RP-HPLC法测定大鼠血浆中DHX-11的浓度

目的建立测定大鼠血浆中10-O-[4-(1-乙酰基-5-苯基-4,5-二氢吡唑-3-基)苯基]-(10S)-二氢青蒿素(10-O-[4-[1-acetyl-5-phenyl-4,5-dihydropyrazol-3-yl]phenyl]-(10S)-dihydroartemisinin,DHX-11)的高效液相色谱方法,并应用于DHX-11的药物动力学研究。方法采用反相色谱柱(200mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水(体积比为90∶10),流速为1 mL.min-1,检测波长为294nm,内标为大黄酚,以液液萃取法处理血浆。结果 DHX-11血浆浓度在0.022～1.120 mg.L-1内线性关系良好(r>0.996 0),定量下限为0.022 mg.L-1,日内、日间精密度(以相对标准偏差表示)不大于13.3%,低、中、高质量浓度(0.0448、0.224、0.896 mg.L-1)质控样品回收率分别为92.7%、91.1%、85.7%。大鼠灌胃给药血药浓度-时间数据经DAS2.0药动学软件处理,主要药动学参数为:t1/2:(1.922±0.632)h;CL/F:(104.673±31.629)L.h-.1kg-1;AUC0-t:(3 778.6±1 031.4)μg.h.L-1;AUC0-∞:(3 879.3±1 010.7)μg.h.L-1。结论该方法可作为大鼠血浆中DHX-11浓度的测定方法,为探讨DHX-11的药动学行为提供了方法依据。     

液质联用法测定人血浆中米格列奈的浓度

目的建立LC-MS/MS法测定人血浆中米格列奈的浓度,并研究其在健康男性受试者体内的药动学。方法血浆经液-液萃取。色谱柱:Agilent TC-C18柱,流动相:乙腈-水-甲酸(体积比为70.0∶30.0∶0.3),质谱检测采用多反应监测模式(multiple reaction monitoring,MRM),电喷雾离子源,分析时间:2.0 min。结果米格列奈线性为5.0～4 000.0μg.L-1,定量下限为5.0μg.L-1。日内、日间精密度(relative standard deviation,RSD)均不大于10.5%,准确度(relative error,RE)为-0.8%～-2.0%。健康男性受试者口服含米格列奈10 mg的受试制剂(规格:10 mg/片)和参比制剂(规格:5 mg/片)后主要药动学参数为:tmax分别为(0.375±0.079)和(0.396±0.166)h,ρmax分别为(887±292)和(902±298)μg.L-1,t1/2分别为(1.37±0.45)和(1.49±0.57)h,AUC0-t分别为(1047±379)和(1 067±430)μg.h.L-1,AUC0-∞分别为(1 070±394)和(1 092±433)μg.h.L-1。结论该法适用于米格列奈的药动学及生物等效性研究。     

HPLC法测定人血浆中丁咯地尔的质量浓度

目的建立测定人血浆中丁咯地尔质量浓度的HPLC法,并应用该法研究盐酸丁咯地尔片在健康人体内的药动学。方法色谱柱为Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-50mmol.L-1磷酸二氢铵缓冲液-三乙胺(体积比25∶75∶0.05),检测波长为275 nm,内标为乌拉地尔。结果丁咯地尔质量浓度线性范围为20μg.L-1～6.000 mg.L-1,回归方程为Y=0.260 5ρ-0.904×10-3,r=0.999 5,提取回收率大于87%,日内和日间RSD均小于7%。18例健康志愿者分别经口给予盐酸丁咯地尔的受试制剂和参比制剂300 mg后,血浆中丁咯地尔的tmax分别为(1.56±1.26)和(1.19±0.84)h,ρmax分别为(2.458±0.887)和(2.595±0.725)mg.L-1,t1/2分别为(4.88±1.25)和(4.96±1.42)h,AUC0-24分别为(16.275±5.931)和(16.040±5.831)mg.h.L-1,AUC0-∞分别为(17.110±6.521)和(17.008±6.782)mg.h.L-1。结论此法简便、快速,适用于盐酸丁咯地尔药动学研究以及临床上血浆药物浓度监测。     

