Islet-1 在乙酰化调控网络中特异性辅助C3H10T1/2细胞向心肌样细胞分化

 目的 筛选并分析转染Islet-1慢病毒载体的C3H10T1/2细胞转化为心肌样细胞过程中与Islet-1 相互作用的组蛋白乙酰化酶（HATs）和组蛋白去乙酰化酶（HDACs）,明确Islet-1在C3H10T1/2细胞分化为心肌样细胞乙酰化调控网络中的关键枢纽作用。方法 培养转染Islet-1慢病毒载体的C3H10T1/2细胞,观察细胞形态。免疫荧光和免疫印迹检测Islet-1的表达部位和最高表达时间点。免疫共沉淀沉淀与Islet-1结合的蛋白。免疫印迹验证Islet-1 相互作用的HATs和HDACs。结果 诱导组细胞形态出现心肌样细胞改变。各组Islet-1主要在胞浆表达。诱导组Islet-1表达量在诱导后3周最高（0.782±0.015）。诱导组Islet-1表达量显著高于空白对照组和C3H10组（分别为0.819±0.026,0.127±0.006和0.126±0.001）（P<0.05）,免疫共沉淀技术可行。与Islet-1相互作用的HATs和HDACs有GCN5、P300/CBP和HDAC4。结论 Islet-1 与GCN5、P300/CBP和HDAC4相互作用特异性辅助C3H10T1/2细胞向心肌样细胞分化。     

幽门螺杆菌清除前后胃粘膜增殖状态的变化

本研究以流式细胞技术对幽门螺杆菌（ＨＰ）阳性和阴性患者胃粘膜细胞周期进行对比分析，并通过银染技术对ＨＰ清除前后胃粘膜细胞核仁组成区嗜银蛋白（ＡｇＮＯＲｓ）的变化进行随访观察。结果表明，ＨＰ阳性胃粘膜Ｓ期细胞比率和增殖指数均显著高于ＨＰ阴性胃粘膜，ＡｇＮＯＲｓ数量与胃粘膜增殖指数呈显著正相关。经治疗ＨＰ转阴者其胃粘膜细胞ＡｇＮＯＲｓ数量显著下降（Ｐ＜０．０１），而ＨＰ仍为阳性者ＡｓＮＯＲｓ数量则无显著变化（Ｐ＞０．０５）。ＨＰ清除后胃粘膜炎症明显好转。结果提示ＨＰ感染的胃粘膜处于高增殖状态，ＨＰ感染可能通过刺激胃粘膜细胞的增殖加速，从而增加患胃癌的危险性。     

Islet-1诱导C3H10T1/2细胞向心肌样细胞分化过程中对心肌特异蛋白基因上组蛋白乙酰化的促进作用

目的研究Islet-1诱导C3H10T1/2细胞定向分化为心肌样细胞过程中表达增加的心肌特异蛋白基因GATA4、NKX2.5、MEF2c上组蛋白乙酰化水平的变化情况。方法 Islet-1基因慢病毒感染小鼠骨髓间充质干细胞C3H10,Western blot检测转染后乙酰化的组蛋白H3表达情况,逆转录及实时荧光定量PCR时序性检测出心肌特异性蛋白基因GATA4、NKX2.5、MEF2c的mRNA表达达高峰的时间点,采用染色质免疫共沉淀技术(chromatin immunoprecipitation,CHIP),用CHIP级乙酰化H3抗体免疫沉淀与其所结合的DNA,采用实时荧光定量PCR扩增抗体所富集的心肌特异性蛋白基因GATA4、NKX2.5、MEF2c启动子区域的DNA量,比较感染组和未感染组与抗体所结合的上述3种心肌特异蛋白基因的表达情况。结果感染高表达Islet-1的C3H10T1/2细胞组蛋白H3的乙酰化水平较未感染组升高3.04倍(P<0.05),在心肌特异性蛋白基因GATA4、NKX2.5、MEF2C的mRNA表达达高峰的2周时间点,乙酰化的H3抗体所结合的心肌特异性蛋白基因GATA4、NKX2.5、MEF2c与未转染Islet-1的细胞组相比较,表达增加(P<0.05)。结论高表达Is-let-1之后C3H10T1/2细胞定向分化为心肌样细胞过程中表达增加的心肌特异蛋白基因上组蛋白乙酰化水平增高。     

