嗓音训练联合拳击动作治疗青春期假声的疗效观察

目的观察嗓音训练配合拳击动作治疗青春期假声的临床疗效。方法收集2016年1月—2019年6月在中南大学湘雅医院耳鼻咽喉头颈科就诊的青春期假声患者21例，均为男性患者，年龄16~35岁，病程1~20年。所有患者均表现为青春变声期或变声期后说话时音调偏高或用假声，杂音明显，偶有声嘶及破音，其中19例患者喉镜下表现为声带闭合欠佳。对患者采用嗓音训练联合拳击动作的矫治治疗，根据即时效果反馈，语训1~4次不等，每次1~2 h，以上过程均由专业语训师对患者进行指导及追踪。治疗前后采用动态喉镜及嗓音分析系统记录患者的喉镜下表现及嗓音声学参数，并进行对比分析，评估治疗效果。结果21例青春期假声患者发声基频（F0）较训练前均下降明显，其中18例患者基频恢复至成年男性正常水平，嗓音障碍指数(DSI)较前明显改善，最长发音时间(MPT)较前明显延长，差异具有统计学意义（P＜0.05）； 19例声带闭合不全的青春期假声患者经治疗后声带闭合良好。结论嗓音训练配合拳击动作治疗青春期假声效果显著，有一定的临床应用价值。     

新型冠状病毒肺炎疫情下非疫情中心区域耳鼻咽喉头颈外科急诊防护的思考与建议

2019新型冠状病毒（SARS CoV 2）引起的肺炎具有较高的传染性，人群普遍易感，能通过飞沫及接触传播；气溶胶和粪-口等传播途径尚待明确。耳鼻咽喉头颈外科的急诊诊疗存在医患室内近距离接触，检查过程中患者喷嚏、咳嗽和恶心等反应均极易产生携带病毒的飞沫及气溶胶，且医患直接接触机会多，导致医患暴露风险明显增加。非疫情中心区域，大部分耳鼻咽喉头颈外科急诊患者多为无疫区接触及暴露的人群，如何在保障医疗安全和效果的同时，防范于未然、做好防护、避免医患院内感染显得尤为重要。     

3MA抑制自噬降低头颈鳞癌细胞放疗抵抗性的实验研究

目的探讨6-氨基-3-甲基嘌呤(3MA)对头颈鳞癌细胞放疗抵抗性的影响。方法蛋白印迹法（Western blotting）检测CNE2、6 10B及其放疗抵抗细胞CNE2 Rs、6 10BRs中LC3B蛋白的表达；3MA作用于CNE2 Rs及TU686细胞后LC3B蛋白的表达；克隆集落形成实验检测3MA对头颈鳞癌细胞的放疗抵抗能力及生存分数的改变；细胞免疫荧光法检测3MA对放疗致DNA双链损伤相关指标γ H2AX焦点数量的改变。结果LC3B蛋白在放疗抵抗细胞较亲本细胞中表达增加；3MA能有效抑制自噬膜蛋白LC3B的表达；3MA抑制自噬后CNE2 Rs及TU686细胞克隆集落形成能力减弱，生存分数降低；3MA抑制自噬后CNE2 Rs及TU686细胞放疗组中γ H2AX焦点数量较对照组显著增加。结论3MA抑制自噬后可能影响放疗后DNA双链损伤修复，进而降低头颈鳞癌细胞的放疗抵抗性。     

澜沧县受威胁药用维管束植物的多样性及其分布特征

丰富的药用植物多样性是我国中医药事业发展的重要物质基础,摸清地区资源现状,可以为其药用资源的可持续保护和开发利用提供科学指导。该文依据《全国中药资源普查技术规范》和《县域植物物种多样性调查与评估技术指导手册》对云南省澜沧拉祜族自治县(简称"澜沧县")开展了全县范围的中药资源普查及野生植物多样性调查与评估工作,分析了其中受威胁药用植物维管束植物的多样性及其分布特征,结果发现:全县境内共有受威胁药用维管束植物33种,隶属于17科23属,分别包括极危、濒危、易危等级的物种1种、10种、22种。这些受威胁药用维管束植物分布在澜沧县境内的不同区域,以县东南部的糯扎渡镇和发展河乡、西南部的糯福乡以及西部的竹塘乡包含的受威胁物种多样性最为丰富,且其物种丰富度随海拔的变化呈单峰格局。研究仅发现6种受威胁药用维管束植物在糯扎渡自然保护区澜沧片区内受到保护,而多数该类群物种丰富的区域尚未得到有效保护。因此,该文建议进一步完善现有保护体系,以更好地保护和利用澜沧县地区的药用植物多样性。     