RP-HPLC法测定人血浆中拉莫三嗪及药动学

目的建立RP-HPLC法测定人血浆中的拉莫三嗪,并将此方法应用于拉莫三嗪片在健康受试者体内的药动学研究。方法血浆样品经乙酸乙酯提取后,采用Kromasil C18柱分离,流动相为乙腈-20 mmol.L-1 KH2PO4(体积比为25∶75),流速为1.0 mL.min-1,检测波长为306 nm。测定了11名健康受试者口服拉莫三嗪片50 mg后不同时刻血浆中拉莫三嗪的浓度,采用DAS 2.0软件以非房室模型计算药动学参数。结果拉莫三嗪的线性范围为10.0～2 000.0μg.L-1;日内和日间精密度均小于8.0%,准确度(relative error,RE)在±2.6%以内,提取回收率大于59.1%。拉莫三嗪的主要药动学参数:t1/2为(39.1±8.2)h,tmax为(3.3±1.8)h,ρmax为(469.6±152.4)μg.L-1,AUC0-t为(22 424.6±6 952.6)μg.h.L-1,AUC0-∞为(25 573.2±7 196.4)μg.h.L-1。结论该方法适用于拉莫三嗪人体药动学研究。     

液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中黄芪甲苷及其药动学

目的建立大鼠血浆中黄芪甲苷的测定方法。方法以尼群地平为内标,采用LC-MS/MS方法,以Kiomasil C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱为分析柱,甲醇-0.1%甲酸水(70∶30,V/V)为流动相,梯度洗脱,流速为700μL.min-1,柱温为恒温,进样量为20μL。质谱检测采用多反应监测(MRM)模式,ESI源,分别监测离子反应m/z 785.6m/z 143.1(黄芪甲苷)和m/z 361.3m/z329.2(内标尼群地平)。结果在0.202～202.000μg.L-1浓度范围内具有良好的线性关系,典型回归方程为:Y=0.004 9c+0.070 6,r=0.997 0(n=9)。回收率为(91±8)%(n=9)。准确度、精密度均符合生物样品的测定要求,最低定量浓度为0.202μg.L-1。大鼠尾静脉注射和口服黄芪甲苷(20μg.g-1)体内主要药动学参数:t1/2(1.37±0.02)h、tmax(0.08±0.00)h、AUC0-t(4 717.54±178.20)μg.h.L-1、AUC0-∞(6 444.68±521.25)μg.h.L-1和t1/2(1.84±0.17)h、tmax(1.00±0.00)h、AUC0-t(499.27±10.14)μg.h.L-1、AUC0-∞(1 593.52±217.19)μg.h.L-1。结论该检测方法简便、准确、专属性强,能够满足黄芪甲苷在大鼠体内药动学研究的需要。     

液相色谱-串联质谱法同时测定人血浆中厄贝沙坦和氢氯噻嗪的浓度及药动学

目的建立液相色谱-串联质谱法同时测定血浆中厄贝沙坦和氢氯噻嗪的浓度,并用于人体药动学研究。方法 20名健康受试者单剂量口服试验制剂1片(厄贝沙坦150 mg,氢氯噻嗪12.5 mg)后,在0～36 h内不同时间点分别采集血样,分取血浆,以氯沙坦为内标,经甲醇沉淀蛋白浓缩后流动相溶解,采用CuroSil-PFP色谱柱(Phenomenex 250 mm×4.6 mm,5μm),用含4%冰醋酸的水和含4%冰醋酸的甲醇-乙腈(1∶1,V/V)的流动相梯度洗脱分离,电喷雾离子化串联质谱选择性反应监测(SRM),分别采用正和负离子切换测定厄贝沙坦和氢氯噻嗪在血浆中的浓度。结果厄贝沙坦和氢氯噻嗪血浆样品分别在10～4 000μg.L-1和1～400μg.L-1的浓度范围内质谱响应线性良好。定量下限(LLOQ)分别为10.0μg.L-1和1.0μg.L-1,准确度和精密度良好。受试者单剂量口服厄贝沙坦氢氯噻嗪片1片后,测得氢氯噻嗪的ρmax、tmax、AUC0-36和t1/2分别为(86.96±34.99)μg.L-1、(1.75±0.69)h、(434±143)μg.h.L-1和(7.91±1.31)h;厄贝沙坦的相应参数分别为(1 670±409)μg.L-1、(1.55±0.70)h、(7 396±274)μg.h.L-1和(9.45±5.20)h。结论本方法专属性强、灵敏度高、准确性高,满足厄贝沙坦和氢氯噻嗪药动学研究的要求。     

