治糜灵泡腾片发泡量检查的建议

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亚洲带绦虫六钩蚴Ta 8基因的克隆表达及免疫原性分析

【摘要】 目的 原核克隆表达亚洲带绦虫六钩蚴8kDa基因(Ta 8),探索其表达蛋白在检测亚洲带绦虫感染中的应用价值。 方法 用RT-PCR方法从亚洲带绦虫六钩蚴cDNA中获取Ta 8基因,克隆到原核表达质粒pET-28a(+)中,在大肠埃希菌BL21/DE3中用IPTG诱导表达,表达产物通过SDS-PAGE进行鉴定,用镍离子金属螯合剂亲和层析柱进行纯化,纯化的重组蛋白用蛋白印迹进行免疫学分析。 结果 PCR、双酶切及DNA测序结果均表明pET-28a(+)-Ta 8重组质粒构建成功。SDS-PAGE结果表明目的基因在大肠埃希菌BL21/DE3中获得高效表达,亲和层析获得了高纯度蛋白。重组蛋白可被其免疫的SD大鼠血清识别但不能够被正常大鼠血清识别,表明其具有免疫原性。 结论 本研究成功地构建了亚洲带绦虫六钩蚴8kDa基因重组质粒,在大肠埃希菌BL21/DE3中获得了成功表达;证明了8kDa基因表达产物具有免疫原性;还发现该绦虫成虫的头节、成节、孕节中也存在8kDa基因。     

抗亚洲带绦虫药物对乳酸脱氢酶抑制作用

目的探讨抗亚洲带绦虫药物对于重组的亚洲带绦虫乳酸脱氢酶(Ta.LDH)酶促功能的影响。方法将不同浓度的吡喹酮、阿苯达唑和甲苯咪唑加入Ta.LDH所催化的丙酮酸还原成乳酸(正反应)以及乳酸氧化成丙酮酸(逆反应)的标准反应体系当中,测定烔?废汆堰?核苷酸(NADH)在A340处吸光度的变化值。采用SPSS 16.0软件进行分析,计算药物对酶活性的相对抑制率。结果与对照组比较,0.10 mmol/L吡喹酮对Ta.LDH催化正逆反应的相对抑制率分别为93.99%(P0.01)和94.67%(P0.01),0.10 mmol/L阿苯达唑分别为85.45%(P0.01)和73.81%(P0.01);0.15 mmol/L甲苯咪唑分别为92.2%(P0.01)和86.13%(P0.01)。结论Ta.LDH可能为吡喹酮、阿苯达唑和甲苯咪唑抗亚洲带绦虫药物作用的靶标分子。     

牛带绦虫乳酸脱氢酶基因原核表达及免疫学特征

目的 克隆牛带绦虫乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)基因在大肠杆菌中表达,研究其免疫学特征.方法 将牛带绦虫成虫LDH基因与质粒pET-28a(+)连接构建原核重组质粒,在大肠埃希菌BL21/DE3中用异丙硫代-β-D半乳糖苷诱导表达,表达产物通过十二烷基-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白印迹(Western blotting)进行分析.结果 牛带绦虫乳酸脱氢酶基因编码332个氨基酸,理论分子量为35.4kDa,PCR、双酶切及DNA测序的结果均证明pET-28a(+)-LDH构建成功;SDS-PAGE结果表明,牛带LDH基因在大肠埃希菌高效表达,经过亲和层析高纯度蛋白,且该重组蛋白可以被亚洲带绦虫、牛带绦虫及猪带绦虫感染病人血清识别,表明其具有免疫反应性.结论 牛带绦虫LDH基因可在原核系统中有免疫活性的高效表达.     

眼底无可见视网膜病变的糖尿病患者多焦视网膜电图特征

目的 检测眼底无视网膜病变糖尿病患者的多焦视网膜电图(multifocol electmretinogram, mf-ERG),评价其在糖尿病患者早期视网膜功能改变中的作用.方法 应用mf-ERG检测30例(56只眼)正常对照组和32名(58只眼)无眼底镜下可查见的视网膜病变的糖尿病患者.对两组mf-ERG中a波和b波的潜伏期、振幅总和以及b波的振幅密度进行分析比较.结果 在糖尿病组,除0环和颞下象限之外.b波的潜伏期均明显延迟,而a波和b波振幅总和及b波的振幅密度减低主要集中在黄斑周围区域(0～1环)和颞上象限,差别有统计学意义(P<0.05).结论 mf-ERG能在DR出现之前客观定量地评定视网膜功能的变化程度和范围.     

