父代大鼠长期暴露大气细颗粒物对子代血压及尿钠排泄的影响

目的 探讨父代大鼠长期暴露大气细颗粒物(fine particulate matter,PM2.5)对其子代血压及尿钠排泄的影响.方法 将20只8 ～10周龄,体质量180 ～200 g的雄性SD (Sprague-Dawley)大鼠采用完全随机方法分为暴露组和对照组(n=10).暴露组经气道滴灌PM25混悬液(10 mg/mL,20 μL/次,2次/周,共12周),对照组同法滴灌等量PBS缓冲液.12周后与健康雌性SD大鼠交配分别得到暴露组子代和对照组子代.标准饲料喂养子代大鼠至7～8周龄,体质量180 ～ 200 g,用无创鼠尾血压监测仪测定2组子代大鼠血压,代谢笼法收集24 h尿液并测定尿量、尿钠排泄情况,通过肾上腺动脉灌注多巴胺受体激动剂非诺多泮观察肾脏利尿排钠功能,Western blot检测子代大鼠肾脏组织G蛋白偶联受体激酶4(G protein coupled receptor kinase4,GRK4)、多巴胺Ⅰ类受体(D1DR)蛋白表达情况.结果 与对照组子代相比,暴露组子代血压明显升高[(130.2 ±2.6)vs(113.0 ±0.5),P＜0.05];D1受体介导的利尿排钠功能受损[尿流速:(7.52±1.98)vs(10.71 ±2.05),P＜0.05;尿钠排泄率:(522.8±211.1)vs(990.6±231.0),P＜0.05];子代大鼠肾脏GRK4蛋白水平明显增加[(0.81±0.06)vs(0.67±0.09),P＜0.05],D1受体蛋白表达降低[(0.53 ±0.05)vs(0.64±0.04)].结论 父代大鼠长期暴露PM2.5会引起其子代大鼠成年时期血压升高,可能与PM2.5影响子代肾脏GRK4的表达从而引起D1受体介导的利尿排钠功能障碍相关.     

海马RAGE和BACE异常表达与SHR认知功能损害相关性研究

目的:探讨自发性高血压大鼠海马β淀粉样蛋白(Aβ)代谢通路的变化,揭示Aβ代谢通路异常在高血压认知损害中的意义。方法:以SHR和WKY大鼠为研究对象,使用RT-PCR和Western blot方法分别检测SHR及WKY海马RAGE、LRP-1、APP和BACE的mRNA及蛋白质表达水平。结果:与WKY大鼠相比,SHR海马组织RAGEmRNA、BACEmRNA的表达水平明显增高(P<0.05),而APP mRNA表达水平相对降低(P>0.05),LRP-1mRNA表达水平相对增高(P>0.05);与WKY大鼠相比,SHR海马组织RAGE、BACE的表达水平明显增高(P<0.05),而APP和LRP-1表达水平相对增高(P>0.05)。结论:SHR海马RAGE和BACE的mRNA及其蛋白表达水平异常增高,提示Aβ代谢异常可能参与了高血压认知损害的发生机制。     

