L-精氨酸对糖尿病烧伤创面促愈作用的研究

目的探讨精氨酸对糖尿病烧伤创面修复的影响及其可能的机制. 方法 SD大鼠随机分为正常对照组(A组)、糖尿病对照组(B组)、糖尿病精氨酸干预组(C组)和糖尿病甘氨酸对照组(D组).糖尿病模型通过腹腔注射STZ建立,然后喂养8周后给予深Ⅱ度烫伤,于伤后0、1、3、7、14、21 d时相点对创面愈合面积、组织形态学改变、创面组织糖含量、羟脯氨酸(OHP)含量及局部组织释放转化生长因子-β1(TGF-β1)含量进行检测. 结果应用精氨酸后,皮肤组织糖含量降低,创面局部炎症反应出现较早,坏死组织脱落及上皮匍行提前,OHP含量、组织释放TGF-β1能力均增加,创面愈合明显加快(P﹤0.05～0.01). 结论 L-精氨酸可通过降低皮肤组织糖含量及增加TGF-β1的合成和释放,促进糖尿病烧伤创面愈合.     

细胞周期调控与表皮细胞增殖

细胞周期是细胞生命活动的基本过程。细胞周期调控机制中，以细胞周期素、细胞周期素依赖性激酶以及细胞周期素依赖性激酶抑制蛋白为核心的细胞周期调控因子通过复杂有序的调控，保证细胞周期的正常运行。细胞周期素与细胞周期素依赖性激酶的结合是启动细胞周期，并使其顺利运行的关键；而细胞周期素依赖性激酶抑制蛋白在细胞周期中发挥主要的负调控作用。这一机制在表皮细胞增殖调控中起重要作用。     

糖尿病大鼠深Ⅱ度烫伤后真皮成纤维细胞的生物学特征

目的观察糖尿病（DM）大鼠深Ⅱ度烫伤肝创面皮肤组织及真皮成纤维细胞（Fb）生物学特征，探讨其与DM创面愈合延迟的病理关系。方法将90只SD火鼠分为DM组（50只）和NM组（NM，40只），DM纽大鼠制成链脲菌索绣导的DM模型，之后将两纰大鼠造成10％TBSA深Ⅱ度烫伤。各组大鼠均于伤前及伤后3、7、14、21d（每组每时相点6只）留收创面皮肤组织标本，对其各项生物学特征进行检测。结果与NM组大鼠比较，DM组伤前真皮厚度明显变薄（P〈0．01）、胶原排列紊乱、真皮内出现大量的慢性炎性细胞浸润，皮肤糖含量升高（DM组2．77mg／g，NM组0．85mg／g，P〈0．01）和高级糖基化终产物（AGEs）蓄积。深Ⅱ度埂伤后，DM组大鼠Fb的S期细胞百分比和羟脯氨酸合成量明显低于NM组，而Fb的凋亡率却明显高于NM组（P〈0．05或0．01）。结论DM大鼠合并深Ⅱ度烫伤后真皮中Fb的乍物学特征异常，可能与局部皮肤组织糖含量升高和AGEs的蓄积有关，推测是DM患者容易并发慢性溃疡的病理基础之一。     

糖尿病皮肤"隐性损害"的机制研究

目的明确糖尿病皮肤的伤前病理改变是创面难愈的潜在机制。方法体重200～220g的SPF级SD大鼠14只，分为糖尿病组(8只)和正常对照组(6只)，以链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病大鼠模型，成模后8周与正常对照组同时采集背部皮肤，观察皮肤的组织学特征，检测表皮细胞周期，测定皮肤组织糖含量、糖基化终末产物(AGEs)蓄积程度、羟脯氨酸含量、Ⅰ型和Ⅲ型胶原、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达量及其被糖基化程度、髓过氧化物酶(MPO)含量以及基质金属蛋白酶-2(MM-2)活性和基质金属蛋白酶抑制因子-2(TIMP-2)水平：结果糖尿病皮肤表皮细胞层次欠清晰，部分表皮细胞缺乏复层排列，棘细胞数量明显减少，表皮层厚度明显变薄；糖尿病大鼠皮肤真皮层明显变薄，胶原纤细、排列紊乱，Ⅲ型胶原分泌增加，Ⅰ、Ⅲ胶原交织排列，部分胶原可见变性、肿胀，胶原变性区域可见慢性炎性细胞局灶性浸润；糖尿病大鼠皮肤组织糖含量明显高于正常对照组，AGEs明显蓄积；糖尿病大鼠皮肤S期以及G2／M期的表皮细胞百分比明显低于正常对照组；糖尿病皮肤局部bFGF释放和表达虽不少于正常皮肤，但存在明显的bFGF糖基化；此外，糖尿病大鼠皮肤组织MPO含量明显增多、MMP-2活性明显增加，活化的MMP-2／TIMP-2比值升高。结论糖尿病大鼠皮肤组织在未损伤、组织结构完整性未遭到破坏的情况下已经存在着组织学和细胞生物学行为的改变，这种有别于皮肤组织完整性破坏的隐匿性损害可能是糖尿病皮肤易损或创面形成后难以愈合的重要原因之一。     

