复方苦参注射液对人肝癌细胞SMMC-7721增殖与细胞周期的影响

目的：观察复方苦参注射液对人肝癌SMMC．7721细胞增殖与细胞周期的影响。方法：采用MTF法观察复方苦参注射液对SMMC．7721细胞增殖的影响;应用流式细胞术分析对SMMC-7721细胞周期的影响。结果：复方苦参注射液对SMMC-7721细胞有明显的抑制增殖的作用（P〈0．05）,该作用具有时间、剂量依赖性;流式细胞术分析显示,复方苦参注射液可使G0／G1期细胞比例升高,S期细胞比例下降,即细胞被阻滞于G0／G1期。结论：复方苦参注射液能抑制人肝癌SMMC-7721细胞的增殖,并且将细胞阻滞于G0／G1期。     

姜黄素对Raji细胞体外抗癌作用的实验研究

目的研究姜黄素对Raji细胞体外抗癌作用及其机制,对比研究其对RaIi细胞和人单个核细胞的细胞毒性。方法用MTT法检测姜黄素对Raji细胞及人单个核细胞增殖的影响,Annexin—V／PI双标流式术、缺口末端标记法检测姜黄素对Raji细胞及人单个核细胞凋亡的影响,PI单标流式细胞术测定姜黄素对Raji细胞DNA含量分布的影响。结果(1)姜黄素对Raji细胞具有明显的增殖抑制作用。(2)姜黄素可以时间和剂量依赖性方式诱导Raji细胞凋亡。(3)姜黄素组Raji细胞周期发生变化,细胞周期被阻滞于G0／G1和G2／M期,S期比例减少。(4)姜黄素对人单个核细胞无明显抑制增殖和诱导凋亡作用。结论姜黄素能够调控Raji细胞的细胞周期并诱导其凋亡,从而抑制Raji细胞增殖;姜黄素对人单个核细胞无明显细胞毒作用,而选择性作用于肿瘤细胞。     

槲皮素对人白血病HL-60细胞DNA和细胞周期的影响

以人白血病HL－60细胞为实验对象，利用3H-脱氧胸苷（3H－TdR）掺入实验，JAM实验法及流式细胞仪观察槲皮素对HL－60细胞DNA和细胞周期的影响。结果显示，槲皮素15μmol／L～120μmol／L可显著抑制HL－60细胞的DNA合成及诱发DNA链断裂；槲皮素主要是阻滞G1期向S期移行，使G1期细胞蓄积，S期细胞减少。槲皮素的作用呈明显的剂量依赖关系。     

八珍汤对骨髓抑制小鼠血发生的影响

本研究从外周血细胞、骨髓有核细胞、造血祖细胞及细胞周期等方面探讨八珍汤对骨髓抑制小鼠造血系统的作用及其机制。结果显示：①八珍汤能明显促进骨髓抑制小鼠外周血白细胞（WBC）、红细胞（RBC）、血小板（PLT）、血红蛋白（HB）以及骨髓有核细胞（BMC）的增加；②体内用药能明显促进红系（BFU—E，CFU—E）、粒系（CFU-GM）和巨核系（CFU—Meg）三系造血祖细胞集落形成；③能明显促进骨髓抑制小鼠骨髓细胞进入细胞周期，使G0／G1期细胞比例减少，S期和G2／M期细胞比例增加。     

十全大补汤对骨髓抑制小鼠造血的影响

本研究从外周血细胞、骨髓有核细胞、造血祖细胞及细胞周期等方面探讨十全大补汤对骨髓抑制小鼠造血系统的作用及其机制。结果显示：①十全大补汤能明显促进骨髓抑制小鼠外周血白细胞（WBC）、红细胞（RBC）、血小板（PLT）、血红蛋白（HB）以及骨髓有核细胞（BMC）的增加；②体内用药能明显促进红系（BFU-E，CFU-E）、粒系（CFU-GM）和巨核系（CFU-Meg）三系造血祖细胞集落形成；③能明显促进骨髓抑制小鼠骨髓细胞进入细胞周期，使G0／G1期细胞比例减少，S期和G2／M期细胞比例增加。     

健脾益肺解毒方对肺癌A549/DDP耐药细胞周期的影响

目的：探讨健脾益肺解毒方药物血清对肺癌耐药细胞周期的影响。方法：将细胞分为荷瘤动物药物血清大、中、小剂量组,模型组,顺铂（DDP）组,维拉帕米（VRP）组,大、中、小剂量分别加DDP组和加VRP组。采用血清药理学及流式细胞术,观察健脾益肺解毒方药物血清分别与DDP和VRP合用后,对A549／DDP细胞周期的作用。结果：健脾益肺解毒方药物血清合用DDP和VRP后能协同DDP和VRP增加A549／DDP细胞GO／G1期细胞数,减少S期细胞比例（P〈0．05）。结论：健脾益肺解毒方药物血清能协同DDP和VRP阻滞A549／DDP细胞于G0／G1期,阻止A549／DDP细胞DNA的合成,抑制肺癌耐药细胞的分裂增殖。     

