天晴甘美对慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞细胞周期的影响简

目的：研究天晴甘关注射液对慢性乙型肝炎（慢乙肝）患者外周血单个核细胞（PBMC）细胞周期的影响。方法：采用凯基细胞周期检测法检测天晴甘关对细胞周期的影响。结果：天晴甘美注射液呈剂量依赖性抑制外周血单个核细胞z增殖,使细胞阻滞于G。／G。期,细胞DNA合成减少,但细胞无凋亡。结论：天晴甘美注射液对PBMC具有一定抑制作用,可能使细胞阻滞于G。／G。期,导致细胞DNA合成减少。     

自身抗体谱在原发性胆汁性肝硬化诊断中的作用

目的分析原发性胆汁化肝硬化（PBC）患者的自身抗体谱和免疫功能,探讨其对PBC的诊断价值。方法用免疫印迹法检测107例PBC、100例疾病对照组和30例健康体检者血清中的抗线粒体抗体（AMA）M2亚型、AMAM2—3E（BPO）、抗Spl00抗体、抗gp210抗体、抗肝肾微粒体1型（LKM一1）抗体、抗早幼粒细胞性白血病（PML）抗体、抗肝特异性胞质抗体-1（LC-1）、抗可溶性肝抗原,肝胰抗原抗体（SLA／LP）。结果1．AMA—M2、AMAM2—3E（BPO）、抗Spl00抗体、抗PML抗体、抗gp210抗体对PBC诊断的敏感性、特异性分别为74．7％、90．2％,86．9％、95．1％,32．7％、97．1％。27．1％、97．5％,39．3％,98．3％。未检测到抗LKM-1抗体、抗LC～1抗体、抗SLA几P抗体。2．在118例疾病对照组中AMA—M2、AMAM2—3E（BPO）、抗Sp100抗体、抗PML抗体、抗gp210抗体检出率分别为16％、11％、3％、1％、3％,未检测到抗LKM-1抗体、抗LC-1抗体、抗SLA／LP抗体。在正常对照组上述8种抗体的检出率均为0。3．AMA—M2呈阳性的患者（n=97）比呈阴性的患者（n=lO）有更加严重的疾病。这可通过更加严重的组织学变化和更高的IgG,IgM和ALP平均值看出;抗gp210抗体呈阳性的患者肝功能衰竭发生率明显高于呈阴性的患者（P〈0．05）。结论PBC患者血清中可检测到多种自身抗体,其中抗Spl00抗体、抗PML抗体、抗gp210抗体在PBC诊断中特异性高,可协助诊断PBC。     

EB病毒两种抗体联合检测在鼻咽癌诊断中的应用

目的 探讨EB病毒(epstein-ban virus,EBV)抗体在鼻咽癌早期诊断中的应用价值.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定53例鼻咽癌患者、71例鼻部疾病患者和40例正常体检人群血清EBV相关抗体(EBV VCA-IgA和EA-IgA).结果 3组比较,鼻咽癌组血清VCA-IgA的阳性检出率为79.2%,EA-IgA阳性率为50.9%,与其余两组比较差异有统计学意义(P<0.01);鼻咽癌组和鼻部疾病组内VCA-IgA和EA-IgA的阳性率比较差异有统计学意义(P<0.01);检测鼻咽癌组两项指标的吸光度均值较另两组高;VCA-IgA单独检测及两项联合检测均具有较高的敏感性(79.2%),EA-IgA单独检测及两项联合检测均具有较强的特异性(93.8%).结论 联合检测鼻咽癌病人血清的VCA-IgA和EA-gA可兼具两者的性能优势,敏感性较高,特异性较强,对鼻咽癌的早期诊断具有重要的临床应用价值.     

