PPAR-γ激动剂吡格列酮通过抑制炎症反应减轻顺铂诱导的小鼠急性肾损伤

目的研究过氧化物酶体增殖物激活受体（peroxisome proliferator-activated receptor,PPAR）-γ激动剂吡格列酮对顺铂（cisplatin,CDDP）诱导的小鼠急性肾损伤（acute kidney injury,AKI）的可能保护作用及其机制。方法腹腔注射顺铂制备小鼠AKI模型。18只小鼠随机分为正常对照组（CT组）,AKI模型组（C组）和吡格列酮治疗组（C＋P组）。C组和C＋P组按25mg／kg给予顺铂处理。C＋P组在顺铂注射前3d,连续三天给予吡格列酮灌胃。CT组给予生理盐水作为对照。顺铂或盐水处理72h后处死小鼠,收集血清和肾脏标本。测定血清肌酐和尿素氮,PAS染色后显微镜下观察肾脏形态学变化,同时通过Westernblot检测炎症指标诱生型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）。结果与CT组相比,CDDP诱导C组血清肌酐及尿素氮明显升高,病理检查可见肾小管上皮细胞肿胀坏死、蛋白管型形成及炎症细胞浸润明显增加,同时炎症指标iNOS表达上调。与C组相比,C＋P组血清肌酐、尿素氮明显下降,肾小管上皮细胞肿胀坏死减轻,炎症细胞浸润减少,iNOS表达下调。结论PPAR-7激动剂吡格列酮可通过抑制iNOS削弱炎症反应从而减轻顺铂诱导的小鼠急性肾损伤。     

地塞米松抗小鼠肾缺血-再灌注损伤的作用研究

摘要 目的 研究糖皮质激素受体(GR)激动药地塞米松(DEX)对小鼠肾缺血-再灌注损伤的作用及其机制.方法 建立小鼠肾缺血-再灌注损伤模型.18只雄性 C57BL/6小鼠随机分为 3组(n＝ 6),分别为假手术(SHAM)组、肾缺血-再灌注损伤模型(IRI)组、地塞米松预处理(DEX)组.SHAM组和IRI组缺血前1 h给予0.9%氯化钠溶液(4 mg.kg-1,腹腔注射),DEX组缺血前1 h给予地塞米松(4 mg.kg-1,腹腔注射),IRI组和DEX组血管夹夹闭左肾动脉,置于32 ℃温箱后1 h松开血管夹,去除右肾.SHAM组操作同上,但不夹闭左肾动脉.再灌注24 h后处死小鼠,收集血清和肾脏标本.测定血尿素氮(BUN)和血清肌酐(Cr),PAS染色后显微镜下观察肾脏形态学变化,PCR检测单核细胞趋化蛋白(MCP-1)和干扰素(IFN-γ).结果 与SHAM组相比,IRI组血清肌酐,血尿素氮明显升高.病理检查可见肾脏内肾小管上皮细胞明显肿胀坏死、蛋白管型形成明显,还可观察到炎症细胞浸润明显增加.PCR显示MCP-1,IFN-γ明显上调.与IRI组相比,DEX组血清肌酐,血尿素氮明显下降,肾小管上皮细胞肿胀坏死减轻,炎症细胞浸润减少,MCP-1、IFN-γ表达降低.结论 GR激动药DEX可通过抑制炎症反应减轻肾缺血-再灌注损伤.     