黄芪对人外周血内皮祖细胞增殖及细胞周期的影响

目的研究黄芪对人外周血内皮祖细胞(EPCs)增殖、细胞周期的影响。方法采用密度梯度离心法获取外周血单个核细胞,培养7天后,收集贴壁细胞并加入不同浓度黄芪注射液(0.2、2、20和200mg/ml)干预一定时间(6、12、24和48小时)。激光共聚焦显微镜鉴定人外周血EPCs,噻唑蓝比色试验(MTT法)检测黄芪对人外周血EPCs体外增殖作用,流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果黄芪明显促进人外周血EPCs的增殖,呈一定的量效时效关系;流式细胞仪分析表明,黄芪作用后,细胞周期中S期、G2/M期细胞比例增加,G0/G1期细胞相对比例减少(P<0.01)。结论黄芪对人外周血EPCs增殖有显著促进作用,其作用机制可能是通过促进DNA合成,增加进入S期细胞数目来实现的。     

蛞蝓提取物对肺癌细胞周期的影响

目的：了解蛞蝓提取物对肺癌细胞周期的影响。方法：用流式细胞仪分析蛞蝓提取物对A549细胞周期的影响。结果：蛞蝓提取物能使细胞的S期（DNA合成期）下降。结论：蛞蝓提取物可能通过诱导A549细胞周期阻滞从而发挥抗癌作用。     

固本化痰通脉方含药血清对大鼠血管平滑肌细胞增殖及细胞周期素D1的影响

目的：观察固本化痰通脉方对大鼠血管平滑肌细胞生长增殖、细胞周期及细胞周期素D1表达的影响，以探讨其作用机制。方法：血小板源生长因子BB（PDGF-BB）刺激体外培养的大鼠血管平滑肌细胞使其快速增殖生长，加入不同浓度的固本化痰通脉方含药血清作用一定时间后，通过MTT法测定其对血管平滑肌细胞生长的抑制率，流式细胞技术测定细胞周期及细胞周期素D1的表达。结果：固本化痰通脉方能明显抑制PDGF-BB刺激的血管平滑肌细胞增殖，还以浓度依赖方式减少S期细胞、阻滞细胞于G0／G1期，并下调细胞周期素D1的表达。结论：固本化痰通脉方能抑制血管平滑肌细胞的增殖生长，阻滞细胞周期的进行，因而可能具有抗动脉粥样硬化的作用，其作用机理可能与调控血管平滑肌细胞细胞周期素D1的活性有关。     

三物白散加味方影响肿瘤细胞周期实验研究

目的观察三物白散加味方对肿瘤细胞周期的影响。方法以三物白散加味方体外直接用药及含药血清加入人胃癌SGC-7901细胞中,观察对细胞周期影响;另制作S180荷瘤鼠肿瘤模型,观察用药后细胞周期变化。结果三物白散加味方直接用药及含药血清中、大剂量组能明显降低人胃癌SGC-7901细胞G0-G1期细胞,而使细胞阻滞于G2-M期,减少肿瘤细胞DNA合成,抑制其增殖。中、大剂量组灌注S180荷瘤鼠肿瘤模型后,影响S期向G2-M期转化,将肿瘤细胞阻滞在S期,抑制其增殖。结论本方通过影响细胞周期抑制肿瘤增殖。     

Seselin from Plumbago zeylanica inhibits phytohemagglutinin (PHA)-stimulated cell proliferation in human peripheral blood mononuclear cells

Effects of seselin (C(14)H(12)O(3); MW 228) identified from Plumbago zeylanica on phytohemagglutinin (PHA)-stimulated cell proliferation were studied in human peripheral blood mononuclear cells (PBMC). The data demonstrated that seselin inhibited PBMC proliferation-activated with PHA with an IC(50) of 53.87+/-0.74 microM. Cell viability test indicated that inhibitory effects of seselin on PBMC proliferation were not through direct cytotoxicity. The action mechanisms of seselin may involve the regulation of cell cycle progression, interleukin-2 (IL-2) and interferon-gamma (IFN-gamma) production in PBMC. Since cell cycle analysis indicated that seselin arrested the cell cycle progression of activated PBMC from the G(1) transition to the S phase. Seselin suppressed IL-2 and IFN-gamma production in a concentration-dependent manner. Furthermore, seselin significantly decreased the IL-2 and IFN-gamma gene expression in PHA-activated PBMC. Therefore, results elucidated for the first time that seselin is likely an immunomodulatory agent for PBMC.     

