乙型肝炎病毒基因型、YMDD变异与拉米夫定治疗后HBV DNA反弹关系的研究

目的探讨HBV基因型、YMDD变异与拉米夫定抗病毒治疗后HBV DNA反弹的关系。方法应用多引物对巢式PCR法、PCR-序列分析法检测拉米夫定治疗的27例乙型肝炎患者和19例从未用过抗病毒治疗的患者HBV基因型和P区（YMDD）的突变位点。结果在27例HBV DNA反弹的患者中，13例（48．15％）检出YMDD变异，而对照人群无YMDD变异（P〈0．05）。YMDD变异的位点为rtM204V／I（C区）±rtL180M（B区）；在治疗组YMDD变异的患者中，B、C基因型构成比（46．15％和59．26％）与对照组（53．85％和68．42％）比较无显著性差异（P〉0．05）。结论YMDD变异是拉米夫定治疗后出现耐药导致HBV DNA反弹的主要原因；YMDD变异的常见位点依然为rtM204V／I（C区）±rtL180M（B区）；YMDD变异在B、C基因型病人中无差别。     

TGF-β1、TNF-α及IL-6与肝纤维化的关系

将 79例慢乙肝及乙肝肝硬化患者按肝组织纤维化程度分期 ,应用双抗体夹心法检测其血清TGF β1、TNF α及IL 6水平。结果显示 ,血清TGF β1、TNF α及IL 6水平在肝纤维化S2、S3、S4期比正常对照组明显升高 (P <0 0 0 1) ,且随着纤维化程度的加重而不断升高。血清TGF β1、TNF α及IL 6水平与血清HA、HPCIII、LN及IV C水平呈低～中度的正相关 (P <0 0 0 1) ,与肝组织纤维化程度计分呈中～高度的正相关 (P <0 0 0 1)。血清TGF β1、TNF α及IL 6水平彼此之间有中～高度的正相关 (P <0 0 0 1)。表明血清TGF β1、TNF α及IL 6水平与肝纤维化程度密切相关 ,TGF β1、TNF α及IL 6参与了肝纤维化的形成和发展。     

乙型肝炎病毒前C区变异与慢性乙型肝炎病理改变的相关性

目的 探讨慢性乙型肝炎中乙型肝炎病毒（HBV）前C区1896突变与肝组织病理的关系。方法 对173例慢性乙型肝炎患者进行肝活检,观察肝组织病理分级（G）和分期（S）情况,同时检测乙型肝炎病毒的e系统状态和HBV前c区1896阳性患者（20％）;随着肝组织炎症活动度和纤维化程度的进展,变异株检出率似乎有增加趋势,但无统计学意义（P＝0．98和P=0．052)。结论 HBV前C区变异在HBeAg阴性组高于HBeAg阳性组;未发现HBV前C1896变异与慢性乙型肝炎的炎症分级和纤维化分期有相关关系。     

α干扰素治疗慢性乙型肝炎肝纤维化血清标记与病理评价

目的评价干扰素α(IFN)的抗肝纤维化作用及其抗病毒疗效的关系。方法干扰素α治疗36例慢性乙型肝炎患者,对照组用常规方法治疗,治疗前后检测血清肝纤维化指标HA、PC-Ⅲ、Ⅳ-C、LN以及TGF-β1,B超引导下肝穿作组织学炎症活动度和纤维化程度的评分比较。结果IFN组治疗后HA、PC-Ⅲ、Ⅳ-C、LN和TGF-β1均较治疗前明显降低(P＜0.01),与对照组治疗后相比较,HA、PC-Ⅲ和TGF-β1明显降低(P＜0.05)。IFN组治疗后组织学炎症活动度评分为(9.3±3.2)分降至(6.2±2.1)分,肝纤维化程度评分由(7.5±2.2)分降至(5.1±1.8)分(P值均＜0.05)。结论肝纤维化程度的改善与毒抗病毒疗效密切相关,α干扰素对慢性乙型肝炎肝纤维化有较好疗效。     

海口地区胃十二指肠疾病患者幽门螺杆菌vacA基因亚型分析

目的 探讨幽门螺杆菌(H.pylori)vacA基因亚型在海口地区胃十二指肠疾病患者中的分布.方法 从176例胃十二指肠疾病患者胃黏膜标本中分离培养H.pylori,PCR法测定vacA基因亚型.结果 176例患者中的基因型vacAs1 78.98%(139/176),vacAs2 15.34%(27/176),vacAm1 28.41%(50/176),vacAm2 71.59%(126/176);vacA亚型组合形式为:vacAs1/ml 28.41%(50/176),vacAs1/m2 56.25%(99/176),vacAs2/m2 15.34%(27/176),未发现va-cAs2/ml型菌株;消化性溃疡、胃癌、慢性萎缩性胃炎患者H.pylori的vacAs1、vacAm2、vacAs1/m2基因型阳性率高于慢性浅表性胃炎患者(均P<0.01),其余基因型在不同类型疾病中的分布无统计学差异(P>0.05).结论 海口地区胃十二指肠疾病患者H.pylori菌株的优势基因型为vacAs1、vacAm2、vacAs1/m2;在消化性溃疡等严重疾病患者中多见.     

