流行于新疆和云南静脉注射吸毒者(IDU)中;HCV6型主要流行于云南吸毒人员中.(2)1b亚型的HCVRNA水平显著高于非1b亚型,但在HIV-1载量和CD4+T细胞数方面差异无统计学意义.2a亚型的HIV-1 RNA和HCV RNA水平显著低于非2a亚型.结论 HIV-1/HCV合并感染人群中HCV基因亚型的流行和分布与流行地区和感染途径有关.新的HCV6型亚型病毒株已经在合并感染的IDU人群中流行.尚未发现HCV基因哑型与HIV感染疾病进展之间的关系.     

HIV-1/HCV合并感染者中HCV基因亚型流行情况调查

目的 了解中国部分地区HIV-1和HCV合并感染人群中HCV基因亚型的流行、分布及其与HIV-1感染疾病进展的关系.方法 对186份获自河南、云南、新疆、吉林和辽宁省HIV-1/HCV合并感染人群标本(HCV病毒载量>1000 cop/ml),用反转录巢式聚合酶链反应方法扩增血浆HCV核心基因区并进行基因亚型分型,同时检测HIV-1和HCV载量以及CD4+T细胞计数.结果 (1)HCV不同基因亚型比例分别为1a(1.7%)、1b(39.9%)、2a(17.9%)、3a(10.4%)、3b(15.6%)、6a(1.2%)、6n(6.4%)和6型未鉴定亚型(7.5%).HCV 2a和1b主要流行于河南省既往有偿献血浆人员中;3a和3b亚型主要流行于新疆和云南静脉注射吸毒者(IDU)中;HCV6型主要流行于云南吸毒人员中.(2)1b亚型的HCVRNA水平显著高于非1b亚型,但在HIV-1载量和CD4+T细胞数方面差异无统计学意义.2a亚型的HIV-1 RNA和HCV RNA水平显著低于非2a亚型.结论 HIV-1/HCV合并感染人群中HCV基因亚型的流行和分布与流行地区和感染途径有关.新的HCV6型亚型病毒株已经在合并感染的IDU人群中流行.尚未发现HCV基因哑型与HIV感染疾病进展之间的关系.     

携带DT_(390)-VEGF_(165)或DT_(390)-VEGF_(exon7)融合基因的真核表达载体的构建及表达

抑制血管再生可能是治疗实体瘤的有效途径。肿瘤血管生成的主要调控者是血管内皮细胞生长因子(ＶＥＧＦ)。ＶＥＧＦ的 5种异构体中ＶＥＧＦ165是表达丰度最高的异构体 ,ＫＤＲ和Ｆｌｔ 1为ＶＥＧＦ的高亲和受体。1996年Ｓｏｋｅｒ等在各种肿瘤细胞系上发现了仅与ＶＥＧＦ165外显子 7编码的结构域结合的受体 ,即ＶＥＧＦ165Ｒ[1] 。目前将细菌毒素的跨膜结构域和酶性结构域与细胞因子或抗体构成的融合蛋白靶向杀伤各型细胞的研究已有大量报道 ,但这些融合毒素仅对某些类型的肿瘤有效。为扩大癌症治疗范围 ,我们选择ＶＥＧＦ165和ＶＥＧＦｅｘ…     

血管生成抑制素Endostatin研究新进展

目的：探讨抗ＰＭＬ－ＲＡＲα反义核酸对早幼粒白血病细胞生长、细胞周期、细胞凋亡的作用。方法：以ＮＢ４细胞株为研究对象;细胞计数采用台盼兰排除、计数板计数法;白血病细胞集落采用甲基纤维素半固体培养;流式细胞仪（ＦＣＭ）用于检测细胞凋亡和细胞周期。结果：以６０μｇ／ｍｌ的终浓度处理细胞,抗 ＰＭＬ－ＲＡＲα融合部位反义核酸（ＦＵＡＳ）能明显抑制ＮＢ４细胞增殖及白血病细胞集落（ＡＭＬ－ＣＦＵ）形成,最大抑制率分别为４６．８％,５１．６％;ＧＭ－ＣＳＦ能减弱ＦＵＡＳ的作用,ＦＵＡＳ作用时间越短,ＧＭ－ＣＳＦ促ＡＭＬ－ＣＦＵ增加越明显;ＦＵＡＳ处理第７,９天,出现明显的凋亡细胞群,凋亡细胞百分比分别为４１．０％,３４．２％;ＦＵＡＳ处理第５天Ｓ期下降,Ｇ２／Ｍ期升高,第７天Ｃ０／Ｇ１期明显升高,Ｓ期回升。结论：抗ＰＭＬ－ＲＡＲα反义核酸具有抑制早幼粒白血病细胞增殖、诱导细胞凋亡的作用。     

