烧伤患者嗜中性白细胞趋化性及其与烧伤感染关系的研究

应用琼脂糖玻片法连续测定46例烧伤患者的嗜中性白细胞的趋化性,患者根据烧伤面积和深度分为三组,第Ⅰ组10例,烧伤面积小于30％;第Ⅱ组24例,烧伤面积为30～80％;第Ⅲ组12例,烧伤面积为大于80％或Ⅲ°面积大于50％。趋化性测定分别于伤后1～3天,4～7天,此后每周一次,直至创面基本复盖。 测定30例正常健康人的嗜中性白细胞的趋化性,作为正常对照,趋化指数(CI)为2.0503±0.155(x±2.045SE)     

人体皮肤表皮细胞培养和移植

作者采用三种方法,进行了皮肤表皮细胞培养共120例。并初步应用于临床。表皮细胞接种于胶原者,7～10天呈片,形成2～4层细胞,培养结果稳定。但细胞和胶原紧贴,不能单独分离。培养在3T3细胞滋养层者,于2～3周内形成3～8层复层细胞片,生长稳定。传代最多至第六代。由于3T3细胞是异种细胞,故未用于临床。表皮细胞接种于玻璃瓶进行无基底物培养,1～2天就有新细胞增殖,6～10天已形成整张复层细胞片,最多达15层以上,相似于人体皮肤表皮层结构。生长稳定,能进行多次传代,容易从瓶中分脱,适合于移植。作者将培养的细胞膜片移植于削痂创面及供皮区共20例,23例次。移植细胞膜片能加速创面愈合,移植后存活情况满意。     

增加精氨酸摄入量对灼伤病人淋巴细胞功能的影响

本实验观察了增加精氨酸摄入量对灼伤病人外周血淋巴细胞转化功能、血浆氨基酸谱及T淋巴细胞亚群的影响。结果表明,灼伤病人增加精氨酸摄入量后,其外周血淋巴细胞对植物血凝素(PHA)刺激的反应性,CD_4~+阳性细胞的比例,CD_4~+/CD_8~+细胞的比例均较对照组有明显提高。提示增加精氨酸摄入量具有改善灼伤后机体免疫功能的作用,为临床治疗提供了实验依据。     

增加精氨酸摄入量对烧伤患者血浆氨基酸谱的影响

目的观察摄入大剂量精氨酸对烧伤患者血浆氨基酸谱的影响。方法10例烧伤患者随机分为烧伤试验组和烧伤对照组(各5例),前者给予占总热量2%的盐酸精氨酸静脉注射液,后者给予占总热量2%的14复合氨基酸静脉注射液。两组患者其他营养成分的摄入量均相同。营养方案自伤后第3天起执行,给予总量的1/4;伤后4、5d给予总量的1/2;伤后6~21d给予全量。在两组患者伤后3d(方案实施前)及7、14、21、28d清晨取其静脉血标本,检测血浆氨基酸谱水平。以10名健康志愿献血者的血浆氨基酸谱水平作为正常参考值。结果伤后3d,两组患者血浆瓜氨酸水平显著低于正常参考值(P<0.05),而鸟氨酸和精氨酸水平与正常参考值比较差异无统计学意义(P>0.05)。烧伤对照组伤后3d后精氨酸、瓜氨酸和鸟氨酸水平呈现下降趋势。而烧伤试验组伤后14、21、28d血浆精氨酸水平分别为(280±121)、(223±106)、(110±44)μmol/L,与同期烧伤对照组(124±21)、(59±15)、(50±26)μmol/L相比明显偏高;伤后21d瓜氨酸和鸟氨酸水平分别为(30±5)、(162±44)μmol/L,明显高于同期烧伤对照组(8±7)、(66±4)μmol/L(P<0.05或0.01)。两组患者伤后血浆其他氨基酸水平差异均无统计学意义(P>0.05)。结论机体烧伤后血浆瓜氨酸转化为精氨酸的过程加速。增加外源性精氨酸摄入量可显著提高血浆精氨酸、鸟氨酸、瓜氨酸水平,但对其他氨基酸水平无明显影响,这一药理作用可能是通过加速鸟氨酸循环实现的。     

精氨酸对烫伤小鼠脾淋巴细胞功能的影响

我们以８周龄、体重２０克左右的ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠为实验对象，观察正常小鼠及烫伤小鼠脾淋巴细胞经各种不同浓度精氨酸的培养液体外培养后，对ＣｏｎＡ反应性的变化，同时观察经不同含量精氨酸的饮食饲养后，烫伤小鼠脾淋巴细胞功能的变化。结果表明：小鼠脾淋巴细胞经各种不同浓度精氨酸体外培养后，对ＣｏｎＡ的反应性在一定的范围内随精氨酸浓度的递增而增加；烫伤小鼠通过不同含量精氨酸的摄入，其脾淋巴细胞对ＣｏｎＡ的反应性呈现不同的变化，其中以摄入占总卡量２％精氨酸组的淋转功能最佳。实验提示：小鼠脾淋巴细胞的功能在一定浓度范围内对精氨酸存在剂量依赖关系，淋巴细胞最佳功能的表达需要一个最合适的精氨酸浓度，烫伤后脾淋巴细胞需要更高的精氨酸浓度才能表达其最佳功能。     

严重烧伤病人的营养补充

严重的烧伤都伴有超高代谢和明显的负氮平衡。临床表现为大量骨骼肌的消耗和氮的丢失,病人极度消瘦,因此烧伤病也称为自身分解性疾病。最近几年对超高代谢的发生机制有较多的研究和报道: 1.烧伤创面的水分蒸发量增加,热量也随之丧失。据统计每蒸发1ml水约丧失0.58千卡热量。一个体表烧伤面积50%以上的病人由创面水分蒸发失热可达80～100千卡/每小时。     