HPLC/MS法测定人血浆中氯雷他定的浓度及人体生物等效性

目的建立测定人血浆中氯雷他定的LC/MS方法,并应用于药物制剂生物等效性研究。方法18名健康受试者单剂量口服氯雷他定20 mg后,血浆样品经液液萃取,通过液相色谱质谱联用法测定其质量浓度,并计算药动学参数。结果氯雷他定测定方法的线性为0.5~20.0μg.L-1,定量下限为0.5μg.L-1;参比制剂的主要药动学参数tmax为(0.94±0.21)h,ρmax为(16.41±2.83)μg.L-1,t1/2为(9.56±4.21)h,用梯形法计算,AUC0~t为(38.70±6.93)μg.h.L-1;受试制剂的主要药动学参数tmax为(0.94±0.21)h,ρmax为(16.45±2.42)μg.L-1,t1/2为(8.89±4.06)h,用梯形法计算,AUC0~t为(43.67±9.55)μg.h.L-1,以AUC0-t计算,受试制剂相对生物利用度为(113.4±19.0)%。结论该法适用于氯雷他定制剂的生物等效性评价。     

硝苯地平对美托洛尔大鼠体内药动学的影响

目的建立一种LC-MS/MS法测定大鼠血浆中美托洛尔的浓度,研究硝苯地平对美托洛尔在大鼠体内药动学的影响。方法采用C18柱分离,用普萘洛尔作内标,流动相:乙腈-水-甲酸(体积比为40.0∶60.0∶0.1),用乙酸乙酯提取处理,采用ESI源,正离子方式检测,扫描方式为多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)。结果单独给药组与联合给药组主要药动学参数如下:ρmax分别为(502.8±67.0)和(623.8±137.3)μg.L-1,tmax分别为(0.50±0.08)和(0.58±0.13)h,t1/2分别为(1.25±0.80)和(1.53±0.58)h,AUC0-t分别为(442.8±50.9)和(730.8±218.2)μg.h.L-1,MRT0-t分别为(1.24±0.14)和(1.68±0.41)h,Cl/F分别为(39.0±3.41)和(25.4±7.46)L.h-.1kg-1,AUC0-t、MRT0-t、Cl/F具有显著性差异(P<0.05),其他药动学参数无显著性差异(P>0.05)。结论硝苯地平影响美托洛尔在大鼠体内吸收和消除的药动学过程。     

HPLC-荧光法测定莫西沙星在犬体内的血药浓度及其药动学研究

目的:建立测定犬血浆中莫西沙星浓度的方法,并研究其药动学特性。方法:取Beagle犬6只,单剂量灌服莫西沙星120mg,采用高效液相色谱-荧光法测定给药后72 h内血浆中莫西沙星的浓度,采用DAS软件计算药动学参数。色谱柱为HypersilBDS C18,流动相为乙腈-1.0 mol.L-1醋酸溶液(25∶75,pH=2.0),流速为1.0 mL.min-1,激发波长为273 nm,发射波长为488 nm。结果:莫西沙星检测浓度的线性范围为0.1～20.0μg.mL-(1r=0.999 2),平均相对回收率为89.5%～96.7%,日内和日间RSD均<6%。莫西沙星在犬体内的药动学特性符合二室模型,主要药动学参数cmax:(10.25±4.21)μg.mL-1,tmax:(3.0±1.0)h,t1/2β:(9.76±2.48)h,AUC0～24 h:(142.10±49.80)mg.h.L-1。结论:本方法准确、灵敏、快速,适用于莫西沙星的血药浓度测定和药动学研究。     

