频复发性肾病核转录因子κB活性改变的临床意义

目的探讨频复发性肾病(FRNS)核转录因子κB(NF-κB)活性改变的临床意义.方法 2000-09～2004-12以温州中医院和温州医学院附属二院的FRNS复发期患者30例作为观察A组,FRNS缓解期患者30例作为观察B组;选取正常体检者30名作为对照组.对照组和观察组分别于治疗前及治疗8周后抽取静脉血,分离中性粒细胞,提取核蛋白,以电泳迁移率测定NF-κB活性变化.结果 FRNS复发期患者中性粒细胞NF-κB已被激活,FRNS缓解期患者中性粒细胞NF-κB活性下降,二者差异有显著性P＜0.01,复发期和缓解期患者与正常体检者相比,差异均有显著性P＜0.01,FRNS患者NF-κB活性和复发程度呈正相关.结论 FRNS复发过程可激活中性粒细胞NF-κB,在中性粒细胞介导的FRNS复发中起重要作用;NF-κB活性高低可反映FRNS患者的复发趋势,其活性越高复发程度越高.     

新肾病1号方调控miR-199b-5p抑制肾小管上皮间充质转化改善肾纤维化的作用研究

目的 研究miR-199b-5p在新肾病1号方抗肾纤维化中的作用。方法 36只大鼠随机分为假手术组、模型组及新肾病1号方低、中、高剂量（9.69、19.38、38.76 g/kg）组和氯沙坦（50 mg/kg）组,每组6只。除假手术组外,其余各组采用左侧单侧输尿管梗阻方法建立大鼠肾纤维化模型,给予药物干预14 d后,检测各组大鼠肾功能;苏木素-伊红（HE）和Masson染色观察肾脏组织病理变化;对假手术组、模型组和新肾病1号方高剂量组大鼠肾脏组织进行miRNA测序,筛选差异表达miRNAs,qRT-PCR验证,并进行靶基因的基因本体（gene ontology,GO）功能及京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG）通路富集分析,生物信息学分析miRNAs与上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）、肾纤维化的关联性。免疫荧光法和Western blotting检测肾组织EMT相关蛋白表达情况。结果 与模型组比较,新肾病1号方组大鼠血清肌酐（serum creatin...     

糖肾I号对早期糖尿病肾病大鼠的干预及对P27表达的影响

目的：观察糖肾I号方对早期糖尿病肾病大鼠的干预作用及对周期蛋白P27表达的影响,分析其可能的作用机制。方法：通过单侧肾切除合并注射链脲佐菌素（STZ）建立早期糖尿病肾病大鼠模型,随机分为假手术组（S0）、模型对照组（M）、糖肾I号组（TS）、洛汀新组（B）、糖洛合组（TS＋B）,共5组,各10只。模型成功后给予不同的干预,共8周,末次给药12小时后,采集尿液、血液标本检测,组织行免疫组化检测,观察各组大鼠的肾重、肾脏肥大指数、肌酐,尿素氮等生化指标及P27蛋白表达的变化。结果：与模型组比较,糖肾工号治疗组肾重、肾脏肥大指数明显下降,血清Scr、BUN显著降低,P27表达明显下调（P〈0．05）。与洛汀新组比较,无明显差异,治疗组比较,以糖洛合组疗效最好。结论：糖肾工号疗效确切,其作用机制可能部分通过下调P27的表达抑制肾脏肥大,从而发挥肾脏保护作用,与洛汀新合用在改善肾功能方面具有协同作用。     

温莪术对单侧输尿管梗阻大鼠的肾保护作用

肾脏纤维化以肾小管间质纤维化和肾小球硬化为特征,是慢性肾脏疾病的最终表现[1],也是肾脏疾病进展的主要的推动力[2-3].现代医学对于肾间质纤维化的治疗措施十分有限,近年来,中医药防治肾纤维化的优势逐渐凸显,成为医学界研究的热点.笔者通过实验研究,证实中药温莪术可延缓单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化,减少尿N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷酶(NAG)和尿蛋白含量,从而起到肾保护作用.     

