转化生长因子-β和Smad4在绝经过渡期大鼠卵巢颗粒细胞中的表达

目的 探讨转化生长因子-β（TGF-β）、Smad4 在绝经过渡期大鼠卵巢颗粒细胞中的表达,分析其与卵巢功能衰退的关系。 方法 雌性SD大鼠分为对照组（C组,6月龄,阴道涂片筛选,n=9）、绝经过渡期组（MT组,12~14月龄,阴道涂片筛选,n=8）,大鼠麻醉处死后迅速取出卵巢,采用机械分离方法释放卵泡颗粒细胞,于CO₂培养箱中培养,利用免疫细胞化学法检测促卵泡刺激素受体（FSHR）蛋白的表达,鉴定卵巢颗粒细胞;免疫细胞化学法检测TGF-β、Smad4蛋白在两组卵巢颗粒细胞的表达;采用Real-time PCR的方法检测各组颗粒细胞中TGF-β、Smad4 mRNA的表达。 结果 免疫细胞化学显示分离培养的颗粒细胞纯度＞95%,MT组TGF-β、Smad4蛋白表达水平低于对照组（P<0.05）;Real-time PCR结果显示,两组均有TGF-β、Smad4 mRNA的表达,MT组TGF-β、Smad4 mRNA表达水平显著低于对照组（P<0.05）。 结论 TGF-β、Smad4参与绝经过渡期大鼠卵巢功能的衰退过程,绝经过渡期大鼠功能衰退的部分原因可能与卵巢颗粒细胞中TGF-β、Smad4 的表达降低有关。     

大豆异黄酮抑制大鼠前列腺增生及其作用机制

目的观察大豆异黄酮(SI)对良性前列腺增生(BPH)大鼠体内性激素、生长因子及细胞凋亡相关基因的影响,探讨SI对BPH的防治及作用机制。方法选择SPF级健康成年雄性SD大鼠100只,随机分为正常对照(NC)组、BPH模型组、低剂量[6 mg/(kg·d)]SI组、中剂量[12 mg/(kg·d)]SI组及高剂量[24 mg/(kg·d)]SI组,每组各20只。灌胃给药4周后麻醉处理大鼠,腹主动脉取血,制备血清;完整摘取大鼠前列腺组织。称重测定前列腺组织湿质量,计算前列腺指数(PI);酶联免疫吸附法(ELISA)测定大鼠血清雌二醇(E2)、睾酮(T)水平;免疫质印迹法(Western blotting)检测前列腺组织Fas、Fas L、Bax、Bcl-2、表皮生长因子(EGF)及其受体EGFR的表达。结果与NC组比,BPH组前列腺组织湿质量及PI均较明显增加(P<0.05);血清E2及T水平均显著升高(P<0.05);前列腺组织中Fas L、Bcl-2、EGF及EGFR表达水平均显著升高(P<0.05),而Fas和Bax表达水平均显著降低(P<0.05)。与BPH组比,中、高剂量SI组前列腺组织湿质量及PI均明显减少(P<0.05);血清E2及T水平均显著下降(P<0.05);前列腺组织中Fas L、Bcl-2、EGF及EGFR表达水平均显著降低(P<0.05),而Fas和Bax表达水平显著升高(P<0.05);其中,中剂量SI组各指标变化较低、高剂量组更显著(P<0.05)。结论 SI对BPH具有较好的抑制作用,其中中剂量SI作用效果更佳,其作用机制可能与调节机体性激素水平,下调生长因子及其受体表达以及调控细胞凋亡基因表达有关。     

着丝粒蛋白A在大鼠心脏的表达及增龄变化

目的 探讨着丝粒蛋白A（CENP-A）在大鼠心脏中的表达部位及增龄变化。方法 取新生1 d、1周龄、2周龄、3周龄、4周龄、3月龄、6月龄大鼠各10只,采用免疫组织化学、免疫荧光、Western blotting、Real-time PCR技术,观察心脏不同部位CENP-A的分布和增龄变化;利用图像分析系统对CENP-A进行定量分析,并对不同年龄组心脏CENP-A含量进行对比。结果 大鼠心脏中CENP-A的表达主要分布在血管壁、心外膜及外膜下组织。随着年龄增长血管壁中CENP-A表达基本稳定,心外膜及外膜下组织中CENP-A表达逐渐减少,新生1 d表达最多,3月龄、6月龄明显减少。血管壁中CENP-A主要是在平滑肌细胞表达,且各年龄段表达基本不变。在靠近心外膜的组织中也有少量心肌细胞表达,且随增龄变化而减少。结论 大鼠心脏CENP-A的表达随增龄变化逐渐减少,血管壁CENP-A的表达稳定不变。     