多种生长因子诱导小鼠胚胎干细胞分化为胰岛素分泌细胞

背景:以往研究已证明胚胎干细胞可被诱导分化为胰岛素分泌细胞,但诱导时间较长,大部分需要1个月左右.目的:体外联合应用激活素A、全反式维甲酸、碱性成纤维细胞生长因子和烟酰胺4种生长因子,观察能否在较短的时间内将小鼠胚胎干细胞诱导分化为胰岛素分泌细胞.设计:细胞观察实验.单位:上海市内分泌及代谢病研究所,上海交通大学医学院附属瑞金医院.材料:实验于2004-10/2006-02在上海市内分泌研究所完成.清洁级孕12.5～14.5d龄昆明小白鼠2只,由上海斯莱克实验动物有限公司提供,动物质量合格证号2004A034,实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准.小鼠胚胎干细胞株由法国里昂CNRSUMR5641实验室张昌贤教授提供.激活素A为R&D公司产品;全反式维甲酸,烟酰胺由Sigma公司提供;碱性成纤维细胞生长因子由Gibco公司提供.方法:取孕鼠胚胎,除去头部和内脏,将剩余组织剪碎,胰酶消化后制备细胞悬液,取上层离心重悬,按3×108L-1接种培养,传2～3代时作为滋养层细胞.将鼠胚胎干细胞接种到新鲜滋养层上,加入含白血病抑制因子的knockout DMEM培养基,常规培养两三天后按1:3～1:6传代,当细胞与细胞之间分开时加入含血清的培养液终止消化,离心弃上清,制成单细胞悬液按2.5×104密度接种,加入不含白血病抑制因子的培养液,24～48h后收集形成的胚胎体,铺于Matrigel铺底的培养皿中.胚胎体贴壁后,在含有100μg/L激活素的10% FBS/DMEM中培养24h,再将培液换为10% FBS/DMEM培养6~8h作为间隔,然后把分化的胚胎体在含10-6mol/L全反式维甲酸的10% FBS/DMEM中培养24h,在含10μg/L碱性成纤维细胞生长因子的10% FBS/DMEM中培养3～5d,在含N2、 B27、1μg/L层粘连蛋白、10μg/L碱性成纤维细胞生长因子、10mmol/L烟酰胺的DMEM/F12培液中培养3～5d.诱导结束后,采用双硫腙染色、免疫荧光染色、RT-PCR检测分化细胞胰岛素的表达.主要观察指标:[1]胚胎干细胞的诱导情况.[2]双硫腙染色及免疫荧光染色.[3]RT-PCR检测.结果:[1]滋养层上的小鼠胚胎干细胞呈集落状态贴壁生长,集落边缘清晰,细胞之间的界限不明显.胚胎体形成后转至matrigel板上2d即贴壁.激活素A和全反式维甲酸间歇诱导后,碱性成纤维细胞生长因子培液中的细胞大部分变为上皮细胞样;经含N2、B27、层粘连蛋白、碱性成纤维细胞生长因子、烟酰胺的DMEM/F12培液作用后,细胞形成小的簇状结构.[2]诱导生成的胰岛素分泌细胞经双硫腙染色呈暗红色,免疫荧光染色呈红色,均为阳性反应.[3]经激活素A、全反式维甲酸、碱性成纤维细胞生长因子、烟酰胺四种生长因子诱导2周后,分化细胞不表达Insulin 1mRNA,表达Insulin 2, Pdx1, Nkx6.1, Nkx2.2, PP, LAPP, Glutt2, Somastatin, Hnf3 β及Neuro D mRNA.结论:体外联合应用激活素A、全反式维甲酸、碱性成纤维细胞生长因子和烟酰胺4种生长因子,能够将小鼠胚胎干细胞成功诱导分化为胰岛素分泌细胞,且诱导时间缩短至2周.     

肥胖症脂肪组织表达蛋白差异筛选初步研究

目的：比较肥胖症患者和非肥胖对照者脂肪组织蛋白表达的差异。方法：采用蛋白双向凝胶电泳技术分离脂肪组织总蛋白，PD—Quest软件分析电泳结果，选择有显著差异的蛋白点做介质辅助的激光解吸飞行时间质谱(MALDI—TOF—MS)分析。结果：两种脂肪组织标本大部分蛋白点匹配，经MALDI—TOF—MS分析和数据库搜索有一个未知蛋白和两个已知序列蛋白在两种脂肪组织的表达差异有显著性。结论：双向凝胶电泳技术和MALDI—TOF—MS是进行脂肪组织蛋白质组研究的有效手段，通过分析这些表达有差异的蛋白质可以进一步明确肥胖症的病因，为药物治疗提供新的靶点。     

