慢性难愈合创面住院患者回顾性调查

Objective To investigate cause of chronic wounds and related status of patients so as to provide strategy for study and treatment of chronic wounds and establish ment of health policy. Methods A total of twelve thousand one hundred and sixty-one cases hospitalized in our hospital in 2008 were enrolled in the study. A chronic wound was defined as skin tissue defect which could not heal after one month of treatment. Medical records were thus screened. Then a retrospective study was performed on patients with chronic wounds with analysis of age, gender, injury cause, therapy, and average length of hospital stay. Data were processed with chi-square test and one-way analysis of variance. Results Investigation showed:397 out of 12 161 cases ( accounting for 3.3% ) were recognized as having chronic wounds. ( 1 ) The main causes for chronic wound were burn, diabetes, and pressure ulcer, accounting for 59.9% (238/397),15.6% (62/397), 10.8% (43/397), respectively. The other causes were operative injury, infection,varicosity, etc. There was statistical difference among the numbers of patients with chronic wounds with regard to various causes of injury (x 2 = 136.21, P = 0. 001 ). (2) Among patients with chronic wound, the patients older than 70 years. There was significant difference in the numbers of patients with chronic wound among different age groups (x2 = 24.12, P =0. 025). There was statistical difference among the numbers of patients with chronic wound in different age groups with each cause of injury ( with x 2 values from 7.86 to 28.31, P values all below 0.05 ). ( 3 ) All patients with chronic wounds received traditional dressing. In 60. 5% (240/397) and 86.4% (343/397) of patients, operative treatment or antibiotics were given. (4)The average length of hospital stay in patients with chronic wound [( 38 ± 27 ) d] was longer as compared with that of all the inpatients in the same period [(15 ± 7) d, F = 22.82, P = 0. 012]. There was obvious difference in the average length of hospital stay among patients with chronic wound caused by different reasons ( F = 24.06, P = 0. 036) , in which burn injury resulted in the longest length of hospital stay [(47 ±27) d]. Conclusions Chronic wounds are mainly caused by diabetes and burn, and characterized by old age and longer length of hospital stay. It is necessary to strengthen translational research and related policy making, so that more rational treatment can be applied for patients with chronic wounds.     

创面难愈机制研究——糖尿病皮肤的"微环境污染"

在创面修复中,糖尿病合并难愈创面是最值得重视的领域之一.其中糖尿病下肢溃疡特别是糖尿病足的发生率日渐升高,但治疗手段局限,预后较差.迄今认为,糖尿病足的发生基于血管神经病变,表现为伴有血供不足和感染的创面愈合延迟与溃疡形成[1],涉及组织细胞、细胞外基质、生长因子等诸多环节[2],但在此研究基础上衍生出来的治疗策略仍然不尽如人意.     

创面疾病的标准化诊断和综合防治

随着经济和社会发展,各类急、慢性创面疾病罹患人群急剧增加,人们对创面治疗的需求也日益增高.各种创面在数量上的不断增多和导致创面形成原因的复杂性,使得以外科处理原则为基础、以单一学科治疗为手段的既往创面疾病诊疗方式显得力不从心.     

基质糖基化对角质形成细胞迁移功能损害的机制

目的 探讨糖尿病条件下大鼠创面愈合过程中角质形成细胞迁移功能受损的可能机制.方法 选用SD大鼠6只,取背部表皮进行角质形成细胞培养;制作并鉴定糖基化基质模型;评价糖基化基质对正常大鼠角质形成细胞迁移功能的影响;测定糖基化基质对正常大鼠角质形成细胞粘附功能、培养12,24 h黏附形态、伪足形成、微丝表达、整合素表达的影响.结果 糖基化层黏连蛋白对细胞迁移较对照组有明显抑制(P＜0.05);对细胞贴壁率无明显影响(P＞0.05),但抑制了细胞的伸展及伪足的伸出,干扰了微丝的聚集,降低了整合素的表达(P＜0.05).结论 正常大鼠皮肤角质形成细胞在糖基化基质上出现迁移功能受阻,这可能是与整合素信号传导出现障碍,引起整合素、肌动蛋白表达减少和微丝形成,从而引起丝状伪足和板状伪足形成减少有关.     

