多胺类似物四丁基丙二胺对人A549肺癌细胞的影响

目的:研究新多胺类似物四丁基丙二胺(tetrabutyl propanediamine,TBP)对人A549肺癌细胞增殖、细胞迁移能力和多胺代谢的影响及其机制.方法:MTT法用于分析细胞增殖；流式细胞术用于分析细胞周期；QT-RT-PCR技术用于分析多胺代谢酶的表达水平；高效液相色谱用于检测细胞内多胺含量.结果:TBP处理A549细胞后导致:(1)显著抑制人A549细胞增殖,其抑制效应呈浓度和时间的依赖性；(2)G1期和G2期细胞显著减少,但S期细胞显著性增加；(3)显著诱导多胺降解代谢限速酶SSAT的表达,但对其他酶影响较小；(4)细胞内多胺含量显著性下降.结论:上述研究结果提示TBP具有抑制人A549肺癌细胞增殖的药理活性,有作为肺癌治疗药物的潜在临床应用前景.其机制可能与干扰DNA复制、抑制细胞周期和降低细胞内多胺水平相关.     

急性黄疸型病毒性肝炎病人血清过氧化脂质含量及其与胆红素含量间的关系

脂质过氧化在某些疾病的发生和发展过程中的重要作用,日益受到临床工作者的重视。多种因素引起的肝损伤,如酒精性肝炎和血色病等,其发病过程均与脂质过氧化密切相关。本文研究通过测定急性黄疸型病毒性肝炎病人血清过氧化脂质(LPO)和胆红素水平,分析二者间的相关性,以了解LPO测定在诊断和分析该病病情中的意义。材料和方法一.检测对象急性黄疸型病毒性肝炎85例(男48例,女37例),病程在15天内,平均8.9天,年龄5～50岁;急性无黄     

肿瘤细胞免疫原性死亡相关分子的研究进展

用多种化学药物和放射线治疗肿瘤时,肿瘤细胞可发生免疫原性细胞死亡,即肿瘤细胞在发生凋亡的同时,由非免疫原性的细胞转变为具有免疫原性的细胞,并在机体内激发抗肿瘤免疫效应.肿瘤细胞的免疫原性死亡是一种有多种信号分子和细胞因子参与的复杂过程,这些分子的细胞定位和表达水平的改变直接影响死亡肿瘤细胞与免疫细胞之间的相互作用.对肿瘤细胞免疫原性死亡机制的深入研究可为肿瘤的免疫治疗提供新的依据和手段.本文简要综述了与肿瘤细胞免疫原性死亡相关分子的研究进展.     

辣椒素诱导人骨肉瘤细胞MG-63发生免疫原性细胞死亡

目的探讨辣椒素与顺铂能否抑制人骨肉瘤细胞MG-63增殖并诱导其免疫原性死亡(ICD)。方法 MTT检测细胞的增殖;线粒体膜电位分析细胞凋亡;流式细胞计量术检测细胞膜上钙网蛋白(CRT)表达量;荧光素酶法检测细胞外ATP的释放;ELISA检测细胞上清中高迁移率族蛋白1(HMGB1)的分泌。结果辣椒素及顺铂作用均能抑制细胞MG-63增殖(P0.01),且呈剂量依赖性;辣椒素和顺铂均可诱导MG-63细胞凋亡(P0.01),但只有辣椒素能诱导MG-63细胞内质网中CRT转移到细胞膜表面,且促进ATP及HMGB1的释放(P0.01)。结论辣椒素可诱导人骨肉瘤细胞凋亡及免疫原性死亡。     

