温莪术对TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞转分化的影响

目的探讨温莪术对转化生长因子-β1（transforming growthfactor-β1，TGF-β1）诱导的肾小管上皮细胞转分化（epithelial-myofibroblast transdifferentiation，EMT）拮抗作用。方法将体外培养的正常肾小管上皮细胞随机分为6组：正常对照组（C组）、TGF-β1诱导模型组（T组）、温莪术低浓度组（E．组）、温莪术中浓度组（E：组）、温莪术高浓度组（E3组）、盐酸贝那普利组（Y组），除C组外，各组TGF-β1，诱导24h后，温莪术各剂量组及Y组加入药物作用48h。运用倒置显微镜观察细胞形态的改变，细胞免疫荧光法、RT—PCR法及ELISA法检测各组NRK-52E细胞EMT过程中细胞骨架成分β-肌动蛋白（β-actin）的分布，仅．平滑肌肌动蛋白（α—Smooth muscleactin，α-SMA）mRNA、E钙黏蛋白（E—cadherin，E—cad）mRNA表达，纤维粘连蛋白（fibronectin，FN）浓度。结果TGF-β．诱导3天后，T组细胞出现肥大、拉长，呈梭形，细胞骨架结构β-actin表达增多（P〈0．05），胞浆内出现束状纤维样结构，细胞内α-SMAmRNA表达显著上调（P〈0．05），E-cadmRNA表达降低（P〈0．05），细胞上清液中FN浓度升高（P〈0．05）。与T组比较，E1-3组细胞仅见部分呈成纤维样改变，伴随胞浆内β-actin表达及FN浓度的降低（P〈0．05），E2—3组细胞内仅．SMAmRNA表达升高（P〈0．05），E-cadmRNA表达减少（P〈0．05），但E，组E-cad及OL-SMAmRNA表达量与之比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。与E1组比较，E2-3组胞浆内β-actin蛋白表达及FN浓度降低（P〈0．05），E3组细胞内E3-cadmRNA表达升高伴α-SMAmRNA表达降低（P〈0．05）。与Y组比较，E1组细胞浆内13-actinmRNA及细胞上清液中FN浓度均升高（P〈0．05），E3组β—actin表达升高（P〈0．05），E—cadmRNA表达降低（P〈0．05），E1-3α-SMAmRNA表达量则差异无统计学意义（P〉0．05）。结论温莪术可抑制TGF-β，诱导的EMT发生，可作为临床治疗慢性肾功能不全的有效药物之一。