外源性一氧化碳对体外培养的SH-SY5Y细胞的影响

目的 研究不同浓度的外源性一氧化碳(CO)对体外培养的神经细胞SH-SY5Y的影响,进一步探讨CO中毒脑损伤的机制.方法 SH-SY5Y细胞在含有不同浓度CO的装置中培养12 h,然后用MTT法检测细胞存活率,DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测细胞凋亡的发生,以激光共聚焦显微镜荧光染色法检测细胞内活性氧的产生和线粒体膜电位的变化,用荧光酶标仪测定caspase-3的活性,并用Western印迹的方法 检测Bax蛋白的表达水平.结果 1000、10000 ppm CO处理SH-SY5Y细胞12 h后显著降低细胞的存活率;诱导细胞发生凋亡,凋亡率分别达29.03%和41.67%;激光共聚焦显微镜结果 细胞内活性氧水平及caspase-3的活性显著升高;线粒体膜电位明显降低,红/绿荧光强度的比值由正常的5.97分别降低为1.56±0.07和0.34±0.02;而且细胞中Bax蛋白表达水平显著升高.而100 ppm CO对体外培养的SH-SY5Y细胞的存活率、caspase-3的活性、活性氧水平、线粒体膜电位以及Bax蛋白的表达无明显影响.结论 高浓度的外源性CO(1000、10 000ppm)对体外培养的SH-SY5Y细胞造成损伤,具有明显的细胞毒性;而低浓度的CO(100 ppm)对SH-SY5Y细胞没有明显的损伤作用.     

紫花牡荆素通过线粒体凋亡途径诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡

目的:研究紫花牡荆素诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡作用,并探讨其诱导凋亡机制.方法:体外培养人宫颈癌HeLa细胞.细胞凋亡ELISA试剂盒检测HeLa细胞组蛋白/DNA碎片;碘化丙啶染色流式细胞术定量分析Sub-G1细胞百分率;DNA琼脂糖凝胶电泳观察DNA梯形条带.caspase比色试剂盒检测caspase-3/-9活性;Rh123探针染色FCM检测线粒体膜电位;Western blot检测细胞色素c、Bax、Bcl-2、Bcl-xL和XIAP蛋白的表达.结果:不同浓度的CAS处理48h后,HeLa细胞组蛋白/DNA碎片增加、Sub-G1细胞百分率显著增高、DNA琼脂糖凝胶电泳法观察到典型的DNA梯形条带;CAS处理组caspase-3/-9活性明显升高、线粒体膜电位降低、细胞色素c、Bax显著升高,而Bcl-xL和XIAP蛋白表达水平降低.结论:CAS通过线粒体凋亡途径诱导HeLa细胞凋亡.     

白花蛇舌草对人B淋巴细胞瘤Ramos细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨白花蛇舌草对Ramos细胞增殖和凋亡的影响。方法使用0、10、20、40 m L·L-1白花蛇舌草处理Ramos细胞24 h后收获细胞;采用细胞增殖检测试剂盒检测白花蛇舌草对Ramos细胞增殖的影响,并检测Ramos细胞线粒体膜电位的变化;流式细胞术检测白花蛇舌草对Ramos细胞凋亡的影响,并检测Ramos细胞中caspase-3、caspase-9活性的变化;Western blot法检测Ramos细胞Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果细胞增殖实验结果证明白花蛇舌草处理的Ramos细胞增殖受到明显抑制;20、40 m L·L-1白花蛇舌草干预Ramos细胞24 h后,Ramos细胞线粒体膜电位低于0 m L·L-1(P<0.05,P<0.01);流式细胞术检测结果表明细胞凋亡增加;与0 m L·L-1白花蛇舌草比较,20 m L·L-1白花蛇舌草处理Ramos细胞24 h,caspase-3和caspase-9活性增加了96%和37%(P<0.05),40 m L·L-1白花蛇舌草处理Ramos细胞24 h,caspase-3和caspase-9活性增加了148%和115%(P<0.01)。Western blot法证实Bax蛋白表达量增强,而Bcl-2蛋白表达量减弱,且呈现一定程度的剂量依赖性。结论白花蛇舌草可通过活化调控胱天蛋白依赖的线粒体途径,诱导Ramos细胞凋亡。     

