低剂量X射线全身照射诱导小鼠胸腺细胞CD3分子表达的适应性反应

采用免疫荧光流式细胞术（ＦＣＭ）观察了昆明种小鼠胸腺细胞ＣＤ３分子表达的变化。首次报道了０．０７５ＧｙＸ射线单次全身照射可诱导小鼠胸腺细胞ＣＤ３分子表达对其后１．５Ｇｙ攻击剂量照射的适应性反应。证实，１．５Ｇｙ全身照射后胸腺ＣＤ３阳性细胞明显减少，照后１８小时仅为假照射组的３３．７４％。当１．５Ｇｙ照射前６小时预先照射０．０７５Ｇｙ时，可明显减轻其后攻击剂量对ＣＤ３分子表达的抑制作用，此时，ＣＤ３     

低剂量X射线全身照射诱导小鼠胸腺细胞CD_3分子表达的适应性反应

采用免疫荧光流式细胞术（ＦＣＭ）观察了昆明种小鼠胸腺细胞ＣＤ３分子表达的变化。首次报道了０．０７５ＧｙＸ射线单次全身照射可诱导小鼠胸腺细胞ＣＤ３分子表达对其后１．５Ｇｙ攻击剂量照射的适应性反应。证实，１．５Ｇｙ全身照射后胸腺ＣＤ３阳性细胞明显减少，照后１８小时仅为假照射组的３３．７４％。当１．５Ｇｙ照射前６小时预先照射０．０７５Ｇｙ时，可明显减轻其后攻击剂量对ＣＤ３分子表达的抑制作用，此时，ＣＤ３阳性细胞数显著高于单纯攻击剂量对照组（Ｐ＜０．０１）。对其机理进行了讨论。     

低剂量X射线照射诱导G1期阻滞的适应性反应

目的观察低剂量Ｘ射线照射能否诱导Ｇ１期细胞阻滞。方法采用碘化丙啶（ＰＩ）荧光探针标记细胞，流式细胞术（ＦＣＭ）检测并分析细胞周期。结果证实１．５ＧｙＸ射线全身照射后１２小时，小鼠胸腺细胞发生明显Ｇ１期阻滞。而０．０７５Ｇｙ低剂量预照射可明显减轻其后１．５Ｇｙ攻击剂量所致Ｇ１期阻滞。离体照射ＥＬ－４淋巴瘤细胞也得到类似结果。结论０．０７５ＧｙＸ射线照射能诱导胸腺淋巴细胞及ＥＬ－４细胞Ｇ１期阻滞的适应性反应。     

电离辐射诱导小鼠胸腺细胞G1期阻滞的分子调控初探

目的研究电离辐射诱导小鼠胸腺细胞Ｇ１期阻滞的分子通路。方法ＰＩ染色,流式细胞术检测细胞周期。单克隆抗体免疫荧光标记,流式细胞术检测蛋白表达。结果０５、１．０及２．０ＧｙＸ射线全身照射后１２小时及２．０Ｇｙ照射后２４小时小鼠胸腺细胞Ｇ１期细胞数明显增高。２．０Ｇｙ照射后ｐ５３蛋白表达在照射后１～８小时明显增高;ｐ２１蛋白表达在照射后４～４８小时明显增高;ＭＤＭ２蛋白表达在照射后４小时及８小时明显增高;而ＧＡＤＤ４５蛋白表达未见明显变化。结论０５～２．０ＧｙＸ射线全身照射可诱导小鼠胸腺细胞Ｇ１期阻滞。其分子通路主要是ｐ５３－ｐ２１通路。     

0.075 Gy X射线诱导EL-4细胞凋亡及细胞周期的适应性反应

观察低剂量Ｘ射线照射能否诱导ＥＬ－４细胞凋亡及细胞周期的适应性反应。方法采用流式细胞术（ＦＣＭ）检测细胞凋亡及细胞周期。结果单纯２ＧｙＸ射线照射后１２小时ＥＬ－４细胞凋亡显著增多，并伴有明显Ｇ１阻滞；０．０７５Ｇｙ预照射可明显减轻间隔６小时后２Ｇｙ攻击剂量照射所致的细胞凋亡和Ｇ１阻滞。结论０．０７５ＧｙＸ射线离体照射可诱导ＥＬ－４细胞凋亡及Ｇ１阻滞的适应性反应     