温莪术对TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞转分化的影响

目的探讨温莪术对转化生长因子-β1（transforming growthfactor-β1,TGF-β1）诱导的肾小管上皮细胞转分化（epithelial-myofibroblast transdifferentiation,EMT）拮抗作用。方法将体外培养的正常肾小管上皮细胞随机分为6组：正常对照组（C组）、TGF-β1诱导模型组（T组）、温莪术低浓度组（E．组）、温莪术中浓度组（E：组）、温莪术高浓度组（E3组）、盐酸贝那普利组（Y组）,除C组外,各组TGF-β1,诱导24h后,温莪术各剂量组及Y组加入药物作用48h。运用倒置显微镜观察细胞形态的改变,细胞免疫荧光法、RT—PCR法及ELISA法检测各组NRK-52E细胞EMT过程中细胞骨架成分β-肌动蛋白（β-actin）的分布,仅．平滑肌肌动蛋白（α—Smooth muscleactin,α-SMA）mRNA、E钙黏蛋白（E—cadherin,E—cad）mRNA表达,纤维粘连蛋白（fibronectin,FN）浓度。结果TGF-β．诱导3天后,T组细胞出现肥大、拉长,呈梭形,细胞骨架结构β-actin表达增多（P〈0．05）,胞浆内出现束状纤维样结构,细胞内α-SMAmRNA表达显著上调（P〈0．05）,E-cadmRNA表达降低（P〈0．05）,细胞上清液中FN浓度升高（P〈0．05）。与T组比较,E1-3组细胞仅见部分呈成纤维样改变,伴随胞浆内β-actin表达及FN浓度的降低（P〈0．05）,E2—3组细胞内仅．SMAmRNA表达升高（P〈0．05）,E-cadmRNA表达减少（P〈0．05）,但E,组E-cad及OL-SMAmRNA表达量与之比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。与E1组比较,E2-3组胞浆内β-actin蛋白表达及FN浓度降低（P〈0．05）,E3组细胞内E3-cadmRNA表达升高伴α-SMAmRNA表达降低（P〈0．05）。与Y组比较,E1组细胞浆内13-actinmRNA及细胞上清液中FN浓度均升高（P〈0．05）,E3组β—actin表达升高（P〈0．05）,E—cadmRNA表达降低（P〈0．05）,E1-3α-SMAmRNA表达量则差异无统计学意义（P〉0．05）。结论温莪术可抑制TGF-β,诱导的EMT发生,可作为临床治疗慢性肾功能不全的有效药物之一。     

浅谈程锦国主任医师从慢惊风论治小儿抽动障碍

儿童抽动障碍因其症状特点常就诊于眼科。程锦国主任医师认为儿童抽动障碍尤其是慢性抽动障碍、抽动秽语综合征与小儿“慢惊风”之病因病机一致，二者均以土虚木乘，脾虚肝旺为基本病机，生痰动风为主要病理表现，惊风、抽搐为具体体现形式。同时程锦国主任医师认为在治法和方药方面亦有可借鉴治疗慢惊风之经验，或自制疏肝健脾、化痰熄风方；或视病机之不同灵活组方，累获良效。现结合医案总结了儿童抽动障碍的临床特点及程锦国主任医师治疗本病的经验。     

加减补阳还五汤对膜性肾病大鼠Podocin、Nephrin 的影响

目的:探讨加减补阳还五汤对膜性肾病(MN)大鼠的治疗效果及可能的作用机制。方法:将雄性SD大鼠36只随机分为正常组、模型组、盐酸贝那普利组、加减补阳还五汤高、中、低剂量组(中药高、中、低剂量组),每组6只。正常组大鼠按6 mL/kg的剂量尾静脉注射生理盐水,其余5组按等剂量注射抗近端小管刷状缘抗原(Anti-Fx1A)构建MN模型。模型制备成功后,正常组、模型组每天给予10 mL/kg 0.9%的氯化钠注射液灌胃,盐酸贝那普利组每天按1.60 mg/kg的剂量给予0.16 mg/mL的盐酸贝那普利药液,中药高、中、低剂量组分别予以7.04、3.52、1.76 g/mL的中药浓缩液灌胃。分别于模型制备前、模型制备成功后、给药后第7、14、28天留取各组大鼠24 h尿液,检测24 h尿蛋白(24 hUP)。给药28天后处死大鼠,心脏取血,检测血中白蛋白(Alb)、胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、血肌酐(SCr)和尿素氮(BUN)水平,取肾脏组织行苏木精-伊红染色(HE染色)、马松三色染色(Masson染色)、过碘酸六胺银染色(PASM染色),光学显微镜下观察肾脏组织病理改变;免疫荧光检测免疫球蛋白G(IgG)和补体C3在肾小球的阳性表达;免疫组织化学法观察足细胞裂孔膜蛋白Podocin在肾小球的阳性表达情况;RT-PCR检测足细胞裂孔膜蛋白Podocin、Nephrin mRNA表达量。结果:与正常组比较,模型组大鼠24 hUP增多(P0.05),肾小球基底膜上皮下免疫复合物形成,IgG、C3表达增多,肾组织Podocin蛋白及Podocin、Nephrin mRNA表达下降(P0.01)。与模型组比较,4个给药组大鼠治疗28 d后24 hUP降低(P0.05);上皮下免疫复合物形成减少,IgG、C3表达下降;肾组织Podocin、Nephrin mRNA表达升高(P0.01);Podocin蛋白表达升高,但仅中药高剂量组差异有统计学意义(P0.05)。与盐酸贝那普利组比较,中药低、中剂量组大鼠给药28 d后24 hUP及肾组织Podocin蛋白表达差异均无统计学意义;中药低剂量组Podocin、Nephrin mRNA表达较低(P0.01);中剂量组Nephrin mRNA的表达较低(P0.05),Podocin mRNA的表达下降,但差异无统计学意义;中药高剂量组大鼠给药28 d后24 hUP降低,上皮下免疫复合物形成减少,IgG、C3表达下降,Podocin蛋白及Podocin、Nephrin mRNA表达增多,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。各组大鼠血Alb、TG、TC、SCr、BUN差异均无统计学意义。结论:加减补阳还五汤能够降低MN大鼠的24 hUP,且高剂量效果最佳,其治疗MN的作用机制可能是上调Podocin、Nephrin mRNA的表达,减少免疫复合物的形成。     