烧伤后24 h内削痂防治深Ⅱ度创面进行性加深的组织学观察

目的　探讨烧伤后 2 4h内行削痂手术 ,对深Ⅱ度烧伤创面进行性加深的防治作用。方法　选择 12例深Ⅱ度烧伤患者 ,在伤后 2 4h内进行创面削痂手术。分别从手术前、手术后 (伤后 5～7d)和未手术创面 (伤后 5～ 7d)获取标本。采用HE染色、Masson′s染色和免疫组化技术标记Vi mentin抗原阳性细胞的方法 ,对创面组织标本进行组织学观察。　结果　随病程演进 ,未手术创面炎性反应程度明显加重 ,组织坏死范围扩大 ,原来残存的皮肤附件因炎症加重而消失 ;Masson′s染色棕红色范围扩大 ,亮绿色范围缩小 ;Vimentin抗原阳性细胞数量明显减少。伤后 2 4h内削痂创面局部炎症反应较未削痂创面明显减轻 ,可见新鲜肉芽形成和部分上皮修复 ,组织坏死范围未见进一步扩大 ,与未手术区比较差异有显著性意义 (P <0 .0 5 ) ;Masson′s染色亮绿色范围无明显缩小 ;Vimentin抗原阳性细胞数量明显多于未手术区 (P <0 .0 5 )。　结论　烧伤后 2 4h内削痂 ,能适时去除创面坏死组织、阻断组织变质性损害的加剧 ,从而有效改善深Ⅱ度创面的进行性加深现象 ,对创面愈合具有促进作用。     

烧伤后24小时内削痂对深Ⅱ度创面局部炎症反应的影响

目的探讨烧伤后24h内行削痂手术对深Ⅱ度创面局部炎症反应以及组织损害的影响。方法选择12例烧伤患者,伤后24h内对深Ⅱ度创面行削痂手术,将患者同一创面分为3个标本采集区,即手术前、手术后和未手术区。手术前标本取自削痂术前创面,手术后和未手术区创面标本于伤后5—7d获取。采用组织培养和比色法测定创面组织释放白细胞介素(IL)8、髓过氧化物酶(MPO)和丙二醛(MDA)的水平,通过HE和Masson染色对创面组织坏死程度进行形态学观察。结果削痂手术后,患者创面组织局部释放IL8、MPO、MDA的水平分别为(6.83±1.85)μg/L、(4.07±0.87)U/g、(8.94±5.66)μmol/g,与未手术创面比较明显降低(P<0.01)。形态学观察显示,手术前创面有凝固性坏死灶;未手术创面炎症反应明显,坏死组织范围扩大;削痂手术后创面局部的炎症反应得到改善,未见坏死组织范围扩大。结论伤后24h内行削痂手术,可以改善深Ⅱ度烧伤创面局部的炎症反应,防止创面进行性加深,有利于创面及早愈合。     

真皮生物模板对成纤维细胞生物学行为的影响

目的　研究真皮生物模板的应用对皮肤组织创伤修复过程中成纤维细胞 (fibroblast,FB)生物学行为的影响 ,探讨其在影响组织修复及减轻瘢痕形成中的作用机制。　方法　 SD大鼠 12 0只 ,在背部造成 2 .5 cm× 2 .5 cm的全层皮肤组织缺损创面 ,随机分为 4个处理组 ,即开放创面组、全厚皮移植组、刃厚皮移植组、复合移植组 (无细胞真皮基质 +刃厚皮移植 ) ,分别于术后 1、2、4、6及 12周取材。通过免疫组织化学及图像分析技术检测组织标本中肌成纤维细胞 (myofibroblast,MFB)的标志蛋白—— α平滑肌肌动蛋白 (α smooth muscle actin,α- SMA)的表达以及纤维连接蛋白(fibronectin,FN)、整合素 α2 、β1 及转化生长因子 β1 (transforming growth factorβ1 ,TGF- β1 ) )的表达量。　结果　复合移植组 α- SMA在术后 1～ 12周低于开放创面组 ,术后 1、4、6周低于刃厚皮移植组 ,术后 2、12周高于全厚皮移植组(P<0 .0 5 ) ;复合移植组 FN在术后 1～ 12周低于开放创面组和刃厚皮移植组 ,术后 1～ 4周高于全厚皮移植组 (P<0 .0 5 ) ;复合移植组整合素 α2 在术后 1～ 12周低于开放创面移植组 ,术后 1～ 4周低于刃厚皮移植组 ,术后 1、2周高于全厚皮移植组 (P<0 .0 5 ) ;复合移植组整合素 β1 在术后 1～ 12周低     

高糖环境对浅二度烫伤创面VEGF表达及创面血管化的影响

目的建立糖尿病大鼠浅二度烫伤模型和不同浓度的高葡萄糖体外培养体系,研究高糖环境对促血管化生长因子的表达及创面血管化的影响。方法①90只清洁级SD大鼠分为对照组和STZ诱导的速发型糖尿病组,两组同时形成10%体表总面积(TBSA)的浅二度烫伤模型,分别取烫伤后第1、3、7、10、14天创面皮肤组织样本,测定糖含量、FGF-2、血管内皮生长因子(VEGF)表达,检测微血管密度。②人脐带静脉内皮细胞分别在正常环境及30、50mmol/L葡萄糖中培养7d,ELISA法检测内皮细胞释放VEGF水平。结果糖尿病组大鼠烫伤创面组织局部糖含量及VEGF表达均明显高于对照组,而其微血管密度显著低于对照组;体外培养的血管内皮细胞,高糖组释放VEGF水平显著低于正常环境组。结论在糖尿病浅二度烫伤创面愈合过程中,存在促血管化生长因子高表达与血管内皮细胞低反应性的分离现象。