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目的鉴定实验中导致细胞污染的病原微生物,筛选消除该类病原微生物的抗生素药物。方法收集污染细胞上清,离心沉淀后提取核酸,使用细菌鉴定用的16S rDNA通用引物进行PCR扩增,回收产物后连接至pMD-18T载体,筛选阳性菌落测序,通过序列比对确定细胞污染物的类别,根据病原物的类别进一步筛选抗生素并摸索合适的抗生素使用浓度,以期达到消除病原物且不影响细胞正常生长的目的。结果 16S rDNA测序结果表明,细胞受到支原体和浅黄假单胞菌双重感染。抗生素处理结果表明,10μg/m L环丙沙星、10μg/m L美罗培南和10μg/m L新诺明联用可消除浅黄假单胞菌的污染,但处理后的细胞生长机能变差,需要在正常培养条件下培养并传代2次以上才会恢复正常。结论环丙沙星、美罗培南和新诺明联用能很好地消除浅黄假单胞菌对实验细胞的污染。 相似文献
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阐述了VxWorks嵌入式实时操作系统的设计特性、实时性和多任务操作环境,介绍了捷联基准的基本工作原理以及在PC/104嵌入式计算机上的实际应用. 相似文献
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目的建立淋病奈瑟菌(Neisseria agonorrhoeae,NG)、沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,CT)、细小脲原体(Ureaplasma parvum,UP)多重荧光定量PCR(fluorescent quantitative PCR,FQ-PCR)检测方法。方法选择NG保守基因porA、解脲支原体(Ureaplasma urealytieum,UU)保守基因ure及CT保守基因trp作为目标检测基因,设计引物及TaqMan探针,制备重组质粒标准品,绘制标准曲线,建立多重FQ-PCR检测方法,并验证其敏感性、特异性及重复性。用建立的方法对203份泌尿生殖道感染NG、CT、UP的临床样本进行同步检测,并与单重FQ-PCR法、常规PCR法及基因测序结果进行比较。结果重组质粒标准品经双酶切及测序鉴定,证明构建正确;建立的标准曲线起始DNA拷贝数与Ct值之间的线性关系良好,相关系数为0.998~1.000;该方法检测NG、CT和UP的灵敏度均可达102copies/ml,检测范围可达109~102copies/ml,相关系数分别为1.000、0.999和0.995;不与生殖道其他菌群如阴道霉菌、百日咳杆菌、流感嗜血杆菌、人型支原体、单纯疱疹病毒Ⅰ型、Ⅱ型及人乳头瘤病毒(16/18型)发生交叉反应;检测的203份样本中,多重FQ-PCR检测NG、CT、UP的阳性检出率分别为34.48%、30.54%、18.71%,与单重FQ-PCR法、基因测序法比较,差异无统计学意义(P0.05),3种方法阳性检出率均高于常规PCR法;与基因测序法相比,多重FQPCR法灵敏度为100%,3种病原体检测特异性均高于98.50%。结论已成功建立NG、CT、UP多重FQ-PCR检测方法,该法检测时间短,特异性强,灵敏性高,适合于临床快速诊断。 相似文献
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目的 从自然腐败的紫薯上分离纯化紫薯腐败菌, 通过反接种确定其致腐性, 并将其鉴定到属。方法 通过多次稀释平板涂布培养, 进行单菌落形态学观察, 将菌种反接种到新鲜紫薯上, 筛选出腐败菌, 以真菌ITS序列、细菌16S rDNA序列构建发育树, 鉴定到属, 再将鉴定结果与分离的菌种的形态学鉴定结果对比, 验证菌种鉴定结果。结果 从样品中分离出6种典型腐败菌, 有4种属, 分别为枝孢霉属、青霉属、曲霉属、芽孢杆菌属。结论 确定紫薯的腐败菌为哥氏枝孢霉(Cladosporium gossypiicola)、Penicillium christenseniae、热带青霉(Penicillium tropicum)、黄曲霉(Aspergillus flavus)、贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)和阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)。 相似文献
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