血管紧张素Ⅱ1型受体在孕期糖尿病大鼠子代肾脏中的表达

目的探讨孕期糖尿病大鼠子代肾脏血管紧张素Ⅱ1型受体(angiotensinⅡtype 1receptor,AT1R)在子代高血压发生中的作用及其机制。方法将20周龄SD雌性大鼠20只(体质量250~280 g)分别与20只SD雄性大鼠(体质量250~280 g)进行交配。将次日见阴栓的雌鼠视为孕鼠(阴栓为白色结晶状颗粒),得到12只孕鼠,分为糖尿病组孕鼠和对照组孕鼠,每组6只。糖尿病组孕鼠在孕期第0天单次腹腔注射链菌霉素(STZ)35 mg/kg,对照组孕鼠注射等体积生理盐水。采用鼠尾无创血压测量法持续监测子代大鼠血压;分别从糖尿病组孕鼠和对照组孕鼠的子代大鼠中各随机选取6只20周龄雄性大鼠(体质量250~280 g)用于实验。代谢笼测定24 h尿量,肾上腺动脉灌注AT1R阻断剂(坎地沙坦)测定尿钠排泄;qRT-PCR检测大鼠肾脏AT1R的mRNA表达;免疫印迹检测大鼠肾脏AT1R的蛋白表达。结果 12、16、20、24周龄时,糖尿病组子代大鼠血压均高于同龄期对照组子代大鼠[分别为(118±4)vs(105±3),(124±2)vs(114±2),(135±3)vs(118±2),(140±4)vs(120±3)mm Hg,P<0.05]。24 h尿液分析结果显示,STZ组子代大鼠的基础尿量及尿钠排泄率明显低于对照组子代大鼠[(558.8±40.5)vs(764.3±87.6)μmol/(kg·d),P<0.05]。肾上腺动脉灌注AT1受体阻断剂后,糖尿病组子代大鼠的排钠利尿作用明显高于对照组[(1 560±87)vs(760±60)μL/min,P<0.05],其肾脏AT1R的蛋白表达及mRNA均显著高于对照组[(1.27±0.08)vs(0.57±0.05),(1.2±0.1)vs(0.5±0.2),P<0.05]。结论孕期糖尿病导致大鼠子代血压升高,其可能机制是子代大鼠肾脏AT1R的蛋白表达增高,体内存在水钠潴留所致。     

奥美沙坦对自发性高血压大鼠延髓腹外侧区AT1受体mRNA表达的

目的 探求奥美沙坦(olmesartan)对自发性高血压大鼠(SHR)延髓腹外侧头端区(RVLM)血管紧张素Ⅱ 1型(AT1)受体mRNA表达的影响.方法 实验大鼠分作SHR对照组(正常饮水)、SHR-olme组[奥美沙坦,30 mg/(kg·d)]和WKY组(正常饮水).4周后,断头取材,采用RT-PCR方法检测RVLM内AT1受体mRNA的水平,并进行光密度测定.结果 给药1周后奥美沙坦组血压均能够达标.SHR-olme组RVLM内AT1受体mRNA平均光密度(MOD)明显低于SHR组[(0.94±0.41)vs(2.41±0.37),P<0.01],但高于WKY组(0.81±0.22,P<0.05).结论 奥美沙坦能够显著减少SHR的RVLM组织中AT1受体mRNA表达.     

G蛋白偶联受体激酶4对大鼠血管平滑肌细胞AT1受体的调节作用

目的应用siRNA干扰抑制大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞G蛋白偶联受体激酶4(G protein-coupled recep-tor kinase 4,GRK4)的表达,探讨GRK4对血管紧张素Ⅱ1型(angiotensinⅡtype 1,AT1)受体的调节作用。方法免疫组化检测大鼠回结肠动脉血管平滑肌组织GRK4蛋白表达;以大鼠胸主动脉平滑肌细胞株(A10细胞株)为研究对象,免疫印迹检测GRK4、AT1受体蛋白表达变化,免疫共沉淀检测GRK4和AT1受体的相互作用和AT1受体磷酸化改变。结果大鼠动脉平滑肌组织GRK4表达良好;siRNA干扰后,GRK4蛋白表达明显下降(P<0.05);AT1蛋白表达降低(P<0.05),AT1受体磷酸化明显增强(P<0.05);GRK4和AT1受体存在共连接,抑制GRK4表达后增加GRK4与AT1受体之间的共连接。结论 GRK4能够调控大鼠胸主动脉平滑肌细胞AT1受体蛋白表达及其磷酸化状态,该调节作用可能与两者的共连接有关。     