冬凌草甲素通过线粒体途径诱导人胆囊癌GBC-SD细胞凋亡

目的 研究冬凌草甲素诱导人胆囊癌GBC-SD细胞的凋亡作用及其机制.方法 MTS法检测冬凌草甲素对GBC-SD细胞的生长抑制作用;瑞氏染色法观察细胞的形态学变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率、线粒体膜电位改变、caspase-3活性变化;Western blot检测caspase-9活化情况.结果 冬凌草甲素能显著抑制GBC-SD细胞增殖,呈时间剂量依赖性(P＜0.05).细胞形态学观察可见冬凌草甲素可诱导细胞发生凋亡.流式细胞仪检测结果显示28 μmol/L药物处理GBC-SD细胞24h后,细胞凋亡率为51.28％±2.65％.随着药物浓度增加,GBC-SD细胞线粒体膜电位逐渐下降而caspase-3活性逐渐增强,56μmol/L组caspase-3活性是对照组的11倍.Western blot分析结果显示caspase-9酶原被激活,且活化条带随药物浓度的增加而增强.结论 冬凌草甲素可能通过细胞线粒体膜电位下降激活caspase-3并最终诱导GBC-SD细胞凋亡.     

青蒿琥酯对人淋巴细胞白血病/淋巴瘤细胞抑制作用及机理的研究

目的 观察青蒿琥酯(ART)对白血病/淋巴瘤细胞株Raji、Jurkat和急性淋巴细胞白血病(ALL)原代细胞的增殖抑制作用,以及ART与长春新碱(VCR)、阿糖胞苷(Ara-C)的细胞毒协同效应,并探讨其作用机制.方法 MTT法观察ART对Raji、Jurkat、ALL原代细胞的增殖抑制效应及ART与VCR、Ara-C的协同效应.Wright-Giemsa染色光镜下及透射电镜观察细胞凋亡的形态变化,Rhodamine-123检测线粒体跨膜电位(MMP)变化,比色法检测细胞内caspase-3浓度变化.结果 ART在体外能显著抑制Raji、Jurket细胞的增殖,对ALL原代细胞亦具有增殖抑制作用.低浓度ART与VCR、Ara-C联合,能增加VCR、Ara-C的细胞毒作用.ART作用后B/T淋巴细胞白血病/淋巴瘤细胞光镜及电镜均表现出凋亡形态学改变,线粒体跨膜电位下降,细胞内caspase-3的表达增加,呈浓度依赖性.与对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 ART对淋巴细胞白血病/淋巴瘤细胞具有抑制作用,且与VCR、Ara-C联用具有协同效应,其机制与诱导肿瘤细胞凋亡有关.ART有望开发成治疗ALL/淋巴瘤的新药.     

黄芪总苷诱导NB4细胞凋亡的线粒体通路的研究

目的 研究黄芪总苷(TA)对体外培养的人早幼粒细胞白血病细胞株凋亡的线粒体传导通路的影响.方法 将不同浓度的TA(200、300、400 μg/ml)作用于NB4细胞,体外培养48 h,使用流式细胞仪检测细胞凋亡率及线粒体膜电位的变化;采用RT-PCR测定细胞内Bcl-2和Bax mRNA变化;使用分光光度法测定细胞内caspase-3的活性变化.结果 TA作用于NB4细胞48 h后,各浓度组的凋亡率与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05),在TA(200、300、400 μg/ml)组凋亡率呈浓度依赖性增加,各组之间差异有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,各浓度组Bcl-2 mRNA及线粒体膜电位的表达明显下降,caspase-3的表达明显升高(P<0.05);Bax mRNA的表达无明显差异.结论 TA可以诱导NB4细胞凋亡,具有体外抗白血病效应,并且可能通过线粒体凋亡途径诱导细胞凋亡.     