1．5Gy X射线全身照射对小鼠胸腺细胞CD_3、CD_4、CD_8分子表达及

采用单克隆抗体免疫荧光技术，流式细胞术检测，观察了１．５ＧｙＸ射线单次全身照射（剂量率０．２８６Ｇｙ／ｍｉｎ）对小鼠胸腺细胞ＣＤ３分子表达的影响，及胸腺细胞亚群和细胞周期的变化。结果表明，中等剂量照射后，胸腺细胞ＣＤ３分子的百分率明显增高，胸腺细胞ＣＤ３阳性细胞比例为对照组的１７７．６１％。同时，胸腺中ＣＤ４＋及ＣＤ８＋细胞比例亦显著增加，分别为对照的２０２．５％及１６５．８７％。然而，胸腺中ＣＤ４＋、ＣＤ８＋细胞的比例显著降低，为对照组的６８．２８％，与此同时，胸腺细胞周期中Ｓ期细胞比例明显降低，为对照组的５５．１４％。     

0.075Gy射线诱导EL—4细胞凋及细胞周期的适应性反应

目的 观察低剂量Ｘ射线照射能否诱导ＥＬ－４细胞凋亡及细胞周期的适应性反应。方法 采用流式细胞术（ＦＣＭ）检测细胞凋恨及细胞周期。结果 单纯２ＧｙＸ射线照射后１２小时ＥＬ－４细胞凋亡显著增多，并伴有明显Ｇ１阻滞；０．０７５Ｇｙ预照射可明显减轻间隔６小时后２Ｇｙ攻击剂量照射所致的细胞凋亡和Ｇ１阻滞。结论０．０７５Ｇｙ射线离照射可诱导ＥＬ－４细胞凋亡及Ｇ１阻滞的适应性反应。     

裂变中子照射对小鼠胸腺淋巴细胞亚群的影响Ⅰ.胸腺淋巴细胞亚群对裂变中子的辐射敏感性

小鼠经梯度剂量的裂变中子和６０Ｃｏγ射线照射后１ｄ，其胸腺细胞数和胸腺重量指数的变化，都显示了对中子和γ射线有辐射敏感和辐射抗性两种成分的存在，而同一种成分对中子辐射的敏感性又高于对γ射线的辐射敏感性。对中子辐射敏感成分的Ｄ０值依次为０．６４和０．３４Ｇｙ，对γ射线的Ｄ０值则相应为０．８３和０．８７Ｇｙ。ＲＢＥ值分别为１．３０和２．５６。照射后小鼠胸腺Ｔ细胞亚群的变化表明，两种Ｔ细胞亚群的辐射敏感性也是非均质性的，粗略评价，对中子和γ射线的辐射敏感性均是Ｌｙｔ＋２细胞高于Ｌ３Ｔ４＋细胞，而两类细胞对中子的辐射敏感性又均高于对γ射线的辐射敏感性，经计算各类细胞对中子照射的Ｄ３７值，Ｌ３Ｔ４＋细胞为６．１４Ｇｙ，Ｌｙｔ＋２细胞为３．２８Ｇｙ；对γ射线则分别为１１．３８和１０．４２Ｇｙ，由此得到的ＲＢＥ值分别为１．８５和３．１８。     

小鼠胸腺和脾细胞对淋巴因子反应的辐射剂量效应关系

作者研究了Ｃ５７ＢＬ／６小鼠经０．１－８．０Ｇｙ Ｘ射线全身照射后淋巴因子效应细胞反应性的变。结果发现，照后２４小时胸腺细胞对ＩＬ－１反应的剂量效应曲线曲两个斜率不同的成分组成，其Ｄ３７分别为１．６５和４．０９Ｇｙ；照后１２和２４小时脾细胞对ＩＬ－２反应的Ｄ３７分别为５．５８和３．４６Ｇｙ；ＣＴＬＬ－２细胞在为０．５－１０Ｇｙ剂量范围内，对ＩＬ－２反应性呈剂量依赖性降低，Ｄ３７为８．７７Ｇｙ。提示     

小鼠胸腺和牌细胞对淋巴因子反应的辐射剂量效应关系

作者研究了Ｃ５７ＢＬ／６小鼠经０．１～８．０ＧｙＸ射线全身照射后淋巴因子效应细胞反应性的变化．结果发现，照后２４小时胸腺细胞对ＩＬ－１反应的剂量效应曲线由两个斜率不同的成分组成，其Ｄ３７，分别为１．６５和４．０９Ｇｙ；照后１２和２４小时脾细胞对ＩＬ－２反应的Ｄ３７分别为５．５８和３．４６Ｇｙ；ＣＴＬＬ－２细胞在为０．５～１０Ｇｙ剂量范围内，对ＩＬ－２反应性呈剂量依赖性降低，Ｄ３７为８．７７Ｇｙ。提示ＩＬ－２效应细胞的辐射抗性高于ＩＬ－１效应细胞．     