胃癌微卫星不稳定性和抑癌基因杂合缺失

目的研究微卫星不稳和抑癌基因缺失在胃癌发生中的作用．方法采用ＰＣＲ为基础的方法,检测了５３例胃癌中６个微卫星标记突变及ＡＰＣ／ＭＣＣ和ＤＣＣ基因杂合缺失（ＬＯＨ）．结果胃癌微卫星不稳的检出率为３２１％（１７／５３）．７例（１３２％）为微卫星高频率不稳（３个以上微卫星标志）,１０例（１８９％）为微卫星低频率不稳（１或２个微卫星标记）．肠型胃癌微卫星高频率不稳的发生率（２５０％）显著高于弥漫型胃癌（３４％）（Ｐ＜００５）．高频率不稳组未发现有ＡＰＣ,ＭＣＣ和ＤＣＣ基因ＬＯＨ,微卫星高频率不稳与ＡＰＣ／ＭＣＣ和ＤＣＣ基因ＬＯＨ呈负相关．结论微卫星不稳在部分胃癌,特别是肠型胃癌早期发生中起重要作用,高频率不稳胃癌与遗传性非息肉大肠癌有共同的特点．与此相反,低频率不稳和无不稳胃癌可能通过ＬＯＨ病理途径发生     

2.54 NO/cGMP信号转导途径对大鼠胃电节律的作用

目的探讨NO/cGMP信号转导途径对大鼠胃电慢波节律的影响.方法计算机采集并分析大鼠胃电信号,分别观察硝普钠(SNP)、亚甲兰(MB) 、zaprinast单独以及SNP分别与MB,zaprinast联合应用对大鼠胃电节律的影响;并以不同浓度SNP刺激大鼠胃平滑肌条,放免法测定cGMP含量.结果 SNP组、zaprinast组、SNP+zaprinast组出现明显胃电节律失常,慢波异常节律指数(ARI)和慢波频率变异系数(CV)明显高于正常对照组(P＜0.01);SNP可使胃平滑肌cGMP含量呈浓度依赖性升高.结论 NO、cGMP升高与胃电节律失常发生有关,一氧化氮通过NO/cGMP信号转导系统调控胃电节律.     

胃肠道粘膜下肿瘤端粒酶表达的意义

目的探讨胃肠道粘膜下肿瘤端粒酶活性表达的意义．方法采用ＴＲＡＰ法检测６例胃肠道粘膜下肿瘤（５例恶性淋巴瘤，１例平滑肌瘤）的端粒酶活性，同时对恶性肿瘤端粒酶提取物进行梯度稀释，以检测其活性大小．结果恶性淋巴瘤中５例中有４例端粒酶阳性，１例平滑肌瘤亦为阳性，６例瘤（癌）旁组织中，端粒酶２例阳性，余均为阴性．结论端粒酶不仅在胃肠道粘膜下恶性肿瘤表达，而且在胃肠道粘膜下良性肿瘤中亦可有阳性表达     

胃癌组织P~（53）蛋白产物的表达与病人预后的关系

采用免疫组化方法对Ｐ￣（５３）蛋白的表达进行观察。结果表明：胃癌组织Ｐ￣（５３）蛋白染色阳性率为３６．５％，肿瘤大于５ｃｍ组、有淋巴结转移和浆膜侵犯及Ⅲ、Ⅳ期胃癌组织Ｐ￣（５３）蛋白染色阳性率分别显著高干肿瘤小于５ｃｍ、无淋巴结转移和浆膜侵犯及Ⅰ、Ⅱ期胃癌组（Ｐ＜０．０１）。Ｐ￣（５３）染色阳性者５年存活率为２１．１％，染色阴性者为５０．０％，两组５年存活率差非常显著（Ｐ＜０．０１）。以上结果提示检测胃癌组织Ｐ￣（５３）蛋白有助于判断胃癌患者预后。     

Telomerase Activity in Human Hepatocellular Carcinoma

Ｒｅｃｅｎｔｌｙ，ｉｔｈａｓｂｅｅｎｒｅｐｏｒｔｅｄｔｈａｔｔｅｌｏｍｅｒａｓｅｉｓｅｘｐｒｅｓｓｅｄｉｎｍｏｓｔｈｕｍａｎｃａｎｃｅｒｓ，ｂｕｔｉｓｉｎａｃｔｉｖｅｉｎａｄｕｌｔｓｏｍａｔｉｃｃｅｌｓ，ｅｘｃｅｐｔｆｏｒｇｅｒｍｃｅｌｓａｎｄｓｔｅ...     

原发性肝癌P~（53）基因249编码区点突变的研究

原发性肝癌Ｐ~（５３）基因２４９编码区点突变的研究ＳｔｕｄｙｏｆｔｈｅＰ~（５３）ｇｅｎｅｍｕｔａｔｉｏｎａｔｃｏｄｏｎ２４９ｉｎｐｒｉｍａｒｙｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏｍａ肖文华，刘为纹，罗元辉，鲁荣（第三军医大学西南医院消化内科）６...