夏枯草提取物对Jurkat细胞凋亡的影响

目的:探讨夏枯草提取物对人T淋巴瘤白血病Jurkat细胞株凋亡的影响及其机制.方法:取对数牛长期Jurkat细胞配制成2.0×105个mL-1密度的单细胞悬液,接种到96孔板,培养24 h,加入不同质量浓度的夏枯草提取物.以生理盐水处理为空白对照,继续培养48 h,分别采用四甲堆偶氮唑蓝(MTT)法测定夏枯草提取物对Jur-kat细胞的生长抑制作用;琼脂糖凝胶电泳法观察Jurkat细胞凋亡;用免疫细胞化学法检测夏枯草提取物对凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达的影响.结果:夏枯草提取物对Jurkat细胞增殖有明显的抑制作用,半数抑制率(IC50)为(53.59±3.10)mg/L;琼脂糖凝胶电泳出现典型的DNA梯彤凋亡条带.免疫细胞化学显示:与宅自对照相比,夏枯草提取物处理组Bcl-2蛋白表达减弱((12.31±1.21)% vs(40.76±1.64)%),而Bax蛋白表达增强((18.14 ±0.39)% vs(4.77±0.16)%).结论:夏枯草提取物可以抑制Jurkat细胞增殖和诱导Jurkat细胞凋亡,且这一作用可能与下调Bcl-2蛋白表达及上调Bax蛋白表达有关.     

腺苷诱导HepG2细胞凋亡过程中caspase-3,-8,-9的活性变化

目的:探讨腺苷诱导HepG2肝癌细胞凋亡过程中caspase-3,-8,-9活性变化,确定caspase-3,-8,-9在腺苷诱导的肝癌细胞凋亡中的作用。方法:用3 mmol/L腺苷处理HepG2细胞,作用48 h后,用DNA末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)和流式细胞仪定量检测凋亡细胞细胞比例;分别作用0,12,24,36,48 h,用荧光比色法检测HepG2细胞凋亡过程中caspase-3,-8,-9的活性变化,Western-blotting法检测caspase-3的活性片段;并检测加入caspase-3抑制剂后经3 mmol/L腺苷作用48 h后细胞凋亡变化情况。结果:3 mmol/L腺苷处理肝癌细胞48 h,检测到(27.5±2.1)%的细胞出现凋亡,而对照组仅有(1.1±0.1)%的细胞出现凋亡(P<0.01)。3 mmol/L腺苷处理肝癌细胞12 h后caspase-3活性开始升高,于36 h达到高峰,与对照组比较差异有显著性(P<0.05),而caspase-8,-9活性无明显变化。3 mmol/L腺苷处理肝癌细胞36 h后Western-blotting分析发现caspase-3被蛋白酶水解切断后形成的17 kU活性片段。使用caspase-3抑制剂30 min后,再经3 mmol/L腺苷作用48 h,肝癌细胞凋亡比例明显下降,抑制剂组与腺苷组比较,差异有显著性(P<0.05)。结论:在腺苷诱导肝癌细胞凋亡过程中caspase-3被活化,caspase-8和-9没有被活化,caspase-3可能参与了腺苷诱导的HepG2肝癌细胞凋亡。     

小檗碱通过ROS及caspase通路对肝癌HepG2细胞凋亡的作用

目的 探究小檗碱(BBR)对肝癌HepG2细胞的增殖抑制及作用机制.方法 采用噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度(0、10、20、40、80 μmol/L) BBR对肝癌HepG2细胞的抑制作用;采用Hoechst 33342染色观察处理后HepG2细胞形态学变化;用流式细胞仪检测HepG2细胞凋亡率;间接荧光标记法检测BBR对细胞内活性氧簇(ROS)水平的影响;JC-1染色法检测细胞内线粒体膜电位的变化;应用Western blot法检测凋亡相关蛋白Bax、caspase-3、Cleaved-caspase-3的表达变化.结果 MTT法显示BBR可呈剂量、时间依赖性抑制肝癌HepG2细胞活力(P＜0.05);Hoechst 33342染色发现细胞形态发生明显变化,0μmol/L BBR处理的细胞呈淡蓝色,处理组细胞核固缩,形成凋亡小体,细胞凋亡率与药物浓度呈正相关(P＜0.05).流式细胞术发现BBR能使细胞内ROS升高,线粒体膜电位水平下降.Western blot法显示随着药物浓度升高,Bax、Cleaved-caspase-3、cleaved-聚腺苷二磷酸核糖聚合酶表达增强,Bcl-2蛋白表达降低,凋亡相关蛋白caspase-3表达下降.结论 BBR在体外可能通过增加ROS、提高促凋亡蛋白Bax并激活caspase-3表达抑制肝癌HepG2细胞增殖并诱导细胞凋亡.     

