外籍教师参与医学微生物学本科教学的几点思考

双语教学已经在医学专业课程教学中逐步展开,并取得较好的教学效果.在总结以往双语教学经验教训的基础上,尝试由外籍专业课教师直接参与本科学员医学微生物学理论课教学.客观地分析了外籍专业课教师在医学微生物学教学中的优势与不足,提出了结合学员实际情况,采用课前中文预习,课中随堂难点翻译,课后重点中文复习的辅助方式,使学员在掌握医学微生物学基本知识和技能的前提下,学习必要的专业英语词汇和表达,提高了专业英语表达和交流的能力.     

HCV核心蛋白噬菌体随机展示肽库的构建与筛选

目的探讨噬菌体随机肽展示技术在筛选和鉴定病毒抗原序列研究中的应用前景。方法用噬菌粒展示载体pCANTAB5X,构建HCV核心蛋白噬菌体随机展示肽库。用抗-HCV核心单独阳性的血清对该库进行4轮筛选,获得多个阳性克隆,测定和分析8个杂交阳性克隆的DNA序列。结果构建的随机文库含1.23×105个不同克隆,噬菌体滴度为2×1012TU/ml（转化单位/ml）。所测定的7个阳性序列中的6个为HCV核心蛋白序列,这些序列均含有与免疫筛选结果相似的HCV核心抗原序列。另一个为大肠杆菌nrfa基因。结论所建的噬菌体文库有足够大的库容和较好的随机性,可以从该文库中筛选出正确的HCVC抗原序列。噬菌体展示技术完全可应用于病毒蛋白抗原序列的筛选,并具有简便、快速、准确的优点。     

2019新型冠状病毒肺炎治疗研究现状

2019新型冠状病毒(2019 novel coronavirus,2019-nCoV)是继严重急性呼吸综合征冠状病毒(severe acute respiratory syndrome-coronavirus,SARS-CoV)和中东呼吸综合征冠状病毒(middle east respiratory syndrome-coronavirus,MERS-CoV)后出现的一种能引起人严重呼吸道疾病的新型冠状病毒。目前尚无特异性的靶向2019-nCoV的抗病毒治疗药物,面对新型冠状病毒肺炎日益严重的疫情和迫切需要解决的药物治疗策略,本文对新型冠状病毒肺炎抗病毒治疗研究现状与进展进行综述。     

白蛋白-干扰素治疗慢性丙型肝炎的研究进展

目前全世界约有1.7亿慢性丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)感染者,基于干扰素α(interferon α,IFN-α)应用的治疗方案仍是治疗HCV感染的主要方法.传统IFN因半衰期短、极易降解、需要反复给药而限制了其在临床上的应用.用聚乙二醇化方法修饰IFN可以延长IFN的半衰期,并已取得很好的结果.有些聚乙二醇IFN已经上市.研究证明,白蛋白-IFN(albinterferon,Alb-IFN)的效果好于聚乙二醇修饰的IFN,值得关注和深入研究.此文就Alb-IFN在丙型肝炎临床研究中的进展作一综述.     

B族Ⅰ型清道夫受体在丙型肝炎病毒入侵细胞中的作用

丙型肝炎病毒（hepatitis C virus,HCV）入侵宿主细胞是由多种受体分子介导的多步骤过程,其中B族I型清道夫受体(SR-BI/SCARB1) 被认为是最先与HCV作用的受体。SR-BI能够与HCV包膜糖蛋白E2相结合,在此过程中位于E2蛋白氨基末端的高变区1（hypervariable region 1,HVR1）起关键作用。SR-BI与HCV的相互作用,不仅能够介导HCV的细胞入侵,还能降低抗体对HCV的中和作用,有助于HCV的免疫逃避。因此,深入研究SR-BI在HCV入侵细胞过程中的作用机制,可望发现在HCV感染的初始环节能够高效地阻断HCV入侵细胞的靶分子,从而预防和治疗HCV的感染。本文就SR-BI的生物学特性、SR-BI与HCV的相互作用对病毒入侵细胞的影响及机制等方面的最新进展作一综述。     

微生物学实验教学中科研素质的培养

医学微生物学实验课是整个教学的重要组成部分,既能帮助学员巩固理论知识,又能增强学员的动手能力.随着医学科学技术的迅速发展,知识更新速度加快,对学员的培养要求也越来越高.在实验教学中开展科研素质教育和科研精神培养,可为学员今后从事相关医学和科研工作奠定基础.     