低剂量辐射对小鼠胸腺细胞成熟、分化、凋亡和激活的影响

目的研究低剂量辐射对胸腺细胞成熟、分化、激活和细胞凋亡及有关基因蛋白表达的影响，以揭示低剂量辐射免疫增强效应的发生机理。方法采用双参数直接免疫荧光和间接免疫荧光流式细胞术，检测了低剂量辐射小鼠全身照射后胸腺细胞ＣＤ４、ＣＤ８、ＴＣＲ、ＣＤ３、ＩＬ－２Ｒ、［Ｃａ２＋］ｉ、Ｂｃ１－２、Ｂａｘ的表达和细胞凋亡。结果实验结果表明：低剂量辐射全身照射未引起ＴＳ减少和ＴＨ／ＴＳ比值上调；低剂量辐射未增加胸腺细胞凋亡，这与Ｂｃｌ－２／Ｂａｘ比值上调有关；低剂量辐射促进了胸腺细胞的成熟分化和信息传递过程。结论以上结果提示：低剂量辐射促进胸腺细胞的成熟、分化和激活，使胸腺向外周输送成熟的具有功能活性的效应性Ｔ细胞的储备增强，可能是低剂量辐射免疫增强效应的重要机理。     

辐射损伤后小鼠T细胞功能亚群及其IL-4和IFN-γ的变化

目的 观察不同剂量辐射损伤后小鼠T细胞功能亚群、细胞因子IL-4和IFN-γ的变化。方法 C57BL/6j小鼠分为假照射组和辐射损伤模型组。采用⁶⁰Coγ线照射诱导辐射损伤模型。吸收剂量分别为0.7、1.4、2.8及5.6 Gy。应用细胞表面标志和细胞内因子标记结合流式细胞仪分析急性照射损伤和损伤恢复期小鼠脾CD3+、CD4+、CD8+T细胞功能亚群,以及细胞因子IL-4和IFN-γ的变化。结果 1 辐射损伤后CD3+、 CD4+及 CD8+有明显的减低,其改变幅度与受照剂量有关。2 照射后1 d, IFN-γ降低幅度明显高于IL-4,受照剂量大于2.8 Gy组,IL-4/IFN-γ比值较空白对照组明显升高。3 辐射对淋巴细胞功能亚群、细胞因子IL-4和IFN-γ的损伤在照射后25 d有不同程度的恢复,但与假照射组比较仍有明显差别。 结论 电离辐射可使淋巴细胞亚群CD3+,CD4+,CD8+、 CD4+/CD8+、细胞因子IL-4和IFN-γ发生改变,并诱发受照小鼠免疫功能低下,特别是使细胞因子IL-4和IFN-γ发生失衡,再次证实辐射损伤后小鼠脾Th1/Th2模式向Th2免疫反应漂移的现象。     

X射线全身照射对小鼠脾细胞转铁蛋白受体表达的影响

目的转铁蛋白受体（ＴｆＲ）是Ｔ淋巴细胞受抗原或丝裂原刺激后表达在细胞表面的重要受体之一,与Ｔ细胞的活化和增殖有着密切关系。目前尚未见国内外有关ＴｆＲ辐射效应研究的报道。研究大剂量电离辐射后ＴｆＲ表达的变化及作用,对阐明辐射抑制机体免疫功能的机制有着重要意义。方法本文采用流式细胞术的方法观察了不同剂量Ｘ射线全身照射对小鼠脾细胞ＴｆＲ表达的影响以及４ＧｙＸ射线全身照射后不同时间ＴｆＲ表达的变化。结果０５～６ＧｙＸ射线全身照射后２４小时,脾脏ＴｆＲ阳性细胞数从１Ｇｙ开始随照射剂量的增加而下降,且呈明显的剂量依赖性。４ＧｙＸ射线全身照射后１２～７２小时,脾脏ＴｆＲ阳性细胞数于照后１２小时开始下降,２４、４８小时降至最低值（Ｐ＜０．０５,Ｐ＜０．０１）,７２小时开始回升。结论大剂量电离辐射抑制小鼠脾细胞ＴｆＲ的表达,并有明显剂量依赖性;ＴｆＲ表达的下降可能与辐射抑制ＩＬ２的分泌和ＩＬ２受体的表达有关。     