鱼藤素对乳腺癌细胞MDA-MB-231线粒体通透性转换孔的作用

目的研究鱼藤素对乳腺癌细胞MDA-MB-231线粒体通透性转换孔的作用。方法MTT法检测鱼藤素对MDA-MB-231细胞的增殖抑制作用;AnnexinⅤ-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率;罗丹明123单染法观察线粒体膜电位变化;蛋白免疫印迹法检测细胞质中Cytc的表达;分光光度法检测caspase-3蛋白活性;Fluo-3/AM荧光指示剂检测细胞内钙离子浓度变化;RT-PCR和蛋白免疫印迹法检测Bcl-2和Bax mRNA及其蛋白表达。结果鱼藤素对MDA-MB-231细胞增殖具有明显的抑制作用,呈时效和量效依赖关系(P0.05);鱼藤素处理细胞后,细胞线粒体膜电位降低,细胞质内Cytc蛋白表达水平升高,caspase-3活性明显提高,与未处理组相比差异具有统计学意义(P0.01)。流式细胞术检测显示细胞凋亡率和细胞内钙离子浓度随鱼藤素浓度的增加而增多;RT-PCR和蛋白印迹检测结果发现鱼藤素能使Bcl-2 mRNA和蛋白表达减少,而Bax表达增加。结论鱼藤素对乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖抑制、诱导凋亡作用可能与细胞内钙超载,Bcl-2和Bax表达改变影响线粒体通透性转换孔开放,诱导线粒体膜电位降低及Cytc释放有关。     

Plating densities, alpha- difluoromethylornithine effects and time dependence on the proliferation of IEC- 6 cells

目的　观察接种密度和α 二氟甲基鸟氨酸 (DFMO)对小肠上皮细胞 (IEC 6 )体外增殖的影响。方法　IEC 6细胞以不同密度接种于 96孔培养板 ,加入或不加DFMO。细胞接种后第 1,2 ,3,4 ,5 ,6和 7天 ,分别用细胞计数板直接计数细胞数量 ,用噻唑蓝比色法 (MTT法 )测定波长 5 70nm处的光密度 (OD)值 ,确定细胞的增殖活力。结果　OD值和细胞数量具有正相关 (r=0 95 4,P <0 0 1) ;较高接种密度 (>0 5× 10 4 细胞 /孔 )组接种后第 2天 ,细胞生长抑制 ,尤其是密度增加到 4× 10 4 细胞 /孔时 ,第 2～第 3天OD值逐渐增加 ,第 4天明显增加 ,第 5天达高峰 ,此后OD值开始下降。而低密度 (0 2× 10 4 细胞 /孔 )接种后第 4天 ,细胞生长出现抑制 ,此后其生长与其它密度相似。另外 ,加入DFMO后 1～ 3天 ,完全抑制了细胞增殖 ,此后与对照组一样 ,细胞逐渐生长。结论　IEC 6细胞增殖与接种密度和培养时间有关 ;随着培养时间的延长 ,DFMO抑制细胞增殖作用具有可逆性 ,其与培养时间延长有关。     

二氟甲基鸟氨酸对人肺癌细胞生长特性的影响及其相关基因ALT-04ag表达调控

目的研究抑制多胺生物合成对人肺癌细胞生长特性的影响及该影响与肺癌相关基因ALT-04ag表达调控的关系。方法以细胞形态观察、生长曲线、流式细胞分析、DNA电泳图谱等方法,研究鸟氨酸脱羧酶(ODC)不可逆抑制剂二氟甲基鸟氨酸(DFMO)对人肺鳞癌细胞L78生长特性的影响;根据人肺癌相关抗原ALT-04ag基因片段序列设计引物进行RT-PCR及用抗相关抗原单抗ALT-04进行免疫组化,分别检测ALT-04ag相关基因的mRNA及蛋白表达。结果5mmol/LDFMO作用人肺鳞癌细胞L785d,引起ALT-04ag基因mRNA和蛋白表达下调,并能明显抑制细胞生长、诱导细胞凋亡。同时加入外源性腐胺(Pu)可阻止上述基因及细胞形态的变化。结论抑制多胺生物合成引起的L78细胞生长抑制和细胞凋亡的诱导与肺癌相关抗原基因表达的下调有关。     

