水母雪莲细胞培养物调血脂作用的研究

背景：鉴于野生水母雪莲濒临灭绝，军事医学科学院建立了一种人工培养水母雪莲的方法。目的：探讨水母雪莲细胞培养物对高脂大鼠的调血脂作用。设计：完全随机设计，对照实验研究。单位：由解放军总医院心内科和军事医学科学院生物工程研究所合作。材料：实验于2003-03／06在解放军总医院医学实验动物中心完成。实验动物由解放军总医院实验动物中心提供。雄性SD大鼠64只，体质量200-220g，随机分为4组，每组16只：正常对照组、高脂模型组、高剂量组和低剂量组。干预：正常对照组仅喂基础饲料，高脂模型组喂高脂饲料，高剂量组喂高脂饲料的同时饲以水母雪莲细胞培养物500mg／Kg，低剂量组喂高脂饲料的同时饲以水母雪莲细胞培养物50mg／Kg。给药1次／d，3周后采血，测定血脂水平及肝肾功能。主要观察指标：各组间血脂水平差异及肝肾功能变化。结果：高剂量组胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白水平低于高脂模型组[(2．66&;#177;0．51)mmol／L，(3．23&;#177;0．57)mmol／L，P=0．030；(1．59&;#177;0．77)mmol／L(2．48&;#177;0．83)mmol／L，P=0．023；(1．68&;#177;0．31)mmol／L，(2．07&;#177;0．43)mmol／L，P=0．032]。高剂量组高密度脂蛋白水平高于高脂模型组[(0.98&;#177;0．29)mmol／L，(0.66&;#177;0.37)mmol／L，P=0．045]。各组间肝肾功能差异无显著性意义(P&;gt;0．05)。结论：水母雪莲细胞培养物对高脂大鼠具有调血脂的作用。     

骨保护素的研究进展

骨保护素(osteoprotegerin，OPG)是1997年发现的肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor，TNF)受体家族的新成员，也称破骨细胞抑制因子(osteoclast inhibitory factor，OCIF)或称为树枝状细胞受体1(dendritic cell derived receptor-1，FDCR-1)，它是骨代谢一个重要的负调控因子。OPG是核因子KB受体活化因子(receptor activator of nuclear factor kappa B ligand，RANKL)、     

合成生物学

合成生物学研究是个新兴而颇具前景的研究领域。该研究对多种天然的或人工设计的生物学元件进行了合理而系统的组合以获得重构的或非天然的“生物系统”。从解构到重构生命体、由破到立的认识方式转变。是对生物系统认识深入发展的必然结果。合成生物学研究就是连接这一过程的桥梁。本文对这一前沿领域的研究思路、近期主要研究成果及发展趋势做一概述。     

炭疽毒素PA在E.coli中的表达、纯化及其生物活性分析

目的:构建pET-32a( )-PA重组质粒,实现融合蛋白Trx-PA在大肠杆菌(Escherichia coli) BL21(DE3)中的表达,并获得有生物学活性的PA.方法:采用PCR的方法扩增PA的编码序列,并且与pET-32a( )载体的Trx编码区融合产生pET-32a( )-PA重组质粒,将重组质粒转化至感受态E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达pET-32a( )-PA,通过SDS-PAGE和Western印迹进行分析.利用Ni2 金属亲和层析纯化表达产物,通过梯度透析进行复性.通过蛋白酶降解和细胞毒性实验分析Trx-PA的生物学活性.结果:成功构建pET-32a( )-PA重组质粒,并纯化了Trx-PA融合蛋白.SDS-PAGE分析表明融合蛋白相对分子质量大小正确,经纯化复性后,蛋白纯度达到76%.Trx-PA在体内和体外均能被弗林蛋白酶(furin酶)降解.Trx-PA的正确降解是致死因子(lethal factor,LF)进入小鼠巨噬细胞Raw264.7内并产生细胞毒性的基础.结论:重组Trx-PA融合蛋白能在E.coli BL21(DE3)中有效表达,并表现出生物学活性.     

大肠杆菌-链霉菌穿梭型BAC载体的构建及功能验证

目的构建可由大肠杆菌接合转移至链霉菌并整合至其基因组的穿梭型BAC载体,以实现大片段基因簇在大肠杆菌中完成遗传操作后,转移至链霉菌中进行异源表达。方法从原始B载体pBeloBAC11出发,利用pKD46介导的Red同源重组技术,将一段包含接合转移元件oriT、定点整合元件attp-int和安普霉素抗性基因Am的DNA片段替换其上的氯霉素抗性基因,该DNA片段通过PCR扩增得到,两端为待替换氯霉素抗性基因上下游55 bp的同源臂,替换后的载体通过酶切连入链霉菌组成型启动子ermEP1P2和绿色荧光蛋白（GFP）基因以验证其接合和整合功能。结果原载体pBeloBAC11的氯霉素抗性基因被成功替换,得到载体pBTIBAC1,利用该载体可在变铅青链霉菌（Streptomyces lividans）TK24和1326中表达GFP,在pBTIBAC1上插入新的多克隆位点（MCS）后得到载体pBTIBAC11。结论 pBTIB AC11载体可通过接合转移携带外源基因片段进入链霉菌并整合至其基因组中,同时保留了原有BAC载体的功能元件,为大片段在链霉菌中的异源表达奠定了基础。     