血浆中雷尼替丁和铋的药动学和生物等效性研究

目的建立高效液相色谱(HPLC)和电感耦合等离子体-质谱(ICP-MS)分别测定人血浆中雷尼替丁和铋质量浓度的方法 ,并应用该法进行雷尼替丁和铋在健康人体内的药动学特征研究和复方盐酸雷尼替丁片生物等效性评价。方法采用HPLC法和ICP-MS技术,分别测定20名健康男性受试者经口给予复方盐酸雷尼替丁片和复方雷尼替丁胶囊后不同时刻血浆中雷尼替丁和铋的质量浓度,分别绘制血药质量浓度-时间曲线,并计算主要药动学参数。结果受试制剂和参比制剂中雷尼替丁的主要药动学参数如下:tmax分别为(1.9±0.5)和(2.1±0.6)h,ρmax分别为(492.8±276.7)和(466.5±224.4)μg.L-1,t1/2分别为(2.9±1.6)和(2.8±1.0)h,用梯形法计算,AUC0-t分别为(2 548.3±895.6)和(2 377.5±887.0)μg.h.L-1,AUC0-∞分别为(2 562.9±912.8)和(2 377.5±887.0)μg.h.L-1,雷尼替丁的相对生物利用度平均为(111.6±35.4)%。受试制剂和参比制剂中铋的主要药动学参数如下:tmax分别为(0.4±0.2)和(0.3±0.1)h,ρmax分别为(56.0±40.2)和(53.3±37.9)μg.L-1,t1/2分别为(6.9±2.6)和(7.2±2.3)h,用梯形法计算,AUC0-t分别为(151.8±118.9)和(156.3±117.9)μg.h.L-1,AUC0-∞分别为(153.1±120.2)和(157.7±119.3)μg.h.L-1,铋的相对生物利用度平均为(95.3±16.2)%。结论复方盐酸雷尼替丁片与复方雷尼替丁胶囊两种制剂具有生物等效性。     

RP-HPLC法测定豨桐胶囊中奇壬醇的血药浓度

目的测定中药复方制剂豨桐胶囊灌胃后大鼠血浆中奇壬醇的浓度。方法以连翘苷为内标,经液-液萃取法制备血液样品,采用C18柱,乙腈-水(体积比为28.5∶71.5)为流动相,流速为1.0mL.min-1,检测波长215 nm,柱温35℃。结果奇壬醇血浆中质量浓度在0.04~2.00 mg.L-1(r=0.998 4)内,日内、日间精密度均小于15%。在质量浓度为0.08、0.40、1.60 mg.L-1时,提取回收率分别为(83.4±3.6)%、(82.2±4.9)%和(80.5±2.5)%。主要药物动力学参数为:ke=(0.06±0.01)h-1,t1/2=(11.86±1.66)h,AUC0-24=(4.910±0.699)mg.h.L-1。结论该方法可用于豨桐胶囊中奇壬醇的药物动力学研究。     

RP-HPLC法测定蝙蝠葛酚性碱片中蝙蝠葛碱在大鼠体内的血药质量浓度

目的测定蝙蝠葛酚性碱片灌胃后大鼠血浆中蝙蝠葛碱的质量浓度。方法以原阿片碱为内标,采用C18柱,乙腈-体积分数4%乙酸-三乙胺(体积比80∶240∶2)为流动相,流速为1.0 mL.min-1,检测波长282 nm,柱温30℃。结果蝙蝠葛碱的线性范围为0.05～5.0 mg.L-1(r=0.997 9),定量下限为50μg.L-1,日内、日间精密度均小于15%。结论本方法专属性强、灵敏度高、回收率高、重现性好,可用于蝙蝠葛碱血药质量浓度测定及药动学研究。     

大鼠血浆中山奈酚的HPLC测定法及其在药物动力学研究中的应用

目的建立测定大鼠血浆中山奈酚质量浓度的HPLC法,并用于山奈酚经灌胃给药后在大鼠体内药动学研究。方法大鼠灌胃给予200 mg.kg-1山奈酚混悬液,于给药后不同时间采集血样,以非那西丁为内标,VC为抗氧剂,采用2 mol.L-1盐酸,80℃水浴水解30 min后用乙醚萃取的方法处理血浆样品。采用RP-HPLC法测定山奈酚血药质量浓度,色谱柱为Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-体积分数为0.05%磷酸溶液(体积比40∶60),流速为1.0 mL.min-1,检测波长为370 nm,柱温为40℃。结果血浆中内源性物质对山奈酚测定无干扰,线性范围为0.050～10 mg.L-1,r=0.998 5,回收率、准确度及日内、日间精密度均符合生物样品测定要求,定量下限(LLOQ)为50μg.L-1。山奈酚主要药动学参数为AUC0-t=129.2 mg.h.L-1,ρmax=7.39mg.L-1,tmax=9.0 h,t1/2=8.3 h。结论该方法简便、快速、重复性好,适用于山奈酚大鼠血药质量浓度测定及体内药动学研究。     