血液透析患者中丙型肝炎病毒RNA的定量测定

1998年9～11月采集51例长期血液透析患者的血清、外周血淋巴细胞(ＰＢＭＣ)及尿液,采用酶免疫试验(ＥＩＡ)检测抗ＨＣＶＩｇＧ,ＲＴＰＣＲ法检测ＨＣＶＲＮＡ,荧光定量ＰＣＲ法测定ＨＣＶＲＮＡ水平,研究透析与丙肝病毒感染的关系。51例患者年龄23～78岁,平均54±3岁;男29例,女22例;透析时间1～311个月,平均35±13个月。抗ＨＣＶ阳性率25.5%(13/51),透析时间为≤20、21～40、41～60、≥61个月,抗ＨＣＶ阳性率分别为9.1%、14.3%、50%、71.4%;输血量为0、≤800、≤2400、≤3200、>3200ｍｌ,抗ＨＣＶ阳性率分别为0%、33.3%、45.5%、50%。随着透…     

荧光定量PCR与RT-PCR技术检测HCV-RNA的比较观察

目的 比较荧光定量ＰＣＲ与ＲＴ－ＰＣＲ（定性）检测不同检材中的ＨＣＶ－ＲＮＡ,评价荧光定量ＰＣＲ技术测定ＨＣＶ－ＲＮＡ水平的价值。方法 采用荧光定量ＰＣＲ及ＲＴ－ＰＣＲ（定性）技术同时检测了７１例血液透析患者的血清,血浆,淋巴细胞、尿液标本中ＨＣＶ－ＲＮＡ。结果 血清、淋巴细胞,尿液标本中ＨＣＶ－ＲＮＡ的荧光定量ＰＣＲ检出率（４６．３８％,８０．００％）,分别高于相应标本中ＨＣＶ－ＲＮＡ的ＲＴ－Ｐ     

两种HBV全基因组克隆方法的比较

目的通过比较血清HBVDNA水平对一片段PCR法和两片段PCR法这两种不同方法的HBV全基因组克隆效率的影响,选择出合适的HBV全基因组克隆技术,供后续的HBV的基础和临床研究。方法采集了乙型肝炎患者85份血清,分别用本研究建立的一片段PCR法及两片段PCR法扩增HBV全基因组,经双酶切鉴定后将PCR产物克隆入载体,进行HBV全基因组序列测定。同时用实时荧光定量PCR法检测上述85份血清的HBVDNA滴度。结果本研究建立的一片段法扩增成功需要的血清HBVDNA浓度高于二片段法,两种方法扩增的效率比较为一片段方法扩增的成功率低于二片段方法(P<0.05)。一片段方法的保真性:核苷酸的人为突变率为1.13bp/kb。灵敏度:为102个初始模板,大于103的重组质粒DNA80%可以成功扩增,浓度低于该值的扩增效率比较低。结论血清HBVDNA水平对两种扩增方法的成功率有一定影响,滴度高低是选择合适PCR扩增方法的依据。HBVDNA滴度大于103copies/ml的样本,可选用一片段PCR法的全基因组扩增、克隆技术,而对HBVDNA滴度小于103copies/ml样本,则可选用两片段法的全基因组扩增、克隆技术。本研究建立的一片段PCR法扩增HBV全基因组克隆的技术是一种值得推荐的好方法,但需进一步优化。     

通过生物信息学方法筛选和初步鉴定小鼠Trim30α的人同源基因

目的 通过生物信息学方法寻找小鼠Trim30α的人同源基因,观察候选人Trim蛋白对TAB2诱导的NFκB荧光素酶报告基因活化的影响. 方法 用MEGA4.0软件对具有RBCC和SPRY结构域的Trim分子进行进化树分析,用DNAMAN6.0软件对候选人Trim与小鼠Trim30α进行氨基酸序列比对,比较Trim30α相毗邻基因在小鼠和人染色体上的排列分布规律,以筛选出小鼠Trim30α的人同源基因,并将其构建成真核表达载体,用双萤光素酶报告基因系统检测其对TAB2诱导的NFκB报告基因活化的影响. 结果 生物信息学分析显示,Trim30α与人Trim5α、Trim6、Trim22、Trim34α来自进化树的同一分支节点；Tim22、Trim5α与Trim30α的氨基酸序列同源性分别为42.51％、45.47％; Trim22可以抑制TAB2诱导的NFκB报告基因的活化. 结论 Trim22对TAB2诱导的NFκB报告基因活化有负向调节作用,可能与Trim30α具有相类似的生物学功能.     