蜂毒素对人胃癌细胞株BGC-823凋亡及其细胞周期的影响

目的：观察蜂毒素体外对人胃癌细胞株BGC-823增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法：采用MTT法观察不同浓度的蜂毒素（32,16,8,4,2μg/mL）体外对人胃癌细胞株BGC-823增殖的影响,并用流式细胞仪检测其诱导的细胞凋亡和周期阻滞效应。结果：①与对照组比较,蜂毒素有抑制人胃癌细胞株BGC-823增殖的作用（P〈0.01）,随着药物浓度的增大,其对细胞的抑制率也明显增大,呈现剂量依赖性。②蜂毒素浓度从4μg/mL开始,即可诱导细胞产生凋亡,随着剂量的增加诱导凋亡的效果更加明显。③在细胞周期方面,与阴性对照比较,蜂毒素作用24小时后S期细胞比例上升,而G0/G1期比例明显下降,蜂毒素浓度达到16μg/mL时G0/G1期前出现明显的亚二倍体区。结论：蜂毒素对人胃癌细胞株BGC-823的增殖具有抑制作用,且能够引起该细胞的凋亡及改变其细胞周期。     

苦参碱对人结肠癌HT29细胞生长抑制作用的实验研究

目的研究苦参碱（matrine,MA）对人结肠癌HT29细胞系抑制和诱导凋亡的作用。方法分别采用MTT法检测细胞的生长抑制率,流式细胞仪、透射电镜观察MA处理HT29细胞后细胞周期阻滞和细胞凋亡的发生。结果2～32mg／mLMA均能抑制HT29细胞增殖（P〈0．05）,其抑制率与作用时间及浓度相关。4、8、16mg／mLMA处理HT29细胞后,G。／G,细胞明显高于阴性对照组（P〈0．05）,提示细胞周期停滞于G0／G1期。透射电镜可见,HT29细胞出现凋亡形态学改变。结论MA对HT29细胞有抑制作用,机制可能与阻滞细胞周期及诱导细胞凋亡有关。     

消斑通脉合剂对PDGF-BB诱导血管平滑肌细胞增殖的影响

[目的]观察中药复方消斑通脉合剂药物血清对体外培养的VSMCs细胞周期的作用。[方法]体外培养VSMCs,取对数生长期细胞用作实验,MTT法检测不同浓度药物血清对体外培养的VSMCs增殖活力;应用流式细胞仪分析各组细胞周期分布。[结果] MTT法显示药物血清呈剂量依赖性抑制VSMCs增值,高剂量与低剂量比较有统计学差异(P<0.05),流式细胞仪显示药物血清可明显阻滞VSMCs细胞进程,高剂量与低剂量比较有统计学差异(P<0.01)。[结论]中药复方消斑通脉合剂药物血清可以阻滞VSMCs的细胞周期进程,达到抑制VSMCs增殖的作用。     

重组葡萄球菌肠毒素A及其突变体蛋白促淋巴细胞增殖作用的研究

 目的 观察重组葡萄球菌肠毒素A（rSEA）及其突变体蛋白对淋巴细胞增殖、活化作用及对淋巴细胞亚群分群的影响。方法 分离健康人外周血单个核细胞（PBMC）及小鼠脾淋巴细胞悬液，体外经rSEA及其3种突变体（rSEA/H187A、rSEA/H225A和rSEA/D227A）蛋白刺激后，采用噻唑蓝法（MTT）检测人和小鼠脾淋巴细胞增殖水平，采用流式细胞术检测人外周血中T淋巴细胞亚群（CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺T细胞）及活化CD4⁺、CD8⁺ T细胞和自然杀伤细胞（NK）的含量。结果 5~20 mg·L^-1的rSEA及其3个突变体蛋白对人PBMC和小鼠脾淋巴细胞均有明显促增殖作用（P<0.05）；经rSEA、rSEA/H225A刺激后的人PBMC中，CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺T细胞的含量明显高于对照组，rSEA/H187A能上调CD3⁺和CD8⁺T细胞，而rSEA/D227A只上调CD8⁺T细胞（P<0.05）；rSEA及3种突变体蛋白均能上调活化CD4⁺和CD8⁺T细胞，rSEA、rSEA/H187A、rSEA/H225A能上调NK细胞含量（P<0.05）。结论 rSEA及其3种突变体（rSEA/H187A、rSEA/H225A和rSEA/D227A）蛋白对淋巴细胞均有明显促增殖和活化作用，并可不同程度地上调T淋巴细胞亚群CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺ 及NK细胞的含量，为筛选出低毒、高效的升白细胞相关药物候选突变体奠定基础。
     