新生儿股静脉穿刺方法的改进

从2002年起我们对传统的新生儿股静脉穿刺法进行了改进，效果满意。现介绍如下。     

慢性乙型肝炎血清透明质酸和抗-HBe与肝组织病理的相关性

目的： 探讨慢性乙型肝炎血清透明质酸（ Ｈ Ａ） 和抗 Ｈ Ｂｅ 与肝组织病理改变的关系。方法：对１７０ 例慢性乙型肝炎患者进行肝活检,观察肝组织病理分级（ Ｇ） 和分期（ Ｓ） 情况,同时检测 Ｈ Ａ 及肝炎病毒标志物。结果：①血清 Ｈ Ａ 与肝组织病理分级和分期关系密切,随着病理分级和分期的升高, Ｈ Ａ 也逐渐升高, Ｇ４ 、 Ｓ４ 的血清 Ｈ Ａ 分别比 Ｇ１ 、 Ｓ１ 显著升高（ Ｐ ＜ ０００１） 。②肝组织病理分级、分期与血清抗 Ｈ Ｂｅ 的出现情况也密切相关, Ｇ４ 、 Ｓ４ 的抗 Ｈ Ｂｅ 阳性率分别比 Ｇ１ 、 Ｓ１ 显著升高（ Ｐ ＜ ００５） ;③抗 Ｈ Ｂｅ 阳性者中 Ｈ Ａ 值显著高于抗 Ｈ Ｂｅ 阴性病人（ Ｐ ＜ ０００１） 。结论： Ｈ Ａ 与抗 Ｈ Ｂｅ 有一定的相关性,在 Ｈ Ａ 显著升高或／ 和抗 Ｈ Ｂｅ 阳性的慢性乙型肝炎病人中,其肝组织的炎症、坏死及肝纤维化的程度较严重。     

肝细胞癌患者和献血员中庚型肝炎病毒感染检测分析

调查庚型肝炎病毒在肝细胞癌患者中的感染情况,方法采用蛋白酶Ｋ裂解法提取血清中ＨＧＶＲＮＡ,逆转录为ｃＤＮＡ后进行巢式聚合酶链反应,获得２３８ｂｐ的特异性片段者为阳性结果。用此技术对１４５例ＨＣＣ患者、６９例献血员和３０４例体检者血清进行了检测分析。     

MXA蛋白抑制HBV复制的体外研究

目的研究MXA蛋白抑制HBV复制的活性。方法将pcDNA3．1-MXA重组质粒和PU19-1．24HBV重组质粒分别按1：1、2：1共转染HepG2细胞（MXA组），对照组使用空pcDNA3．1、Salon DNA和PU19-1．24HBV重组质粒共转染，3d后Western blot检测MXA蛋白表达，Abbott法检测细胞上清HBeAg和HBsAg分泌量，定量PCR检测上清和胞内HBV DNA水平，统计学分析结果。pcDNA3．1-MXA与PU19-1．24HBV重组质粒共转染HepG2细胞，对照组为pcDNA3．1-MXA重组质粒、PU19空质粒和Salon DNA共转染．3d后裂解细胞Western blot检测MXA蛋白表达。结果Western blot显示MXA组有MXA蛋白表达：与对照组相比，pcDNA3．1-MXA和PU19—1．24HBV重组质粒按1：1转染时，MXA组HBeAg下降27％．上清HBV DNA和细胞内HBV DNA分别下降1个log值和0．6个log值；按2：1比例转染时MXA组HBeAg较对照组下降66％，上清HBV DNA和细胞内HBV DNA水平分别下降1．9个和1．7个log值，差异均具有统计学意义（P〈0．05）。Western blot检测显示MXA蛋白抑制HBV组与对照组MXA蛋白表达没有明显差别。结论MXA蛋白在HepG2细胞具有抑制HBV复制活性，抑制活性与蛋白的表达量相关；在抑制HBV复制过程中MXA蛋白自身可能不发生降解。