通过生物信息学方法筛选和初步鉴定小鼠Trim30α的人同源基因

目的通过生物信息学方法寻找小鼠Trim30α的人同源基因,观察候选人Trim蛋白对TAB2诱导的NFκB荧光素酶报告基因活化的影响。方法用MEGA4.0软件对具有RBCC和SPRY结构域的Trim分子进行进化树分析,用DNAMAN6.0软件对候选人Trim与小鼠Trim30α进行氨基酸序列比对,比较Trim30α相毗邻基因在小鼠和人染色体上的排列分布规律,以筛选出小鼠Trim30α的人同源基因,并将其构建成真核表达载体,用双萤光素酶报告基因系统检测其对TAB2诱导的NFκB报告基因活化的影响。结果生物信息学分析显示,Trim30α与人Trim5α、Trim6、Trim22、Trim34α来自进化树的同一分支节点;Trim22、Trim5α与Trim30α的氨基酸序列同源性分别为42.51%、45.47%;Trim22可以抑制TAB2诱导的NFκB报告基因的活化。结论 Trim22对TAB2诱导的NFκB报告基因活化有负向调节作用,可能与Trim30α具有相类似的生物学功能。     

自身抗体分析在慢性胆汁淤积性肝病鉴别诊断中的价值

目的分析多种自身抗体在慢性胆汁淤积性肝病鉴别诊断中的价值。方法选取186例慢性胆汁淤积性肝病的患者,包括107例原发性胆汁性肝硬化（PBC）、48例原发性硬化性胆管炎（PSC）、18例AMA阳性的自身免疫性肝炎（AIH）、13例其他肝内胆汁淤积患者,用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测这些患者血清中传统的抗AMA-M2、抗AMA-M2-3E（BPO）IgG、抗AMA-M2-3E（BPO）IgA、抗gp210抗体、抗Sp100抗体、抗PML抗体、抗SLA/LP抗体、抗ACA抗体。结果 107例PBC患者抗M2-3E ELISA法AMA-M2 IgG的检出率为86.9%。在AMA-M2 IgG阳性病人中抗gp210和抗Sp100抗体明显高于抗PML抗体、抗SLA/LP抗体、抗ACA抗体差别具有统计学意义（P〈0.05）。27例AMA-M2阴性的PBC患者中有11例患者AMA-M2 IgG阳性,16例患者存在AMA-M2-3E IgG、抗Sp100抗体、抗gp210抗体1种或几种的组合。抗Sp100抗体、抗gp210抗体只在PBC患者和AMA阳性的自免疫性肝炎患者中被检测到,且抗gp210抗体出现在愈后差的患者中。结论 AMA和抗核抗体（ANA）检测在慢性胆汁淤积性肝病鉴别诊断中具有重要作用。     

广州地区猴腺病毒7型血清流行病学初步调查

目的评估广州地区猴腺病毒7型(SAdV-7)先存中和抗体阳性率情况。方法首先构建以β-半乳糖苷酶(LacZ)为报告基因,结合CMV启动子的猴重组腺病毒7型载体SAdV7-CMV-LacZ。然后使用化学发光法,检测209份免疫功能正常的成人的血清样本中SAdV-7中和抗体阳性率情况。结果我们发现SAdV-7中和抗体的阳性率为27.8%(58/209)。SAdV-7中和抗体在低滴度时阳性率最高,并且随着滴度的升高,阳性血清分布率逐渐降低。在20～40岁人群中,SAdV-7中和抗体阳性率最高,在<20岁人群中未检测到SAdV-7中和抗体。结论广州地区人群中针对SAdV-7的先存中和抗体阳性率低。因此,SAdV-7在基因治疗及基因疫苗的应用上是一个具有吸引力的候选载体。