大鼠烧伤感染模型肺组织热应激蛋白70的表达及意义

目的：了解实验大鼠热应激蛋白70（Heat stress proteins,HSP70)的表达与烧伤脓毒症的关系，探讨其作用机制。方法：将36只雄性Wistar大鼠随机数字表法分成6组，每组6只。其中4组以92℃水，18s烫伤(烫伤面积20％)，腹腔注射乳酸林格氏液休克复苏，48h后尾静脉注射绿脓杆菌：PA103悬液0．5mL(菌量1．5&;#215;10^9CFU／mL)制成大鼠烧伤感染模型，分别对成模后0，4,24，48h时相点进行检测；另以正常组及烧伤48h组作为对照。以免疫组化法及Western Blot检测各组肺组织HSP70的表达，同时以偶氮显色法检测各组血浆内毒素水平，并对大鼠肺组织进行大体及镜下观察。结果：Wistar大鼠在尾静脉注射绿脓杆菌PA103悬液后，其血浆内毒素水平迅速上升。与正常对照组相比，烧伤感染组大鼠的血浆内毒素水平明显升高(t=2．2281，P&;lt;0．05)。正常大鼠肺组织HSP70表达较弱，表达部位在肺泡上皮及支气管上皮黏膜细胞的胞质。在烧伤感染条件下。大鼠肺组织HSP70表达逐渐增强，至成模后24h，HSP70表达累积量达到最高峰，并呈现较明显的核表达。成模后48h，HSP70表达逐渐减弱，核表达逐渐消失，主要在肺泡上皮及支气管上皮黏膜细胞的胞质表达。结论：HSP70与烧伤感染后的应激反应有密切关系，其表达规律与热应激反应相似。在烧伤感染的早期(24h内)，热应激蛋白表达水平与血浆内毒素水平有一定的相关性。     

增加精氨酸摄入量对烧伤患者血浆氨基酸谱的影响

目的观察摄入大剂量精氨酸对烧伤患者血浆氨基酸谱的影响。方法10例烧伤患者随机分为烧伤试验组和烧伤对照组(各5例),前者给予占总热量2%的盐酸精氨酸静脉注射液,后者给予占总热量2%的14复合氨基酸静脉注射液。两组患者其他营养成分的摄入量均相同。营养方案自伤后第3天起执行,给予总量的1/4;伤后4、5d给予总量的1/2;伤后6~21d给予全量。在两组患者伤后3d(方案实施前)及7、14、21、28d清晨取其静脉血标本,检测血浆氨基酸谱水平。以10名健康志愿献血者的血浆氨基酸谱水平作为正常参考值。结果伤后3d,两组患者血浆瓜氨酸水平显著低于正常参考值(P<0.05),而鸟氨酸和精氨酸水平与正常参考值比较差异无统计学意义(P>0.05)。烧伤对照组伤后3d后精氨酸、瓜氨酸和鸟氨酸水平呈现下降趋势。而烧伤试验组伤后14、21、28d血浆精氨酸水平分别为(280±121)、(223±106)、(110±44)μmol/L,与同期烧伤对照组(124±21)、(59±15)、(50±26)μmol/L相比明显偏高;伤后21d瓜氨酸和鸟氨酸水平分别为(30±5)、(162±44)μmol/L,明显高于同期烧伤对照组(8±7)、(66±4)μmol/L(P<0.05或0.01)。两组患者伤后血浆其他氨基酸水平差异均无统计学意义(P>0.05)。结论机体烧伤后血浆瓜氨酸转化为精氨酸的过程加速。增加外源性精氨酸摄入量可显著提高血浆精氨酸、鸟氨酸、瓜氨酸水平,但对其他氨基酸水平无明显影响,这一药理作用可能是通过加速鸟氨酸循环实现的。     

氨基胍对糖尿病烧伤创面促愈作用的研究

目的　探讨氨基胍对糖尿病烧伤创面修复的影响及其可能的机制。　方法　SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病对照组和氨基胍干预组。后两组通过腹腔注射链脲佐菌素 (STZ)建立糖尿病模型。STZ注射后 ,干预组予以氨基胍 10 0mg·kg-1·d-1喂养 ,8周后烫伤前为 0时相点 ,三组大鼠给予深Ⅱ度烫伤 ,于伤后 3,7,14 ,2 1d描出创面形状 ,计算创面愈合率 ,观察组织形态学改变 ,并对创面组织糖基化终末产物 (AGEs)含量、糖含量及局部组织释放一氧化氮 (NO)含量进行检测。　结果　与糖尿病对照组比较 ,应用氨基胍后 ,皮肤组织糖含量不降低 ,创面局部炎症反应出现较早 ,坏死组织脱落及上皮匍行提前 ,AGEs含量减少 ,组织释放NO的能力增加 ,创面愈合明显加快。　结论　氨基胍可通过抑制AGEs形成 ,促进NO的合成和释放 ,促进糖尿病烧伤创面愈合。     