SHR,WKY大鼠心,肾及胸主动脉ACE,ACE2表达的差异与高血压的关系

目的观察SHR,WKY大鼠心,肾,胸主动脉及体外培养的VSMCs中的ACE,ACE2表达的差异,探讨ACE与ACE2在自发性高血压大鼠高血压形成的机制。方法选取6个月的雄性自发性高血压大鼠SHR(Spontanous Hypertensive Rat,SHR)及与之配对的正常大鼠WKY。尾袖法测定大鼠血压,断头取血,称量全心与左心重量,计算心体比与左室重指数。免疫组化法检测肾脏ACE,ACE2的表达。放免法测定血浆中AII水平。RT-PCR法比较SHR与WKY大鼠心,肾,胸主动及体外培养VSMC细胞ACE、ACE2 mRNA的表达水平。结果(1)6月龄SHR大鼠血压显著高于WKY(196.42±18.90,116.35±14.48,P<0.05),而WKY大鼠心体比及左室指数明显低于SHR(2.84±0.28,3.79±0.41,P<0.05;2.17±0.18,2.95±0.28,P<0.05),SHR大鼠血浆中AII水平明显增高(1675.35±305.16,694.38±112.56,P<0.05)。(2)肾脏ACE2免疫染色SHR明显低WKY(0.054±0.013,0.205±0.043,P<0.05)。与WKY相比,SHR心,肾,胸主动脉ACE2 mRNA表达水平分别减少49.84%4、0.67%3、6.17%,,而ACEmRNA表达水平分别增加33.66%、29.83%、42.16%。在体外培养的胸主动脉平滑肌细胞(thorax aorta vascularsmooth mulscle cell,TAVSMC)SHR大鼠ACE mRNA表达水平明显高于WKY,ACE2 mRNA的表达水平显著降低。结论(1)ACE与ACE2表达失调可能是高血压形成的重要原因。(2)ACE与ACE2表达差异可能大鼠遗传背景有关。     

血小板源生长因子受体介导的细胞信号转导在自发性高血压大鼠主动脉中的变化

目的:研究血小板源生长因子(platelet-der i ved growth factor, PDGF)受体介导的信号转导通路在自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats, SHR)主动脉中的动态变化及其意义.方法:提取大鼠主动脉膜蛋白和胞浆蛋白,用免疫印迹法检测PDGF受体β亚单位,细胞外信号调节激酶(e xtracellular signal-regulated kinase 1/2, ERK 1/ 2)和磷酸化ERK 1/2的变化.结果:4周龄SHR动脉血压无明显变化,12周龄时血压稳定增高. 主动脉PDGF受体β亚单位蛋白的表达在SHR和WKY(Wistar-Kyoto)大鼠都随着年龄的增加而上调,但4周龄和1 2周龄SHR中该受体的表达均明显高于同龄WKY组(分别为28.0%和28.6%, P<0.05);SH R 主动脉中ERK 1/2的含量较同龄WKY组明显增加(P<0.05);12周龄SHR主动脉磷酸化ERK 1/2 的含量亦较同龄WKY组增加28.4%(P<0.05).结论:SHR大鼠主动脉PDG F受体β亚单位和ERK 1/2的上调先于高血压的发生,并在高血压期维持较高水平 ,提示PDGF介导的信号转导系统的活化在自发性高血压的发生和发展中起重要作用.     

幼龄SHR大鼠肾脏内皮素系统的改变

目的 观察幼龄高血压大鼠肾脏内皮素－1（ET－1）及其A、B受体的改变。方法 采用免疫组化和RT－PCR方法检测7周龄SHR大鼠肾脏ET－1及其A、B受体mRNA和蛋白水平。结果 与WKY对照组相比,SHR大鼠存在明显的高血压和尿钠、尿量排泄下降,血浆及肾组织中ET含量无显著异常,但是肾血管ETA受体的mRNA和蛋白水平明显升高,而肾脏ET－1及B受体的表达无改变。结论 肾血管ETA受体明显上调可能参与了幼龄高血压大鼠肾脏水钠潴留。     