来曲唑通过下调bcl-2和上调caspase-3的表达促进人子宫肌瘤细胞调亡

目的 探讨来曲唑对人子宫肌瘤细胞增殖和凋亡以及bcl-2和caspase-3表达的影响. 方法 来曲唑处理原代培养的人子宫肌瘤细胞,用MTT法测定细胞生长曲线,流式细胞术测定细胞凋亡率,放射免疫法测定培养基中雌二醇水平,用实时定量聚合酶链反应和蛋白印迹检测bcl-2和caspase-3表达. 结果 来曲唑呈浓度和时间依赖性抑制子宫肌瘤细胞的增殖,降低子宫肌瘤细胞的凋亡率,同时呈浓度依赖性降低子宫肌瘤细胞雌二醇的分泌.来曲唑呈浓度依赖性降低bcl-2的表达,增加caspase-3的表达. 结论 来曲唑抑制子宫肌瘤细胞的增殖,促进其凋亡,其机制可能与来曲唑减少雌二醇的分泌、降低bcl-2表达和增加caspase-3表达有关.     

二氟甲基鸟氨酸对人肺癌细胞L78细胞生长抑制、凋亡诱导及相关基因的表达调控

目的：研究二氟甲基鸟氨酸(DFMO)对人肺癌细胞L78生长及相关基因表达的影响。方法：应用细胞生长曲线、端粒酶活性、细胞形态及DNA电泳观察细胞生长速率及细胞凋亡情况，同时应用Northern blot及免疫组化技术检测相关基因的表达。结果：(1)DFMO处理的L78细胞与对照组相比生长受到抑制，同时，诱导细胞凋亡增多。(2)在DFMO作用下，L78细胞df4基因被诱导表达，同时伴有P21^ras表达下调，Fas基因表达的上调。结论：DFMO抑制L78细胞生长，诱导凋亡的作用与其对df4基因的诱导密切相关，DFMO通过对df4的诱导．调控P21^ras和Fas的表达．     

BEZ235 联合AZD6244 对宫颈癌 细胞增殖、迁移的影响

目的 探讨联合应用PI3K 和mTOR 双重靶向抑制剂BEZ235 及上皮间质转换（EMT）抑制 剂AZD6244 对人宫颈癌细胞增殖、迁移能力的影响。方法 采用MTT 法分析BEZ235、AZD6244 对Hela 和SiHa 细胞增殖能力的影响,损伤愈合实验检测BEZ235、AZD6244 对Hela和SiHa 细胞迁移能力的影响, Western blot 检测BEZ235、AZD6244 对EMT 相关标志物蛋白的表达变化。结果 BEZ235、AZD6244 对宫 颈癌细胞Hela 和SiHa 的增殖有协同抑制作用;联合应用BEZ235、AZD6244 可以通过EMT 途径抑制Hela 和SiHa 细胞的侵袭、迁移。结论 BEZ235、AZD6244 联合应用可体外抑制Hela 和SiHa 细胞的增殖、迁移, 其部分机制是通过抑制EMT 途径实现的。     

葛根多糖对PC12细胞增殖的损伤作用

目的 :探讨葛根多糖 (totalpolysaccharideofPueraria ,TPP)对嗜铬细胞瘤细胞PC 12增殖的影响。方法 :用细胞培养的方法检测TPP单独或与H2 O2 一起对PC 12细胞活力的影响 ;MTT法检测细胞活力 ,Griess试剂测定细胞外液中的亚硝酸盐含量 ;次黄嘌呤黄嘌呤氧化酶化学发光体系测定细胞外液中的SOD活性。结果 :0 .0 1～ 1.0mg·ml 1的多糖明显地抑制细胞生长 ,并可增强H2 O2 导致的细胞损伤 (P <0 .0 5 ) ;细胞外液中的SOD活性随多糖的浓度增加而降低 ;其亚硝酸盐产物增多 ,并呈浓度依赖性。结论 :TPP对嗜铬细胞瘤细胞PC 12的增殖具有损伤作用。     