大鼠胸段脊髓损伤后后肢神经肌肉的自然变化

目的:观察大鼠完全性脊髓损伤后损伤平面以下周围神经和骨骼肌的自然变化,为脊髓损伤治疗与康复相关基础研究提供科学依据。方法:将50只健康成年雌性SD大鼠随机分为对照组(A组)5只、假手术组(B组)10只和脊髓损伤组(C组)35只,B组行单纯椎板切除术;C组在椎板切除基础上用横断法制成T10完全脊髓损伤模型。分别对3组大鼠术前,B组术后1、2周,C组术后1、2、4、12、24周进行BBB评分,并检测腓肠肌的运动单位计数(motor unit number estimation,MUNE);再于各时间点处死大鼠,取坐骨神经和腓肠肌内侧头,应用光镜和透射电镜观察坐骨神经-运动终板-腓肠肌的形态变化。对3组所有结果进行对比分析。结果:C组术后各时间点的BBB评分与术前及A组、B组比较差异均有统计学意义(P0.05),C组术后4周时的BBB评分与其他时间点比较差异均有统计学意义(P0.05)。C组术前MUNE数值与A组、B组比较差异无统计学意义(P0.05);C组术后各时间点与术前比较差异均有统计学意义(P0.05),术后4周与24周比较差异无统计学意义,其余各时间点比较差异均有统计学意义(P0.05)。A组和B组术后1、2周时坐骨神经有髓神经纤维髓鞘外形正常。C组术后1、2周时与A组、B组无明显差异;4周时部分有髓神经纤维髓鞘崩解、板层分离;12周时髓鞘崩解明显增多,高倍电镜观察见崩解的髓鞘板层清晰;24周时有髓神经纤维髓鞘崩解、融合,新生神经纤维管细壁薄,无髓神经纤维增多,高倍电镜观察见崩解的髓鞘板层模糊。A组肌细胞肌束膜及肌内膜边界清晰,肌细胞核位于肌膜下方。B组术后1、2周时与对照组无明显区别。C组术后1、2周时,除肌细胞截面积轻度缩小外,与对照组无明显不同;4周时肌细胞截面积缩小,局部肌细胞破坏;12周时多数肌细胞边界模糊,细胞核相对聚集,结缔组织增生明显;24周时肌细胞融合,细胞核密集,融合细胞间可见大小不一空隙,结缔组织增生更加明显。A组和B组术后1、2周运动终板结构清晰完整。C组术后1、2、4周时运动终板结构较A组、B组无明显差别;术后12周时相对完好运动终板与破坏运动终板并存,高倍电镜下观察见突触前膜、突触间隙、突触后膜层次分明,各层结构内可见细小颗粒,突触间隙内可见多个类圆形突触小泡,肌板清晰,同时也可见突触皱褶及突触前、后膜不可辨,肌板结构不清晰;术后24周时找不到运动终板。结论:大鼠完全横断性脊髓损伤后损伤平面以下周围神经和骨骼肌形态结构随时间退变程度逐步加重甚至消失;损伤后12周时已有明显变化,24周时出现显著的结构损害和功能丧失。     

新生大鼠血清和关节软骨喹诺酮类药物浓度与关节软骨细胞外基质变化的相关性研究

目的 探讨喹诺酮类药物对新生大鼠关节软骨的损伤作用及其损伤机制.方法 将60只日龄2天的新生大鼠随机分为对照组、小剂量组和大剂量组各20只,每组又根据处死动物的时间随机分为7天、14天两个亚组,每个亚组10只.对照组不注射任何药物,小剂量组、大剂量组自实验开始第1天腹腔分别注射左氧氟沙星（商品名：左克）10 mg/（kg＆#183;d）、20 mg/（kg＆#183;d）,每天1次,连用7天.各组动物分别在实验第7、14天取血清及关节软骨组织标本,采用高效液相色谱法测定血清、关节软骨左氧氟沙星药物浓度;采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清Ⅱ型胶原（COLⅡ）、Ⅰ型前胶原羧基端前肽（PICP）及金属蛋白酶-3（MMP-3）水平.结果 7天时对照组血清和关节软骨组织中均未检测出左氧氟沙星,小剂量组血清和关节软骨组织左氧氟沙星含量均低于大剂量组[血清：（0.99＆#177;0.33） mg/L比（2.22＆#177;0.96） mg/L,关节软骨：（0.77＆#177;0.30）tμg/g比（1.82＆#177;0.30） μg/g,P均＜0.01];14天时各组血清和关节软骨组织均未检测出左氧氟沙星.血清、关节软骨左氧氟沙星药物浓度与血清COLII含量呈负相关（P＜0.05）,与血清PICP、MMP-3含量无相关性（P＞0.05）.结论 血清和关节软骨组织喹诺酮类药物浓度与血清COLII含量呈负相关,血清和软骨组织高浓度喹诺酮类药物对新生大鼠关节软骨有明显损伤作用.     

Effects of nasal obstruction on maturation of the jaw-opening reflex in growing rats

Objective

Nasal obstruction during growth changes craniofacial morphology and function. However, the etiological mechanisms of these changes are unknown. The aim of the present study was to investigate the effects of nasal obstruction during growth on the maturation of the jaw-opening reflex (JOR) using an electrophysiological technique. We focused on the oral sensory receptors that regulate the activities and reflexes of the orofacial muscles.