肾上腺髓质素及其受体系统在自发性高血压大鼠心血管组织中的变化

目的通过观察肾上腺髓质素(ADM)及其受体系统-降钙素受体样受体(CRLR)以及受体活性修饰蛋白(RAMPs)在自发性高血压大鼠(SHR)心血管组织中的改变,以探讨ADM在心血管系统中保护机制。方法通过放射免疫法测定SHR和WKY大鼠心肌和血管ADM含量,半定量RT-PCR测定ADM、CRLR、RAMP2和RAMP3 mRNA水平。结果SHR大鼠有显著的高血压,比对照组高76%,心脏重量与体重之比明显高于对照组46%;血浆、心肌和血管ADM含量分别较对照组高42.5%、68.3%和80.4%;ADM、CRLR、RAMP2和RAMP3 mRNA在心肌组织分别较对照组高46%、62%、41%和54%(P<0.01),而在血管组织高72%、87%、53%和74%(P<0.01)。结论SHR大鼠心血管组织ADM生成增加,ADM、CRLR和RAMP2,3基因表达亦有不同程度的增加。提示ADM及其受体系统可能在自发性高血压中发挥重要的作用。     

卡托普利对慢性心衰大鼠内皮素受体系统表达的影响

目的 研究慢性心衰大鼠在心衰早期、晚期及应用卡托普利诒疗慢性心衰时的左心室内皮素A(ETA)和内皮素B(ETB)受体的mRNA的表达水平,了解心衰时心肌内皮素受体系统的变化及其与病程的关系,以及卡托普利慢性给药对心衰大鼠内皮素系统的影响。方法用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测冠脉结扎心衰模型大鼠和卡托普利治疗时大鼠的左心室ETA和ETB受体的mRNA的表达,以放射免疫技术检测血浆中内皮素1(ET1)和心钠素(ANF)的浓度。结果 冠脉结扎10d后,血浆ET1和ANF的水平以及ETA和ETB受体mRNA表达水平明显增加;冠脉结扎70d后,血浆ET1和ANF的水平进一步显著升高(P<0.01或0.05),ETA受体mRNA表达水平和假手术组相比差异无显著性(P>0.05),而ETB受体mRNA表达水平仍明显增加,但和冠脉结扎10d组相比表达水平显着降低。卡托普利慢性给药治疗60d后,血浆ANF水平显著低于冠脉结扎70d组(P<0.01或0.05),但血浆ET1、ETA、ETB受体mRNA表达水平与冠脉结扎70d组差异无显著性(P>0.05)。结论 在慢性心衰的不同阶段,左心室内皮素受体系统表达的改变参与机体心脏功能的调节;卡托普利对内皮素系统没有直接影响。     

雄激素受体、孕激素受体在脑膜瘤中的表达及其意义

目的了解雄激素受体(AR)、孕激素受体(PR)在脑膜瘤组织中的表达情况及其与肿瘤良恶性的关系.方法采用免疫组织化学二步法对57例脑膜瘤切片进行AR、PR的检测.结果(1)AR的表达阳性率在全部病例中为50.8%(29/57),良性组为44.4%(20/45),不典型组为60.10%(3/5),恶性组为85.7%(6/7),3组间阳性率的差别有显著性意义(P<0.05).(2)PR表达阳性率在全部病例中为67.9%(38/57),良性组为71.1%(32/45),不典型组为60.10%(3/5),恶性组为42.9%(3/7),3组之间的差别有非常显著性意义(P<0.01).结论PR、AR在良性、不典型性和恶性脑膜瘤中的表达显著不同,检测脑膜瘤中AR、PR的表达可用于判断肿瘤的良恶性,并可能预测其预后.     