非霍奇金淋巴瘤的Rituximab治疗

Rituximab是用于治疗非霍奇金淋巴瘤(NHL)的单抗药物。Rituximab单独使用对B细胞NHL总有效率为40％～50％；和化疗药物联用有效率达90％以上。毒性作用轻微，是临床治疗B细胞NHL的安全有效的新药。现综述Rituximab用于治疗各种类型NHL的临床试验以及与其他药物联用的临床试验。     

Rituximab的作用机理与抗药机理

Rituximab是一种有效的治疗非霍奇金淋巴瘤的单抗药物,它定向作用于CD20抗原,主要通过ADCC、CDC和直接效应杀伤肿瘤细胞.绝大多数肿瘤细胞都对ADCC有一定程度的敏感性,其强度决定于Fc段的种类与Fc受体的类型.CDC可能是Rituximab在体内杀伤肿瘤的最主要机制,不同肿瘤细胞对于CDC的敏感性大不相同,并与Rituximab的临床疗效相关.CDC的强度受补体调节蛋白影响.Rituximab的直接效应主要是诱导凋亡等.Rituximab还通过致敏肿瘤细胞协助增强传统细胞毒性药物的疗效.细胞因子对改善Rituximab的疗效也有一定作用.肿瘤细胞对Rituximab的耐受现象广泛存在.这与细胞类型、肿瘤细胞所处的部位以及之前接受的治疗等多种因素有关.对于Rituximab的作用机理与抗药机理仍需更多研究.     

某制鞋企业化学有害因素的职业健康风险分析

目的 了解东莞市某制鞋企业化学有害因素产生的职业健康风险,为制鞋行业职业病危害防控提供科学依据。
方法 于2019年对东莞市某制鞋企业进行职业卫生调查、职业病危害因素检测,根据《工作场所化学有害因素职业健康风险评估技术导则》（GBZ/T 298-2017）采用半定量模型进行职业健康风险评估。
结果 该制鞋企业现有生产人员445人,实行每周工作6 d、每天11 h。该企业存在的17种化学有害因素中,丁酮、三氯乙烯、乙酸甲酯和乙酸乙酯存在超标情况。刷胶、擦拭、水印和补色4个岗位丁酮、二氯甲烷、环己酮、三氯甲烷、三氯乙烯、乙酸甲酯、乙酸乙酯、正庚烷的健康损害风险等级为低风险;补色、刷胶、水印3个岗位丙酮的健康损害风险等级为低风险;擦拭岗位乙酸丁酯、甲醇的健康损害风险等级为低风险。其余物质对各岗位工作人员健康损害的风险等级为可忽略风险。酯类、卤代烃联合接触引起的健康风险等级高于苯系物。刷胶岗位酯类、卤代烃联合接触有中等健康风险,高于其他岗位。
结论 东莞市制鞋企业中化学有害因素可诱发潜在的职业健康风险,企业及职业卫生部门应采取有效的防控措施。
     

基于CMV启动子构建CVB3感染性克隆载体的初步研究

目的利用CMV启动子构建CVB3感染性克隆载体。方法将质粒pcDNA3.1（＋）的CMV启动子下游区域通过PCR技术替换成设计好的多克隆位点区,分别插入PCR合成的HdvRz核心序列和polyA尾片段,形成框架载体pc-H-A,通过瞬时转染HeLa细胞初步鉴定pc-H-A的可用性;用本室保存的CVB3（nancy株）感染HeLa细胞,取感染液上清提取病毒RNA,利用长链RT-PCR和长链PCR技术反复优化条件扩增病毒基因组全长片段,将此全长片段克隆至设计好的框架载体pc-H-A中,筛选阳性克隆,并对其进行测序鉴定。结果与结论构建了带有CMV启动子的框架载体pc-H-A并初步鉴定了该载体可用,利用此框架载体构建了与基因库中序列相似性为99%的CVB3全长cDNA克隆pc-CVB3-H-A。该研究为进一步鉴定所构建的CVB3全长克隆的感染性提供了基础,并为后续在病毒学研究和基因治疗方面的研究提供了手段。     

重组人肝再生增强因子对肝星状细胞基质分解素-1及其抑制因子基因表达的调节

肝再生增强因子(ALR)是Hagiya等[1]1994年从新生大鼠肝组织中克隆的一种理化性质与肝刺激物( HSS)相似的促肝细胞增殖因子.新近,我国学者克隆了大鼠ALR的人类同源分子[2],并通过构建原核表达载体,获高效表达菌株,进而获得重组hALR.初步研究表明hALR对四氯化碳中毒性及①免疫损伤性大鼠肝纤维化均有明显的防治作用[3、4].本文拟通过观察hALR对肝星状细胞基质分解素-1( MMP3 )及金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP1) 基因表达的影响,从细胞外基质降解代谢的角度探讨hALR抗肝纤维化的机制.