亚洲牛带绦虫Spef1-Like基因及其蛋白结构特征的生物信息学分析

目的分析和预测亚洲牛带绦虫的Spef1-Like基因及其编码的蛋白质的结构和功能。方法利用生物信息学网站如美国国家生物技术中心(NCBI,http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)和瑞士生物信息学研究所的蛋白分析专家系统(Ex-PASY,http://ca.expasy.org/)所提供的有关基因和蛋白序列和结构功能分析工具,以及专业的生物信息学软件包如pc-gene,VectorNTIsuite,从亚洲牛带绦虫成虫cDNA文库当中识别该基因及编码区,分析和预测该基因编码的蛋白质的理化性质,一级结构中的修饰位点及模序,亚细胞定位特征,二级结构特征以及蛋白三维空间构象,蛋白亲水性及潜在抗原表位。结果该基因全长1099bp,编码区为117-929bp,编码271个氨基酸,与GenBank当中的其他序列比对,预测该基因为全长基因。编码的蛋白质理化性质比较稳定,含有多个能被其他酶修饰的位点,无跨膜区,预测其主要含有三个亲水性较强的抗原表位,空间结构上相距较近。结论生物信息方法可从亚洲牛带绦虫成虫cDNA文库中筛选出Spef1-like基因并进行分析。     

三点比较式臭袋法测定空气中臭气浓度的影响因素探讨

目的探讨三点比较式臭袋法测定空气中臭气浓度的主要影响因素。方法用标准铝箔采气袋采集某垃圾场周边空气样品,6名嗅辨员在实验室对稀释后的空气样品进行嗅辨,根据嗅辨结果,计算空气中臭气的浓度。通过分析实际测定过程中的干扰,探讨使用该方法测定臭气浓度的主要影响因素。结果当空气样品分别按10倍、30倍、100倍稀释时,嗅辨小组的平均正解率分别为0.81、0.62、0.44,由此计算出垃圾场周边空气中臭气的浓度为39(无量纲)。结论影响三点比较式臭袋法测定空气中臭气浓度的主要因素依次有:嗅辨小组成员年龄和性别的比例组成、臭气样品的采集和保存过程、臭气样品的初始稀释倍数和稀释比例的选定、嗅辨员的身体状况和臭辨方式、计算中所选取的参数等。     

累及后柱的胫骨平台骨折的手术治疗

目的:探讨累及后柱的胫骨平台骨折的手术治疗方法。方法:选取2011年2月-2012年12月本院收治的20例累及后柱的胫骨平台骨折患者为研究对象,其中后内伴后外侧骨折8例,后内侧劈裂骨折5例,后外侧劈裂骨折6例,合并胫骨近端骨折1例。根据后柱累及部位不同采取后内侧入路、后外侧入路骨折复位固定术,观察临床治疗效果及并发症情况。结果:本组患者术中出血量(178.32±2.01)mL,住院时间(16.12±1.23)d,骨折愈合时间(17.52±0.58)周,完全负重时间(17.60±1.22)周,膝关节活动度(115.36±2.6)°。膝关节功能恢复优者13例(65%),良者4例(20%),优良率85%。结论:膝关节后侧(后内侧或后外侧)入路复位及支撑钢板固定术具有复位合理、固定稳定性高、并发症少、膝关节功能恢复等优点,可作为累及后柱的胫骨平台骨折治疗的首选手段。     

带锁髓内钉在胫骨及股骨骨折中的临床应用

2002年2月~2005年8月,我院应用国产带瞄准器的带锁髓内钉治疗胫骨及股骨骨折86例,现报告如下。1临床资料1·1一般资料本组86例,男57例,女29例;年龄17~68岁。交通伤62例,坠落伤8例,砸伤6例,摔伤10例。股骨骨折37例,其中股骨干横断骨折14例,股骨干骨折并股骨颈骨折9例,股骨干多段骨折8例,股骨干骨折并粗隆间骨折6例;胫骨骨折49例,其中胫骨干多段骨折28例,胫骨干横段骨折21例。闭合性骨折61例,开放性骨折25例。新鲜骨折77例,9例为陈旧骨折钢板折断致骨不愈合。骨折距手术时间5小时~14天,平均4·2天。1·2方法采用小切口直视下骨折复位72例,C型…