LC-MS法评价2种盐酸非索非那定制剂的人体生物等效性

目的建立LC-MS法测定人血浆中非索非那定浓度,评价盐酸非索非那定胶囊(受试制剂)与盐酸非索非那定片(参比制剂)的人体生物等效性。方法采用Kromasil C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相:甲醇-质量分数为1%的甲酸水溶液(体积比为88∶12);离子源:大气压化学电离源,扫描方式:选择离子监测,用于定量分析的离子分别为m/z502.15(非索非那定)和m/z383.00(内标氯雷他定)。本法用于健康受试者口服盐酸非索非那定受试制剂和参比制剂的生物等效性研究。结果非索非那定质量浓度在10.0~2000.0μg.L-1内线性关系良好,方法的定量下限(LLOQ)为10.0μg.L-1。受试制剂与参比制剂的主要药物动力学参数:tmax分别为(1.9±0.2)和(1.9±0.2)h;ρmax分别为(173±77)和(183±83)μg.L-1;t1/2分别为(5.6±2.6)和(5.8±2.4)h;AUC0-t分别为(982±583)和(1081±772)μg.h.L-1,AUC0-∞分别为(1 176±738)and(1 271±998)μg.h.L-1。盐酸非索非那定胶囊的相对生物利用度为(90.8±15.3)%(n=18)。结论 2种盐酸非索非那定制剂具有生物等效性。     

LC-UV法测定大鼠血浆中依达拉奉及其药动学研究

目的:建立测定大鼠血浆中依达拉奉的HPLC-UV法,并研究经灌胃给药后的依达拉奉在大鼠体内的药动学特征。方法:经乙酸酸化的血浆样品以高氯酸直接沉淀后,进行LC-UV法分析,色谱柱为Symmetry Shield C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-50 mmol.L-1醋酸铵水溶液(40∶60),流速为1.0 mL.min-1,检测波长为240 nm,柱温为30℃。测定灌胃给药后大鼠血浆中依达拉奉的浓度,并计算主要药动学参数。结果:依达拉奉浓度在0.2～100.0μg.mL-1范围内线性关系良好,低、中、高3种浓度的日内日间精密度均小于10%。药动学参数:Cmax为(40.7±3.5)μg.mL-1;tmax为(0.22±0.11)h;AUC0～10为(41.6±6.1)μg.h.mL-1;AUC0～∞为(42.4±6.3)μg.h.mL-1;t1/2为(2.5±0.6)h。结论:该方法简单、灵敏,可用于依达拉奉在大鼠体内的药动学研究。     

高效毛细管电泳法测定血浆中兰索拉唑对映体浓度

目的建立测定血浆中兰索拉唑对映体浓度的高效毛细管电泳分析方法,并用于兰索拉唑在人体内立体选择性药代动力学研究。方法用乙醚作提取溶剂提取血浆中兰索拉唑。采用高效毛细管电泳法测定6名健康男性受试者经口给予兰索拉唑片后不同时刻血浆中药物对映体浓度,绘制血药浓度-时间曲线,并计算主要药动学参数。结果 S—与R—兰索拉唑对映体的主要药动学参数如下:ρmax分别为(0.538±0.039)mg.L-1和(1.050±0.250)mg.L-1,tmax为(1.8±0.7)h和(1.8±0.7)h,t1/2分别为(1.6±0.7)h和(2.7±1.0)h,用梯形法计算,AUC0-t分别为(1.49±0.36)mg.h.L-1和(4.35±1.52)mg.h.L-1。结论兰索拉唑两对映体在人体内的代谢过程具有立体选择性。     

黄芩苷温敏凝胶在家兔体内的药动学研究

目的：研究黄芩苷温敏凝胶直肠给药后在家兔体内的药动学。方法：家兔经直肠分别给予黄芩苷温敏凝胶剂和水溶性栓剂,采用高效液相色谱法检测血清中的药物浓度,色谱柱为Shim-packVP-ODSC1（8150mm×4.6mm,5μm）,流动相为甲醇-水-磷酸（47∶53∶0.2,V/V/V）,流速为0.8mL·min^-1,柱温为40℃,进样量为10μL,检测波长为274nm。结果：黄芩苷温敏凝胶与黄芩苷水溶性栓剂主要药动学参数Cmax分别为（3.639±0.23）和（2.832±0.18）μg·L^-1;AUC0～∞分别为（796.46±65.35）和（493.86±42.52）μg·h·L^-1。与水溶性栓剂比较,黄芩苷温敏凝胶直肠给药后,Cmax和AUC0～∞均有增加,且有显著性差异,其相对生物利用度为161.2%。结论：黄芩苷制成温敏凝胶直肠给药后,生物利用度显著提高。