积极心理疏导对晚期宫颈癌化疗患者的负面情绪、生活质量及免疫状态的影响

目的:探讨积极心理疏导对晚期宫颈癌化疗患者的负面情绪、生活质量及免疫状态的影响。方法:收集2014年8月-2016年12月间在本院接受化疗的晚期宫颈癌患者78例,按照随机数表法分为对照组及观察组各39例。对照组患者接受常规干预,观察组患者在常规干预的基础上加入积极心理疏导。对比两组患者干预前后的负面情绪、生活质量、免疫状态差异。结果:干预前,两组患者的负面情绪、生活质量、免疫状态差异无统计学意义。干预后,观察组患者的焦虑自评量表(SAS)、抑郁自评量表(SDS)总分显著低于对照组患者(t=-8.802,-10.332;P0.01);EORTC QLQ-C30各个功能领域评分值高于对照组患者(t=15.032,17.910,11.501,7.872,18.137;P0.01);血清中Th1细胞因子白介素-2(IL-2)、干扰素-γ(INF-γ)、肿瘤坏死因子β(TNF-β)的含量高于对照组患者(t=7.691,5.325,7.719;P0.01),Th2细胞因子白介素-4(IL-4)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)的含量低于对照组患者(t=-15.625,-14.622,-7.328;P0.05)。结论:积极心理疏导有助于缓解晚期宫颈癌化疗患者的负面情绪、提升生活质量、优化免疫状态。     

一例股神经卡压综合征术后死亡的护理原因分析

周围神经在行走过程中 ,由于结构特点和外在因素的影响 ,可在骨、肌肉、韧带 ,筋膜等形成的管道或间隙中受压 ,出现相应的神经损伤症状群 ,称为周围神经卡压综合征[1] 。其多见于上肢 ,而股神经卡压报道不多 ,我院收治 1例髂腰肌血肿致股神经卡压综合征 ,由于对此病认识不足及术后处理失误致患者死亡 ,现将其护理缺陷分析如下。1　临床资料患者男 ,31岁 ,因跌伤后腰部剧痛 ,伴左腿痛 2 0ｄ ,于1997- 0 8- 2 9入院 ,查体 :血压 16 / 10ｋＰａ ,心肺无异常 ,左髂窝可扪及 3ｃｍ× 3ｃｍ× 3ｃｍ包块 ,压痛明显 ,并向股部、小腿部放射 ,髋关节…     

全膝关节置换术患者术后的下肢功能训练

背景:人工膝关节置换术后的主要问题是如何获得接近于生理状态下的活动功能,科学、合理的训练方式是不可忽视的。目的:对全膝关节置换术患者进行规范化功能训练,并观察其疗效。设计:以患者为观察对象,前后对照,对比观察。单位:一所市级医院手术室。对象:选择南阳市中心医院1999-03/2003-03收治行人全膝关节置换术的患者32例41膝为研究对象,男13例16膝,女19例25膝;年龄56～75岁,平均(65±3)岁。骨关节炎12例,创伤性骨关节炎4例,类风湿关节炎16例。纳入标准:所有患膝术前均有不同程度疼痛,屈曲、挛缩、畸形、平地行走、上下楼梯及下蹲功能障碍…     

Ⅱ型Waardenburg综合征患儿二例基因诊断分析

目的通过对2例中国云南地区Ⅱ型Waardenburg综合征(WS2)患儿相关基因突变位点的分析,探讨WS2可能的分子生物学致病原因。方法经知情同意,分别于2018年10月和2019年5月对2例WS2先证者及家系成员进行病史采集、体格检查、听力学评估及颞骨CT检查。获取外周血,提取基因组DNA, 高通量测序方法对MITF、PAX3、SOX10、SNAI2、END3、ENDRB、KITLG基因编码区的全部外显子及部分内含子和启动子进行检测,对先证者及其父母进行突变位点的Sanger测序验证分析。结果先证者1检测出MITF基因第7外显子c.641643delGAA突变,导致氨基酸改变p.214delR,为整码移码突变,患儿双亲MITF基因序列测序分析该位点无变异,此位点为自发突变。先证者2检测出MITF基因1~9号外显子大片段杂合缺失,影响蛋白质功能的正常发挥。结论基因诊断是确诊Waardenburg综合征的重要依据,MITF基因c.641643delGAA杂合突变和MITF基因1~9号外显子大片段杂合缺失可能是本研究2例WS2患儿的分子生物学致病原因。