子宫内膜息肉中雌、孕激素受体的表达及临床意义

目的:检测子宫内膜息肉雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)的表达,探讨其在子宫内膜息肉的发生机制。方法:前瞻性研究子宫内膜息肉患者40例,全部患者均接受宫腔镜下子宫内膜息肉切除术,切除子宫内膜息肉及周围正常内膜组织,采用免疫组化方法测定息肉组织和周围正常内膜组织中ER、PR的表达水平。结果:ER在息肉组的表达高于内膜组,PR在息肉组的表达低于内膜组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:子宫内膜息肉中ER、PR的异常表达可能参与了子宫内膜息肉形成的病理过程。     

雌激素和孕激素在牙髓病损组织中的受体表达

目的通过对牙髓病损相关组织中的雌孕激素受体的检测，探讨在这些组织中是否存在性激素受体，为研究牙髓相关疾病及牙体修复材料提供理论依据。方法应用ABC法对20颗健康牙髓作为对照组及14例牙髓息肉、20例根尖囊肿和24例根尖肉芽肿作为实验组做ER、PR检测。结果在受检的男女各10颗牙髓中，男性ER阳性为4例，占40％，女性ER阳性为5例，占50％；男性PR阳性为6例，占60％，女性PR阳性为3例，占30％。而和牙髓相关的其他病变的组织中几乎无表达。结论正常牙髓也可能是性激素的靶组织，但相关病损组织可能不是性激素的靶组织。这些疾病和性激素的相关性有待于进一步的探讨和研究。     

雌、孕激素受体在肝门部胆管癌中的表达及意义

目的探讨雌、孕激素受体（ER、PgR）在肝门部胆管癌的表达情况,研究它们的表达与肿瘤的病理类型、分级及临床分期的关系。方法应用免疫组织化学法,检测42例肝门部胆管癌组织中ER及PgR的表达水平。结果在肝门部胆管癌中ER及PgR阳性表达率分别为66.7％和64.3％。高分化型与低分化型之间及乳状型与硬化型之间ER及PgR表达具有明显差异。结论ER及PgR在肝门部胆管癌中的表达率较高。ER及PgR可能有希望成为反映肝门部胆管癌恶性程度和预后的一项生物学指标。     

实验性牙周炎雌、孕激素受体免疫组织化学观察

目的 研究雌激素受体（ER）与孕激素受体（PR）在牙周炎牙龈组织的表达，为探讨牙周炎的发生提供依据。方法 在建立大鼠实验性牙周炎的基础上，应用免疫组化染色观察ER、PR在牙龈组织的表达，并与正常对照组进行比较研究。结果 ER、PR在实验性牙周炎牙龈组织的表达明显高于正常对照组。结论 雌、孕激素及其受体在牙周炎的致病过程中有重要促进作用。     

Ki-67、雌激素受体及孕激素受体在子宫肌瘤中的表达

目的探讨Ki-67、雌激素受体(ER)及孕激素受体(PR)在子宫肌瘤中的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学法检测52例子宫肌瘤标本和52例瘤旁正常子宫肌层标本中Ki-67、ER及PR的表达情况,分析Ki-67、ER及PR的表达与子宫肌瘤的相关性。结果正常子宫肌层与子宫肌瘤组织中ER、Ki-67的表达比较差异均无统计学意义(P>0.05),子宫肌瘤组织中PR的表达显著高于正常子宫肌层(P<0.05)。子宫肌瘤组织中PR、ER、Ki-67的表达与肿瘤数量及部位无显著相关性(P>0.05)。肿瘤直径>5 cm的子宫肌瘤与肿瘤直径<5 cm的子宫肌瘤组织中PR、Ki-67的表达比较差异均无统计学意义(P>0.05)。肿瘤直径>5 cm的子宫肌瘤组织中ER的表达显著高于肿瘤直径<5 cm的子宫肌瘤(P<0.01)。结论 PR可能参与了子宫肌瘤的发生和发展,ER与子宫肌瘤的大小有关。     

绝经期后妇女子宫内膜息肉中雌、孕激素受体表达特点及意义

目的：通过研究绝经后妇女子宫内膜息肉雌激素受体（ER）和孕激素受体（PR）的表达探讨其可能的发生机制及临床意义.方法：运用免疫组织化学方法检测并行半定量分析,对70例诊断子宫内膜息肉的绝经后妇女的内膜息肉及其邻近内膜组织中ER,PR的表达,并选用20例正常绝经后妇女的子宫内膜组织作为对照.结果：子宫息肉组腺体和间质内PR呈低水平表达,并明显低于对照组（P〈0.05）,其余各组中ER的表达无明显差异.结论：绝经后妇女PR的异常表达在子宫内膜息肉的发生中起重要作用.     