Design

Sixty 6-day-old male Wistar rats were randomly divided into control and experimental groups (n = 30 each). The experimental group underwent unilateral nasal obstruction at 8 days of age. The JOR was evoked by bilateral, low-intensity electrical stimulation of the inferior alveolar nerve. The electromyographic responses were recorded bilaterally from the digastric muscles at 5, 7, and 9 weeks of age.

Results

The latency of the JOR was significantly longer and the peak-to-peak amplitude was significantly smaller in the experimental group than in the control group at each age, while the duration was not significantly different. Intragroup comparison of the latency, peak-to-peak amplitude, and duration at 5, 7, and 9 weeks of age revealed no significant differences in either the control or experimental groups.

Conclusions

Unilateral nasal obstruction during growth may have significant effects on maturation of craniofacial function.     

氟中毒大鼠听觉脑干诱发反应的特点

目的通过尿、便等指标观察氟中毒大鼠听觉脑干诱发反应(ABR)变化情况,从而进一步探讨氟中毒对听力影响的作用机制。方法选择生后30 d(体重60~100 g)的Wistar大鼠,雌雄不分。实验组3O只,其中实验1组(F组)l5只,喂饮含氟50 mg/L的自来水;实验2组(f组)15只,喂饮含氟100 mg/L的自来水。喂养6个月,制成慢性氟中毒模型。对照组15只。6个月后观察尿、便氟含量等各项指标。在2%戊巴比妥钠轻麻下,首先测定3组鼠的听觉脑干电位,而后取其牙齿观察氟中毒情况。结果实验1组和实验2组有典型的氟斑牙出现,尿、便氟含量差异显著。实验1组和实验2组与对照组相比听觉脑干电位I、Ⅲ、和V波等各波潜伏期时间差异显著(P<0.05),而实验1组与实验2组无差异。结论慢性氟中毒对听力有明显影响,这种听力损失是高频听力损失,慢性氟中毒致听力损失的机制可能是氟致听神经的直接毒作用。     

钙预适应对膨胀离体大鼠心室所致心律失常的影响

为了证实钙预适应对膨胀离体大鼠心室所诱发的心律失常具有抑制作用 ,采用Langendorff方法灌流离体大鼠心脏。用正常灌流液灌流平衡后 ,离体心被随机分为 4组 :牵张对照组 ,钙预适应组 ,钙预适应 +维拉帕米组和钙预适应 +格列本脲组。维拉帕米和格列本脲在灌流液中的浓度分别为 1μmol/L和 10 μmol/L ,对钙预适应进行干预后及时用正常灌流液将他们从离体心洗脱。将可充灌液体的乳胶球囊通过左房及二尖瓣置于左室 ,通过向乳胶球囊注射液体对左室进行膨胀 ,记录膨胀前和膨胀过程中左室心电图和左室压力、冠脉流量和心率 ,观察心电图ST段和T波的变化 ,并计算对照组和各实验组由膨胀诱发心律失常的发生率和持续时间。结果 :通过乳胶球囊膨胀左室 ,使左室舒张末压增加相同的情况下 ,对照组心律失常总发生率达 10 0 % ,持续时间为 2 .5 6± 0 .4 6s ;钙预适应组较对照组心律失常总发生率明显降低 (40 % ) ,持续时间缩短到 1.6 7± 0 .6 1s(P均 <0 .0 5 ) ;用维拉帕米对钙预适应进行干预后 ,心律失常总发生率较钙预适应组增高 (90 % ) ,持续时间延长 (2 .5 0± 0 .4 6s) ;钙预适应 +格列本脲组心律失常发生情况和钙预适应组相似。各组离体心在膨胀前后冠脉流量和心率、心电图ST段和T波均未见明显变化。结论 :?     

HSP 70.2:新的高血压致病相关基因?

目的探讨HSP70·2基因是否是新的高血压致病相关基因。方法从13周龄的自发性高血压大鼠(SHR)和正常血压(WKY)大鼠的阻力血管(肠系膜动脉第二、三级分支)和肾脏组织中提取总RNA,与含10000个基因及EST片断的SBC-R-RC-100-13大鼠表达芯片进行杂交,找出差异表达的基因,并经RT-PCR和real-timeRT-PCR初步筛选出高血压新的相关基因。结果基因芯片在SHR组中发现19个上调基因,另外也发现19个基因表达下调,其中涉及细胞周期,直接参与代谢的酶,细胞信号转导及核转录因子等基因。RT-PCR和定量RT-PCR证实HSP70·2基因在SHR组中表达上调2·1倍(P<0·01)。结论HSP70·2基因可能和高血压相关,深入研究HSP70·2基因及其功能为进一步了解高血压病的分子机制提供新的思路和线索。