血液透析患者中TT病毒感染的检测及序列分析

目的：研究血液透析患中TT病毒（TTV）的感染状况及其致病性。方法：针对病毒基因保守区设计引物,采用套式PCR方法对69例血液透析患血清标本进行TTVDFNA检测及序列分析。并同时检测患血清丙氨酸转氨酶（ALT）及丙型肝炎病毒抗体（抗-HCV）。结果：患血清TTVDNA总阳性率为27.5%。对其中1例PCR扩增产物测序。结果与其他TVV分离株如GH1、TA278、TTVCHN1和TTVCHN2的核苷酸序列同源性为89%-100%,推测的氨基酸序列同源性为87%-100%。抗-HCV阳性与阴性患的TTV DNA阳性率无明显差异。所有患均未见ALT明显升高。结论：血液透析患存在较严重的TTV感染与HCV感染无明显相关性。未发现TTV感染导致ALT明显升高的证据。     

血管生成抑素endostatin的表达、纯化及活性研究

目的：将从人胎肝组织克隆的血管生成抑素endostatin基因进行原核表达、纯化,检测重组endostatin的生物学活性。方法：利用原核表达载体pBV220在大肠杆菌DH5α中表达endostatin,利用肝素Sepharose亲和层析及SephacrylS-200分子筛纯化;通过体外内皮细胞（ECV304）增殖实验及体内鸡胚尿囊膜（CAM）新生血管实验检测其抑制活性。结果：Endo-statin在DH5α中的表达率为28.5%,纯化后纯度可达90.5%.En dostatin可明显抑制体外培养的内皮细胞增殖.IC50为72ug/ml;20时使细胞于48h发生明显凋亡;200ug/ml的endostatin可使CAM新生血管化率下降30%.结论:研究结果表明endostatin对内皮细胞具有明显抑制作用.提示其在肿瘤及新生血管性疾病的治疗中有潜在的应用前景。     

庚型肝炎病毒研究现状与展望

病原微生物是人类健康的大敌 ,1 977年至 1 997年的 2 0年中 ,人类先后发现并鉴定的重要致病微生物就有近 30种 ,包括埃博拉病毒、汉坦病毒、大肠杆菌 O1 57、艾滋病毒、霍乱弧菌 O1 39等 ,学术界将这类微生物所致的疾病称为“新现传染病”( emerginginfectious diseases)。由于对这类病原微生物本身及其致病机制了解甚少 ,加之人群缺乏免疫力及有效的防治方法 ,这类新的病原体常引起严重的传染性疾病 ,造成巨大的社会影响和经济损失。庚型肝炎病毒 ( hepatitis G virus,HGV)被认为是这类病原微生物之一。1　概　述在 1 989年丙型肝炎病…     

肝癌细胞核蛋白对白蛋白增强子／启动子序列的体外转录调控作用

目的：研究肝癌细胞核蛋白调控白蛋白＂持家基因＂转录调控序列对目的基因转录的作用。方法：分别从小鼠肝癌细胞、肝细胞和黑色素瘤细胞中提取核蛋白组分,用于体外启动白蛋白增强子／启动子的转录作用。结果：发现某些肝癌细胞和肝细胞核蛋白组分具有明显的转录作用,而细胞浆蛋白和其他肿瘤核蛋白组分没有转录作用,将同一肝癌细胞某些核蛋白组分合并可使转录活性增强。结论：本研究在基因转录调控水平部分解释了应用白蛋白增强子／启动子调控目的基因于肝癌细胞中特异表达的机理。     

献血员中TT病毒感染的检测及序列分析

目的： 研究ALT正常的献血员中TTV(transfusion transmitted virus) 的感染情况,探讨TTV感染的传播途径和致病性。方法： 设计TTV保守区域的特异性引物,聚合酶链反应(PCR)方法检测120例ALT正常的献血员,对1例TTV DNA阳性标本（TTVD026）进行PCR产物测序,并与已知TTV核苷酸序列比较同源性。结果： 120例ALT正常献血员中有20例为TTV DNA阳性,感染率为16.7％。同源性分析表明TTVD026与TA278,GH1,TTVCHN1和TTVCHN2的核苷酸同源性分别为99％,99％,99％和89％。结论： ALT正常的献血员中存在TTV的感染; TTVD026与TTV TA278,GH1,TTVCHN1和TTVCHN2可能属于同一个基因型;输血可能是TTV传播的主要途径。