庚型和丙型肝炎病毒的全长cDNA克隆在体内外的表达与复制

目的：研究HGV和HCV的复制和表达。方法：利用HGV全长cDNA克隆(HGVqz)及HCV1a／1b嵌合体cDNA克隆分别构建表达质粒p3．1HGV和p3.1HCV并转染张氏肝细胞,以HGVqz克隆建立HGV转基因小鼠。分别应用RT—PCR、免疫组化及Western印迹分析病毒正、负链RNA,蛋白表达和剪切。结果：在转染p3.1HCV的张氏肝细胞及HGV转基因小鼠某些组织中可检出相应病毒的负链RNA,但在转染p3．1HGV的张氏肝细胞中未能检出HGV负链RNA。Western印迹在转染p3.1HCV的张氏肝细胞中检测到针对HCV NS3蛋白、相对分子质量约70000的特异性条带,在HGV转基因小鼠某些组织中检测到2条特异性条带,相对分子质量约42000和100000,分别相当于HGV E2蛋白及其剪切中间体。然而,在转染p3．1HGV的张氏肝细胞中检测到针对HGV E2蛋白的特异性条带,其相对分子质量约为310000,相当于HGV整个前体蛋白。结论：HGV的表达与复制在体内、外存在差异。细胞内某些特异性因子在病毒前体蛋白剪切中起重要作用,HGV和HCV前体蛋白剪切所需宿主因子可能存在差异,故两种病毒体外培养时的嗜性细胞株并不完全一致。     

细胞极性与丙型肝炎病毒受体介导的细胞入侵

丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)的细胞入侵过程由多因素介导,包括多种受体及触发病毒内吞入胞的细胞因素。新发现的受体分子occludin已被证明与SR-B1、CD81、claudin同介导HCV细胞入侵,occludin和claudin同为组成细胞间紧密连接的整合蛋白,引起了研究者们对紧密连接及细胞极性对HCV入侵影响的广泛关注。对细胞极性及紧密连接的研究,有助于发现新的HCV治疗药物的作用靶点,从而干预其细胞入侵及细胞间蔓延。本文从肝细胞极性特点、紧密连接及主要整合蛋白claudin和occludin、极性细胞模型及与HCV入侵的关系等几个方面综述了近来的最新进展。     

NTI|bio模拟猴痘全球暴发桌面推演的介绍

根据世界卫生组织报告,猴痘疫情出现在非传统流行国家,部分病例无相关流行地的旅行史,因此存在人际传播的可能。在2021年3月17日,美国非盈利组织核威胁倡议协会下的全球生物政策和计划团队(NTI|bio)与慕尼黑安全会议(MSC)共同组织召开一次桌面推演,其目的是减少具有潜在灾难性后果的生物威胁,案例为虚拟的经基因合成、编辑和改造的猴痘病毒。通过介绍本次推演,为相关疫情大流行的防控提供案例和借鉴工具,以应对未来可能出现的各类全球疫情大流行。举措应包括建立公共卫生预警系统等,从而实现早发现、早评估、早处理,同时还需要建立联合评估机制以应对来历不明的高危险生物事件,通过多学科的共同研究和努力形成综合应对措施。     

rpoB作为蜡样芽胞杆菌群快速检测的标志基因的实验研究

目的探讨常规PCR和实时荧光定量PCR(Q-PCR)方法检测蜡样芽胞杆菌群rpoB基因的特异性和敏感性。方法提取蜡样芽胞杆菌群和其他各种对照细菌的基因组DNA,合成蜡样芽胞杆菌群rpoB基因扩增引物,采用常规PCR和SYBRgreen实时定量PCR两种方法扩增rpoB基因片段,并将PCR产物克隆到pMD18-T载体后进行DNA测序。结果常规PCR和Q-PCR均能扩增出蜡样芽胞杆菌群rpoB基因的174bpDNA片段,而各种对照菌株均未见扩增。序列比对发现蜡样芽胞杆菌群细菌在该片段中存在5处核苷酸的不同,差异率为2.88%。以炭疽芽胞杆菌基因组DNA系列稀释作为扩增模板显示常规PCR最小检出量为3.42pg,Q-PCR的敏感性达到171fg,3次重复实验显示Q-PCR检测rpoB基因的灵敏度为(3.32×101±7.45×100)拷贝。结论以rpoB基因为检测靶基因的Q-PCR方法具有高度的特异性和良好的敏感性,能实现对蜡样芽胞杆菌群快速而准确的检测。