真皮模板对大鼠创面组织生物力学顺应性的影响

目的　探讨真皮模板对创伤修复过程中创面皮肤组织生物力学顺应性的影响。方法将144只SD大鼠造成全层皮肤组织缺损,根据是否行自体皮移植及移植皮厚度随机分为开放创面组(创面不植皮,包扎后自然愈合)、全厚皮组(创面移植自体全厚皮)、刃厚皮组(创面移植自体刃厚皮)、复合移植组(创面移植脱细胞真皮基质 自体刃厚皮),每组每时相点6只大鼠。分别于术后1、2、4、6、12、20周取创面组织标本,用Instron生物力学测定仪测定各组创面组织的生物力学顺应性;用亲和素生物素复合物(ABC)法检测各组真皮成纤维细胞中α平滑肌肌动蛋白(αSMA)的表达量。结果　术后4—20周复合移植组创面组织的力学顺应性优于开放创面组和刃厚皮组(P<0 .05), 较全厚皮组差(P<0 .05).术后4周复合移植组αSMA的阳性表达率为(7. 53±0. 98)%,低于开放创面组(26. 99±2. 90)%和刃厚皮组[ (12. 18±2. 79)%,P<0 .01], 高于全厚皮组。　结论　真皮模板可改善组织的力学顺应性, 这可能是其影响创面愈合过程中瘢痕形成、改善愈合质量的机制之一。     

AdMaxTM重组腺病毒载体转染人脂肪间充质干细胞

目的 探讨AdMaxTM重组腺病毒载体转染人脂肪间充质干细胞(ADSCs)的最佳条件.方法 胶原酶消化法获得人ADSCs并行原代培养,流式细胞仪鉴定其表面标记;AdMaxTM重组腺病毒载体以梯度感染复数值(MOI)(10、50、100、200、400、800)转染人ADSCs,分别于转染后24、48、72、96 h,荧光倒置显微镜观察绿色荧光蛋白(GFP)表达,KS400型图像分析仪测定转染效率.结果 当MOI为400时可获得较佳的转染效率,GFP阳性细胞数量达到峰值,转染率达到91.25%.空载体转染人ADSCs的效率与转染时间无显著相关性.结论 AdMaxTM重组腺病毒是转染人ADSCs的较理想载体.通过选择恰当的MOI值能提高细胞对重组腺病毒的摄入,从而提高转染效率.     

口服精氨酸对糖尿病大鼠皮肤组织糖利用的影响

目的:探讨精氨酸对糖尿病大鼠皮肤组织糖利用的影响及其可能的机制。方法:SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病对照组、糖尿病精氨酸治疗组和糖尿病甘氨酸对照组。糖尿病模型通过腹腔注射链脲佐菌素建立。模型成功后糖尿病精氨酸治疗组和糖尿病甘氨酸对照组分别予精氨酸和甘氨酸200mg/(kg·d)喂养,测其不同时期的血糖和体质量。8周后取胰腺组织观察组织形态学改变,并对血浆胰岛素含量、皮肤组织糖含量进行检测。结果:与甘氨酸对照组相比,精氨酸治疗后血糖恢复正常者显著增加;与糖尿病组相比,胰腺组织修复不明显的情况下,应用精氨酸后,血浆胰岛素增加,皮肤组织糖含量降低,体质量增加。结论:口服精氨酸可通过改善胰腺功能,促进胰岛素分泌,增加糖尿病皮肤组织等糖利用,降低血糖。