糖尿病大鼠深Ⅱ度烫伤创面成纤维细胞生物学行为的改变

目的研究糖尿病深Ⅱ度烫伤对真皮成纤维细胞(FB)生物学行为的影响。方法以链脲菌素(STZ)诱导糖尿病的深Ⅱ度10%TBSA烫伤大鼠模型,观察创面愈合情况。流式细胞术检测真皮组织中FB细胞周期;TUNEL法检测FB凋亡;伤后0、3、7、21d检测皮肤组织的羟脯氨酸含量。结果糖尿病大鼠深二度烫伤后愈合延迟,糖尿病组烫伤后进入S期的成纤维细胞数量明显低于正常组(P<0.01,P<0.05),创面凋亡细胞数量高于正常组(P<0.01,P<0.05);烫伤前和烫伤后糖尿病组皮肤组织单位面积羟脯氨酸含量均低于正常大鼠(P<0.01,P<0.05)。结论在糖尿病病理状态下,皮肤损伤后主要的修复细胞FB增殖异常,凋亡增多,胶原含量减少,可能是创面修复延迟的原因之一。     

糖基化终末产物对人表皮角质形成细胞周期调控的影响机制

目的通过体外试验探讨糖基化终末产物（AGEs）对表皮角质形成细胞周期调控的影响机制。方法体外培养的人表皮角质形成细胞经AGEs（150mg／m1）作用后,用噻唑兰（MTT）法研究其增殖活力、流式细胞仪研究细胞周期和凋亡率。用小片断RNA干扰（siRNA）的方法阻断细胞中AGEs受体（receptor of AGEs,RAGE）mRNA的表达,realtime PCR鉴定其阻断效率。RT-PCR法检测RAGE阻断前后各组细胞内RAF-1、黏着斑激酶（FAK）、周期素（cyclin）D1、cyclinBl、周期表依赖性激酶4（CDK4）的核酸水平表达差异。结果经AGEs干预后表皮角质形成细胞增殖活性下降,凋亡率升高,细胞周期G2期的比例显著增高,而细胞周期调控相关因子及信号因子RAF．1、cyclinDl、cyelinBl、CDK4的核酸表达较对照组却明显升高,用RAGE阻断以上因子后表达则与对照组相比无差异。结论在上述体外模型下,表皮角质形成细胞的周期调控因子升高,而增殖却下降且凋亡增加,可能是AGEs干预后细胞内启动内源性代偿调控机制,且这种调控机制与其受体（RAGE）途径相关;AGEs也可能还通过以上细胞周期调控因子以外的其他途径或机制影响细胞生物学功能。     

糖基化基质对人皮肤成纤维细胞增殖凋亡平衡的研究

目的探讨糖尿病皮肤细胞外基质（ECM）糖基化改变与细胞增殖凋亡平衡的相关性。方法DM或非DM患者的皮肤组织和溃疡创面标本组织学观察,同时免疫组化法检测皮肤组织增殖细胞核抗原（PCNA）、凋亡细胞、糖基化终末产物（AGE）和糖基化终末产物受体（RAGE）表达;体外建立糖基化基质,RAGE抗体干预后,检测细胞存活率、细胞周期和凋亡。结果与对照组相比,DM皮肤胶原萎缩,凋亡细胞比例增高;创面肉芽形成不良,细胞增殖能力减弱,凋亡细胞增加,AGE和RAGE表达增多;体外糖基化基质上接种成纤维细胞存活率明显减少,细胞周期运行障碍,凋亡增加,阻断AGE-RAGE间相互作用可基本缓解糖基化基质对细胞增殖凋亡过程的影响。结论DM皮肤组织中糖基化ECM蓄积是细胞功能改变的重要环境介质,经RAGE介导影响细胞增殖凋亡平衡,致糖尿病皮肤创伤起点异常,创面难愈。