己酮可可碱对人肝癌细胞株Hep3b的放射增敏作用

目的观察己酮可可碱(PTX)对人肝癌细胞株Hep3b的放射增敏作用。方法以Hep3b人肝癌细胞株为研究对象,应用MTT法检测PTX的药物毒性;应用克隆形成实验(colony forming assay)观察PTX对Hep3b细胞株的放射敏感性的影响;流式细胞仪(FCM)技术测定照射后Hep3b细胞株细胞周期的再分布并观察PTX能否去除放射引起的细胞周期阻滞。结果不同浓度的PTX作用于人肝癌Hep3b细胞株48 h后,其细胞毒性呈剂量依赖性,最适浓度为2 mmol/L。PTX能明显降低放射后Hep3b细胞的克隆形成率,其放射增敏比为2.68±0.24(P>0.05)。FCM实验结果显示,照射明显导致Hep3b细胞株G2期阻滞,Hep3b细胞在照射后20 h G2/M期比例分别为86.8%和14.8%(P<0.05),PTX能够去除放射引起的Hep3b细胞G2期阻滞。结论PTX对Hep3b细胞株有放射增敏作用,其作用机制可能与PTX去除放射引起的G2期阻滞有关。     

NADPH氧化酶在人真皮成纤维细胞氧化应激损伤中的作用

目的探讨NADPH氧化酶在人真皮成纤维细胞氧化应激损伤中的作用。方法H2O2 构建氧化应激模型,将实验分为正常 组、氧化损伤组和NADPH氧化酶抑制剂（DPI）组,MTT检测细胞活力,DCFH-DA 荧光探针检测细胞内活性氧（ROS）改变, Western blot分析NADPH氧化酶胞膜亚基gp91phox表达变化。结果H2O2 对成纤维细胞的氧化损伤呈时间和浓度依赖,H2O2 700 μmol/L处理24 h后细胞活力下降约40%（P<0.05）,ROS升高2倍（P<0.05）。而抑制剂组细胞活力较氧化损伤组增加20% （P<0.05）,ROS下降至正常水平（P<0.05）。Western blotting结果显示氧化损伤组gp91phox表达随H2O2 浓度逐渐升高,而抑制 剂组表达接近正常水平。结论H2O2 可通过影响NADPH氧化酶特别是胞膜亚基gp91phox引发成纤维细胞氧化损伤。     

2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖诱导人结肠癌SWlll6凋亡的作用

目的:研究D-葡萄糖衍生物2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖(COPADG)对人结肠癌SWlll6细胞生长增殖的影响,进而探讨COPADG诱导SWlll6细胞凋亡的作用.方法:用不同浓度的COPADG处理SWlll6,采用MTT法测定其对SWlll6细胞生长增殖的抑制作用,通过DNA琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术观察其对SWlll6细胞诱导凋亡的效应.结果:COPADG能抑制SWlll6细胞的生长增殖,并呈一定的浓度、时间依赖性;COPADG能诱导结肠癌SWlll6细胞凋亡;DNA琼脂糖凝胶电泳呈现典型的DNA梯形条带图谱;流式细胞仪检测出现典型的亚二倍体凋亡峰.结论:COPADG在体外可显著诱导结肠癌SWlll6细胞凋亡.     

局部分泌的血管抑素K（1—3）蛋白抑制人脑胶质瘤生长的实验研究

目的 探讨局部分泌血管抑素Ｋ（１￣３）蛋白〔ａｎｇｉｏｓｔａｔｉｎ Ｋ（１￣３）,ＡＫ（１￣３）〕治疗人脑胶质瘤的可行性。方法 构建ＡＫ（１￣３０基因的真核表达载体ｐｃＤＮＡ－ＳＡＫ（１￣３）,经脂质体法将该载体转染入人脑胶质瘤细胞ＳＨＧ４４、行Ｇ４１８筛选。用电镜和流式细胞仪测定转染细胞的生物学性状,以内皮细胞抑制实验和免疫荧光实验检测该细胞表达的ＡＫ（１￣３）蛋白。应用裸鼠皮下致瘤性实验,结合