电离辐射对p16基因转录及蛋白表达的影响

目的　研究电离辐射对p16基因转录及蛋白表达的影响。方法　采用Northernblot检测p16mRNA水平的变化 ;采用单克隆抗体免疫荧光标记及流式细胞术检测p16蛋白表达的变化。结果　研究证实 ,2 0Gy照射后 2～ 2 4h ,胸腺细胞p16mRNA水平明显增高 ,8～ 4 8hp16蛋白表达显著增高 (P <0 0 5～P <0 0 1) ;照射后 2～ 8h脾细胞p16mRNA水平明显增高 ,2 4hp16蛋白表达显著增高 (P <0 0 5 )。研究还证实 ,0 5～ 6 0Gy照射后 ,胸腺细胞p16mRNA水平呈剂量依赖性增高 ,p16蛋白表达在 1 0～ 4 0Gy组显著增高 (P <0 0 5～P <0 0 1) ;脾细胞p16mRNA水平亦增高 ,但增幅远低于胸腺细胞 ,p16蛋白表达在 1 0～ 4 0Gy组显著增高 (P <0 0 5～P <0 0 1)。结论　电离辐射可诱导p16基因转录及蛋白表达增高 ,其增高幅度表现出一定的细胞异质性。     

Direct detection of p53 -/- thymocyte appearing at an early stage of radiation-induced thymic lymphomagenesis in p53 +/- heterozygous B10 mice

PURPOSE: The appearance of tumor suppressor protein 53 (p53) -/- thymocytes at an early stage of radiation-induced lymphomagenesis was investigated in the p53 heterozygous (+/-) B10 mice following a single dose of irradiation, since most thymic lymphomas manifested the loss of the wild-type p53 allele and the loss of heterozygosity was thought to be an early event critical for radiation-induced thymic lymphomagenesis in p53 +/- mice. MATERIALS AND METHODS: The mice were exposed to a single dose (6 Gy) of irradiation to induce thymic lymphomas and, at various times after irradiation, treated with an extremely high dose (30 Gy) of whole-body irradiation to enrich p53 -/- thymocytes and, 24 h later, the remaining thymocytes were assayed for cell surface markers and p53 genotype. RESULTS: In a significant fraction of the p53 +/- mice 5 weeks after 6 Gy irradiation, there was a relative increase in the number of cluster of differentiation (CD) 4+CD8+ thymocyte subpopulation among thymocytes remaining after 30 Gy irradiation. The CD4+CD8+ double-positive (DP) thymocytes were shown to contain p53-/- cells, and the number of p53 -/- thymocytes was more than 10(5) in those individuals. CONCLUSIONS: The results clearly indicated that an extremely high dose (30 Gy) of whole-body irradiation enabled us to directly detect p53 -/- thymocytes in an abundant p53 +/- thymocyte population and that proliferative p53 -/- thymocytes develop in a CD4+CD8+ DP thymocyte subpopulation within a few weeks after a single dose (6 Gy) of irradiation.     

X射线全身照射对免疫细胞共刺激分子表达的影响

目的：探讨低剂量电离辐射对免疫细胞表面分子的影响，方法：用流式细胞术FITC－CD28／PE－CTLA－4双染染法观察了小鼠胸腺和脾细胞的CD28和CTLA－4表达变化，用免疫细胞化学（ABC）法观察了小鼠腹腔巨噬细胞B7－1和B7－2的表达变化。结果：低剂量电离辐射和较高剂量电离辐射均能增强腹腔巨噬细胞B7分子的表达；同时发现，低量电离辐射显著增强胸腺和脾细胞CD28的表达，而CTLA－4的表达降低，脾细胞较胸腺细胞更明显。较高剂量电离辐射显著增强胸腺和脾细胞CTLA－4的表达，同时抑制两种细胞CD28的表达，以脾细胞为更显著，结论：共刺激分子CD28和B7的表达上调可能是低剂量电离辐射免疫兴奋效应机理中的重要因素。     

X射线全身照射对小鼠腹腔巨噬细胞NO产生的影响

目的：观察７５ｍＧｙ、２．０ＧｙＸ射线全身照后不同的时间,小鼠腹腔巨噬细胞ＮＯ产生的时程变化及不同剂量照射后２４ｈ时ＮＯ、ｉＮＯＳ的含量变化。方法分光光度法及免疫组织化学方法。结果：ｉＮＯＳ和ＮＯ产的生与剂量呈正相关。２．０Ｇｙ照射后,ＮＯ从６ｈ到４８ｈ随时间推移产生量逐渐增加,４８ｈ达峰值,为对照的３．８倍,而后回降。结论电离辐射可刺激巨噬细胞合成ｉＮＯＳ及产生ＮＯ。