肝功能衰竭合并肝硬化患者血清γ-谷氨酰转肽酶与前白蛋白水平的相关性

目的探讨肝功能衰竭合并肝硬化患者血清γ-谷氨酰转肽酶(γ-glutamyl transferase,γ-GGT)与前白蛋白水平的相关性。方法选取2014年10月至2017年12月在惠州市第一人民医院和南方医科大学南方医院感染科住院治疗的肝功能衰竭合并肝硬化患者95例为肝功能衰竭组,HBV相关肝硬化患者30例为肝硬化组,同时选取两院健康人群30例为对照组。检测所有研究对象外周血γ-GGT水平,比较肝功能衰竭合并肝硬化患者病死组和存活组入院前及入院1周时γ-GGT的变化以及γ-GGT上升者和下降者存活率的差异。分析肝功能衰竭组患者γ-GGT与前白蛋白和终末期肝病模型(model for end-stage liver disease,MELD)评分的相关性。结果入院时肝功能衰竭组、肝硬化组和对照组患者外周血γ-GGT水平分别为(149.61±69.86)U/L、(123.96±59.52)U/L和(48.28±10.25)U/L,差异有统计学意义(F=3.619,P=0.021)。肝功能衰竭组存活者入院1周时γ-GGT水平显著高于病死者(t=5.400,P=0.021);肝功能衰竭组中γ-GGT上升者的存活率为71.83%(51/71),显著高于γ-GGT下降者的25.00%(6/24),差异有统计学意义(t=5.982,P=0.001)。肝功能衰竭组患者γ-GGT上升值与MELD评分呈负相关(r=-0.627,P=0.001),与前白蛋白呈正相关(r=0.709,P=0.021)。结论γ-GGT不断升高是肝功能衰竭合并肝硬化患者良好预后的指标之一;前白蛋白与肝功能衰竭合并肝硬化患者血清γ-GGT呈正相关,可反映机体肝细胞的再生功能。     

AEG1促进肝癌细胞HepG2分泌细胞因子IL-6、IL-1β的实验研究

目的研究AEG1能否促进肝癌细胞HepG2分泌细胞因子IL-6、IL-1β,探讨AEG1是否参与改变肿瘤微环境。方法用脂质体稳定转染法分别转染pcDNA3.1(-)-AEG1(AEG1全长质粒)、psilencer 2.0-shAEG1(AEG1干扰质粒)至HepG2细胞,相对应以转染空质粒pcDNA3.1(-)、psilencer 2.0的HepG2细胞为对照组;采用实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)、Western blotting检测AEG1 mRNA和蛋白表达变化;采用实时荧光定量RT-PCR和酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞因子IL-6、IL-1β的表达和分泌。结果与转染相应空载体的阴性对照组和未转染的空白对照组相比,分别转染AEG1全长质粒/AEG1干扰质粒后,HepG2细胞中AEG1的蛋白表达明显增高/降低。转染AEG1全长质粒的HepG2细胞中IL-6、IL-1βmRNA均较对照组和空白组明显增强(P均<0.05),细胞培养介质中IL-6、IL-1β蛋白浓度也显著高于对照组(P均<0.05);转染AEG1 shRNA的HepG2细胞中IL-6、IL-1βmRNA均较对照组和空白组降低(P均<0.05),细胞培养介质中IL-6、IL-1β蛋白浓度也低于对照组(P均<0.05)。结论成功构建稳定过表达和沉默AEG1的HepG2细胞,AEG1能调控IL-6、IL-1β的表达和分泌。     

基于MELD评分分层分析人工肝治疗对平台期肝衰竭患者短期预后的影响

目的对平台期肝衰竭患者进行MELD评分分层后,研究人工肝治疗对其短期(28 d及90 d内)病死率的影响。方法回顾性纳入2015年1月-2019年4月南方医科大学南方医院收治的肝衰竭患者187例,其中人工肝组73例,非人工肝组114例。按平台期不同的MELD评分分层分析2组间28 d、90 d病死率的差异,存活者的住院费用和住院日的差异,以及人工肝不良反应发生率。计量资料2组间比较采用t检验,计数资料2组间比较采用χ2检验或Fisher确切概率法。结果人工肝治疗可显著降低MELD评分30～39分[人工肝组(5.9%) vs非人工肝组(39.6%),P 0.001]及40分[人工肝组(25.0%) vs非人工肝组(72.7%),P 0.05]的平台期肝衰竭患者28 d病死率。人工肝治疗可降低MELD评分30～39分平台期肝衰竭患者90 d病死率[人工肝组(23.5%) vs非人工肝组(62.3%),P 0.001]。人工肝治疗不能明显缩短存活患者的平均住院时间(P 0.05);人工肝治疗对90 d内存活患者的住院总费用无明显影响(P 0.05);人工肝相关不良反应的发生率为29.1%,但症状轻微,经对症治疗后缓解。结论平台期肝衰竭MELD评分30分,28 d及90 d内病死率均较低,可根据患者经济条件和意愿,给予合理选择人工肝治疗;平台期肝衰竭MELD评分30～39分,若无明显禁忌证,则积极建议行人工肝治疗;平台期肝衰竭MELD评分40分,若无明显禁忌证,28 d内建议积极行人工肝治疗,同时建议尽早肝移植。人工肝对90 d内存活患者的住院总费用、平均住院日均无明显影响,不增加患者经济负担。