5-FU联合人参黄芪复方对人胃癌MGC-803细胞生物学行为的影响

目的探讨中药人参黄芪复方联合5-氟尿嘧啶（5-Fu）,在体外对人胃癌MGC-803细胞的增殖、克隆、凋亡、迁移等生物学行为的影响。方法采用MTT方法检测细胞的增殖抑制率;并计算其中效浓度;流式细胞仪检测观察细胞的周期及凋亡;Giemsa染色检测细胞的克隆形成;细胞划痕实验检测药物对细胞迁移的抑制作用。结果人参黄芪复方和5-Fu均能抑制人胃癌MGC-803细胞生长,并随着药物浓度的增加而增强,5-Fu联合人参黄芪复方对细胞生长的抑制率明显高于单用人参黄芪复方或5-Fu组（P〈0．05）,并随着浓度的增加而增强;人参黄芪复方和5-Fu均能诱导胃癌细胞凋亡、抑制细胞克隆形成、阻滞细胞于G0／G1期、并抑制细胞迁移,而两药联用时细胞凋亡率、G0／G1期细胞均明显高于两药单用（P〈0．05）,并阻滞细胞于G0／G1期;人参黄芪复方与5-FU联合应用时细胞克隆形成、细胞迁移面积均明显低于两药单用（P〈0．05）,且联合用药的中效浓度小于两药单用时的中效浓度之和。结论人参黄芪复方和5-Fu联合应用与两药单用比较,能更好的抑制人胃癌MGC-803细胞增殖、抑制细胞克隆形成、促进细胞凋亡、阻滞细胞期于G0／G1期,并抑制细胞迁移。     

复方苦参注射液对泪腺腺样囊性癌ACC-2细胞增殖、凋亡及Caspase-3蛋白表达的影响

目的探讨复方苦参注射液对泪腺腺样囊性癌ACC-2细胞增殖、凋亡及Caspases-3蛋白表达的影响。方法体外培养人泪腺腺样囊性癌ACC-2细胞,应用MTT法检测细胞增殖;AnnexinV/PI双染色流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期;ELISA法检测Caspases-3蛋白表达。结果复方苦参注射液对ACC-2细胞的体外增殖具有抑制作用,量效关系显著,与对照组比较有统计学差异(P<0.01),半数抑制浓度(IC50)为0.84g/ml。经流式细胞仪检测表明,复方苦参注射液能使ACC-2细胞G0-G1期逐渐增加,G2-M期和S期逐渐减少,并且随着剂量的增加,ACC-2细胞凋亡率明显增加(P<0.05或P<0.01)。复方苦参注射液能增强ACC-2细胞Caspases-3蛋白的表达(P<0.05或P<0.01),并呈剂量依赖性。结论复方苦参注射液能有效抑制人泪腺腺样囊性癌ACC-2细胞Caspases-3蛋白表达,诱导ACC-2细胞凋亡,抑制肿瘤细胞增殖。     

气虚血瘀证（心肌缺血）大鼠模型单核细胞炎性因子表达的相关性探讨

目的：探讨气虚血瘀证与单核细胞（PBMC）的相关性及其可能的炎症机制。方法：复制心梗气虚血瘀证动物模型,采用半定量RT-PCR技术检测模型组及假手术组动物术后第7天、14天、28天外周血单核细胞TNFα、IL-1β、IL-6、MCP-1的表达情况。结果：不同时间点模型组动物单核细胞TNFα、IL-1β、IL-6、MCP-1的表达均高于假手术组动物（P〈0.05）。结论：气虚血瘀证（心肌缺血）与单核细胞密切相关,可能成为该证候重要的微观指标。     

健骨颗粒含药血清对成骨细胞增殖的影响

目的：探讨健骨颗粒含药血清对体外培养大鼠成骨细胞增殖的影响。方法：采用酶消化法培养SD大鼠成骨细胞,健骨颗粒含药血清干预,以生理盐水大鼠血清为对照,运用MTT法、流式细胞术检测成骨细胞增殖情况及细胞周期分布。结果：与同浓度生理盐水血清相比,20%健骨颗粒含药血清能明显促进体外培养成骨细胞增殖（P〈0.05）,明显降低G0/G1期细胞分数（P〈0.01或P〈0.05）,提高S期、G2/M期细胞分数和增殖指数（P〈0.01或P〈0.05）。结论：健骨颗粒含药血清能推进体外培养成骨细胞细胞周期,从而促进成骨细胞增殖。