二氟甲基鸟氨酸对T淋巴瘤Jurkat细胞生长的影响

目的研究二氟甲基鸟氨酸(difluromethylornithine,DFMO)对人T淋巴瘤Jurkat细胞的影响及其作用机制,为探讨DFMO能否用于治疗人白血病提供实验依据。方法DFMO(0～10mmol/L)处理人T淋巴瘤Jurkat细胞24～72h后,MTS法检测细胞的存活率,化学分析法检测精胺氧化酶(spermine oxidase,SMO)和乙酰多胺氧化酶(acetylpolyamine oxidase,APAO)活性,DNA片段化分析检测细胞凋亡,荧光染料法检测细胞线粒体膜电位变化,Western blot法检测细胞内Bax含量,分光光度法检测caspase-3酶活性。结果DFMO处理细胞能显著抑制Jurkat细胞的生长(P<0.01),抑制率随药物浓度的增加和作用时间的延长而加大,DFMO浓度为10mmol/L时,24h抑制率为33%,48h抑制率为38%,72h抑制率为49%。DFMO处理可导致Jurkat细胞DNA片段化,促进Bax由细胞质向线粒体转移,细胞内caspase-3活性增加(增加46%,P<0.05),并伴有线粒体膜电位的显著降低,DFMO浓液为2和5mmol/L时,分别降低29...     

天花粉蛋白突变体的构建及其与重组天花粉在原核系统中的表达和纯化

目的:对天花粉蛋白(TCS)的第120-123位氨基酸进行缺失突变,并在原核系统中对其进行表达和纯化。方法:利用重叠延伸PCR的方法得到TCS突变体cDNA,并克隆入原核表达载体pET-28(a+)。酶切和测序鉴定后,将突变体质粒pET-28(a+)-mTCS转化BL21(DE3)表达菌,经IPTG诱导表达后,对表达产物用Ni2+-NTA亲和层析柱进行纯化和Western-blot鉴定。结果:利用重叠延伸PCR成功获得突变天花粉蛋白的编码序列,并构建pET-28(a+)-mTCS原核表达质粒。在BL21(DE3)菌中,突变体蛋白(mTCS)可被IPTG诱导性表达,并被Ni2+-NTA树脂有效纯化。结论:本实验成功获得一种突变体TCS,并建立该突变TCS的原核表达和纯化的实验方法。     

重组天花粉蛋白的真核表达及其对人宫颈癌 Caski细胞增殖的影响

目的:观察重组天花粉蛋白(recombinant trichosanthin,rTCS)高表达对人宫颈癌Caski细胞增殖的影响.方法:构建真核表达质粒pcDNA3.1(- )/6His-TCS,稳定转染Caski细胞后,RT-PCR,Western-blot筛选rTCS高表达细胞株.以转染空载质粒pcDNA3.1(一)细胞株作为对照组,MTT法检测2组细胞的增殖情况,流式细胞术检测细胞周期变化.结果:成功获得高表达rTCS的Caski细胞株,rTCS高表达能够显著抑制Caski细胞增殖(P＜0.01),并能将细胞抑制在G1和G2期(P＜0.05).结论:rTCS在细胞内高表达具有抗人宫颈癌细胞生长的作用,该研究为宫颈癌治疗提供了新的思路.     

枳梖子对实验性肝损伤的防护作用

CCl4性肝损伤小鼠血清GPT活处、血消和肝MDA含量显著性升高，但血糖和白蛋白浓度显著性下降，表明肝脏结构与功能的严重损伤，用枳子匀浆灌胃14d，然后用CCl4时，上述指标变化幅度明显变小，提示枳子对CCl4引起的肝损伤具有防护作用。枳子能显著升高正常小鼠体内SOD活性，降低MDA含量，这种明显的抗脂质过氧化作用，可能是其抗CCl4性肝损伤的代谢机制。     

甲状腺术后降钙素不足对骨密度的影响

甲状腺癌术后患者因大部分甲状腺被切除,降钙素(calcitonin,CT)分泌减少,此时骨质有何改变是值得研究的。我们对湖南医科大学附属第二医院近10年来因甲状腺乳头状癌而行甲状腺全切或次全切的患者进行随访,并测量其骨密度及有关的内分泌激素。