益气养阴方治疗气阴两虚型 IgA 肾病临床研究

目的:观察益气养阴方治疗气阴两虚型IgA肾病的临床疗效。方法:将50例IgA肾病患者随机分为对照组和治疗组各25例。对照组采用西医常规治疗,治疗组在此基础上加服益气养阴方水煎剂治疗,2组连续治疗12周。观察2组患者治疗前后中医症候积分、肾功能、尿红细胞计数、24 h尿蛋白定量的变化及安全性指标,并评估治疗效果。结果:治疗前,2组间血肌酐(SCr)、24 h尿蛋白定量及尿红细胞计数比较,差异无统计学意义(P 0.05);治疗后,2组24 h尿蛋白定量及尿红细胞计数均较治疗前下降(P 0.05),且治疗组24 h尿蛋白定量及尿红细胞计数均低于对照组(P 0.05);2组SCr均较治疗前无明显变化,差异无统计学意义(P 0.05),2组SCr比较,差异无统计学意义(P 0.05)。治疗前,2组各项中医证候积分比较,差异无统计学意义(P 0.05)。治疗后,2组各项中医症候积分均较治疗前下降(P 0.05),且治疗组低于对照组(P 0.05)。治疗组总有效率为88.0%,对照组为64.0%,2组比较,差异有统计学意义(P 0.05)。结论:益气养阴方可有效降低气阴两虚型IgA肾病患者中医症状评分、尿红细胞计数、蛋白尿,可有效改善临床症状。     

程锦国主任医师运用小清汤治疗慢性肾脏病经验

慢性肾脏病在整体上表现为肺、脾、肾虚损,另一方面在病理上又表现为水湿,湿热,瘀血、痰浊与湿浊互结,其中湿热与肾脏病关系密切,程锦国治疗慢性肾病经验丰富,自创小清汤疗效显著,每以小清之力达祛邪扶正之目的。     

温莪术对单侧输尿管梗阻大鼠TGF-β1、α-SMA、COLⅠ表达的影响

目的:观察温莪术对肾间质纤维化大鼠肾脏的保护作用及对TGF-β1、α-SMA、COLⅠ表达的影响,探讨温莪术肾脏保护作用的机制.方法:取SPF级雄性3个月龄SD大鼠,采用UUO模型,随机分为4组:假手术组(SO组),模型组(M组),莪术组(E组),氯沙坦组(L组).于术后第7、14、21天时各组随机处死6只大鼠,取左侧肾组织,免疫组织化学法(IHC)检测肾组织中TGF-β1、α-SMA、COL工的表达情况.结果:各时相点模型组、莪术组、氯沙坦组大鼠的肾脏TGF-β1、α-SMA、COL Ⅰ表达均明显增多,而且模型组三者的表达高于莪术组、氯沙坦组(P＜0.05),莪术组与氯沙坦组比较无明显差异.结论:温莪术可以延缓肾间质纤维化的进展,其作用机制是通过抑制TGF-β1表达,下调α-SMA的表达,抑制成纤维细胞活性和COLⅠ的合成,抑制EMT和ECM的积聚.