雄激素受体、雌激素受体在肝细胞型肝癌中的免疫电镜观察

目的：观察雄激素受体（AR）与雌激素受体（ER）在肝癌和非癌肝组织超微结构上的分布。探讨AR、ER在肝癌致癌过程中的作用。方法：用免疫胶体金染色法（IGS）标记13例肝细胞型肝癌与5例非癌肝组织细胞内雄激素受体（AR）及雌激素受体（ER）,并用免疫透射电镜观察。结果：发现胶体金颗粒主要分布于线粒体双层膜和脊膜;粗面内质网;结合及游离核蛋白体;核膜及核周间隙,异染色质及常染色质等部位。统计分析表明,肝癌细胞金颗粒明显多于非癌肝细胞内金颗粒（P＜0．05）。肝癌细胞胞质、胞核AR金颗粒明显多于ER金颗粒（P＜0．05）。而非癌肝细胞胞质、胞核AR、ER金颗粒数量无显著差别（P＞0．05）。结论：提示肝癌是一种雌激素依赖肿瘤,为抗性激素治疗肝癌提供了理论依据。     

雌激素孕激素受体和人类表皮生长因子受体2在乳腺癌组织中的表达

目的 探讨雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)及人类表皮生长因子受体2(HER2)在乳腺癌中的表达及其与年龄、肿瘤大小、临床分期和腋窝淋巴结转移等的相关性.方法 对中山大学附属第一医院在2001年1月-2007年12月新收治的910例可手术乳腺癌的ER、PR、HER2及各种临床指标进行回顾性分析.结果 在910例的乳腺癌中,浸润性导管癌占89.4%,浸润性小叶癌占1.7%,导管原位癌占5%,其他类型占4.9%;肿瘤卣径<2 cm占29.9%,在2～5 cm之间的占45.6%,5 cm的占24.5%;无淋巴结转移的占54.2%,3个及3个以下淋巴结转移的占25.5%,4个及4个以上淋巴结转移的占20.3%.ER表达阴件的占33.0%,PR表达阴性的为27.4%.HER2表达为+++的占20.1%.随着患者年龄的增长,其就诊时淋巴结癌转移率减小(P＜0.001),其他指标与年龄无明显相关性;肿瘤大小与淋巴结痛转移率呈正相关(P＜0.001),与ER及PR的表达呈负相关(P＜0.001),与HER2表达呈正相关(P=0.02);ER与PR表达呈正相关(P＜0.001);ER及PR与HER-2呈明显负相关(P＜0.001).在不同淋巴结转移状态的乳癌中,ER、PR及HER2的表达差异无统计学意义.结论 ER、PR可作为乳腺浸润性导管癌预后良好的重要指标与HER2的表达呈负相关,HER-2的表达与年龄及淋巴结转移状态无明显的相关关系,临床上能更早期发现ER及PR阳性或HER2阴性的肿瘤.     

维生素D受体及维生素D受体激动剂的研究进展

维生素D受体为亲核蛋白,属于类固醇激素/甲状腺激素受体超家族成员,在体内主要介导维生素D的细胞作用.维生素D的主要代谢产物——活性维生素D3在体内作用广泛,与维生素D受体结合后,不仅发挥经典的钙磷调节作用,还具有调节细胞增殖、调节免疫及抑制细胞坏死、诱导肿瘤细胞分化、促进肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤浸润和转移等非钙调作用.文章就维生素D受体的生物学特征、信号转导通路和活性维生素D3及其衍生物——维生素D受体激动剂的有关研究进展做一综述.