携带HuIL-3基因的人肝癌特异性逆转录病毒载体的构建

目的:构建携带人白细胞介素3（HuIL－3）cDNA的人肝癌特异性逆转录病毒载体。方法和结果：将HuIL－3cDNA克隆到逆转录病毒载体pMNSM的PL位点，构建SV40早期启动子驱动的载体pMNS－IL－3；从质粒pGEM．7Zf－AFPe中游离人甲胎蛋白（AFP）增强子核心序列，先克隆到pMNSM的PL位点上，再将HuIL－3cDNA片段克隆到PL位点上，构建出SV40早期启动子和AFP增强子驱动的人肝癌特异性表达载体PMNSA－IL－3。结论：该载体为肝癌特异性转基因治疗提供了一条途径。     

胞嘧啶脱氨酶基因体外特异性前药转换抗大肠癌作用研究

为使胞嘧啶脱氨酶(CD)基因在大肠癌细胞中特异表达。方法:构建了以CEA基因顺式转录调控序列驱动CD基因的组织特异型重组逆转录病毒载体G1CEACDNa,以脂质体法将重组载体及转录受LTR驱动的CD基因逆转录病毒载体pCD2分别转导入高分泌CEA的大肠癌细胞LoVo中,经G418完全选择后进行前药5-FC敏感试验。结果:转导普通型及组织特异型CD基因的LoVo细胞较亲代细胞对5-FC的前药转换抑瘤效应明显(均为P<0.01);而转导组织特异性CD基因的LoVo细胞较转导普通型CD基因的LoVo细胞对5-FC的敏感性显著增高(P<0.01),其IC_(50)分别为0.1mmol/L和0.5mmol/L。结论:表明CEA TRS可驱动自杀基因在高分泌CEA大肠癌细胞中特异性表达,在一定程度上达到了靶向杀伤肿瘤细胞的目的。     

噬菌体表面展示人干扰素-α 2b

目的:建立一种研究人干扰素-α结构与功能的新平台.方法:利用噬菌体表面展示(phage display)技术表达人干扰素-α 2b(hIFN-α 2b)基因.结果:生物活性测定表明,3×108 TU重组噬菌体干扰素的抗病毒活性与5 IU基因工程IFN-α 2a的活性相当,并能被IFN-α单抗中和.结论:hIFN-α 2b在噬菌体表面能正确折叠和功能性表达,即成功地建立了噬菌体展示外源肽(hIFN-α)的技术平台.     

重组腺病毒介导的hTGF-β1基因增加兔髓核组织蛋白多糖合成的研究

椎间盘退变是导致下腰痛及一系列功能障碍的主要致病原因^[1]。髓核组织内的蛋白多糖使椎同盘保持一定的含水量^[2]．因此，蛋白多糖的减少可直接影响椎间盘的生物功能。研究表明，转化生长因子β1(TGF-β1)能促进髓核细胞产生蛋白多糖^[3]。我们用腺病毒作为载体，将人TBF-β1基因转染至兔髓核组织内，使TGF-β1在髓核组织内大量表     

丙型肝炎病毒感染的实验室诊断

丙型肝炎病毒（HCV）可引起急性、慢性及输血后丙型肝炎，是一种常见病。HCV感染后可在机体内合成、复制自身成分，不断形成新的干代病毒，同时机体针对感染产生特异性免疫应答。所以，HCV感染的实验诊断主要包括三个方面：检测病原、检测病毒成分和检测免疫反应。本文将常用方法与最近的新进展做一介绍，现综述如下。1检测HCV病毒成分HCV感染后可在宿主体内合成自身成分如各种抗原蛋白质、核酸RNA等。即使病毒死亡或失活，这些成分仍存在。因此，用敏感的方法检测病毒的成分，其诊断价值不亚于病毒的分离培养。I·INCV聚合酶链反…     

THC抑制IL-2激活NK细胞的机理

吸毒是世界性的社会问题之一。常用毒品大麻(Marijuana)的主要心理活性成分是THC(△~9-氢化大麻酚,delta-9-tetrahydro-cannabinol)。我们以前的研究证明:THC对IL-2(白细胞介素-2)激活NK细胞的杀伤和维持NK细胞增殖的功能都有非常显著的抑制作用。目前对这种抑制作用的产生机理尚不了解。本实验用重组人IL-2-鼠NK细胞系统,从配体-受体结合的角度研究了THC对IL-2激活NK细胞活性的影响。结果表明:16μmol/L～32μmol/L THC处理(台盼蓝排除和[~3H]-TdR参入法证明对NK     

肝脏相关性疾病的组织特异性基因治疗

组织特异性基因治疗是ｉｎｖｉｖｏ基因治疗的首要问题。这种基因治疗包括靶向感（转）染和靶向表达，前者包括定位转染和导向转染，后者就是应用组织特异性转录调控序列和ｍＲＮＡ稳定序列而使治疗基因在靶细胞高效表达。肝脏的结构特性和肝脏疾病的重要性决定了肝病组织特异性基因治疗是重要的和可行的。肝肿瘤、病毒性肝炎及其他肝相关性疾病的组织特异性基因治疗有广阔的前景     

RT－PCR检测HCV RNA假阳性结果分析

ＲＴ－ＰＣＲ检测ＨＣＶＲＮＡ假阳性结果分析宋燕斌，崔晓红，潘卫，王锦红，戚中田丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）是新近认识的一种单股正链ＲＮＡ病毒，在感染者外周血中的含量低［１］，目前认为逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ＨＣＶＲＮＡ是诊断ＨＣＶ感染的最敏...     

原发性肝癌患者肝组织中HCVRNA和HCV抗原的定位

分别用原位杂交过氧化物酶与抗氧化物酶复合物法检测了７３例肝细胞癌患者肝组织切片中的丙型肝炎病毒ＲＮＡ和ＨＣＶ抗原以及乙型肝炎病毒的表面抗原和核心抗原。结果显示：ＨＣＶＲＮＡ，ＨＣＶＡｇ，ＨＢｓＡｇ和ＨＢｃＡｇ的检测出率分别为２６．０％，２８．８％，７５．３％和２６．０％；ＨＣＶ阳性的肝细胞多呈散在型分布，可见有ＲＮＡ，ＨＣＶＡｇ，ＨＢｓＡｇ和ＨＢｃＡｇ的检测率分别为２６．０％