DNA印迹试验

DNA印迹是一种将电泳分离的DNA片段转移到固相支持物上用探针与靶DNA进行杂交的技术,又称Southem杂交。利用一种或多种限制内切酶酶切消化的基因组DNA,或经PCR获得扩增片段,经琼脂糖凝胶电泳,所得的DNA片段按分子大小分离,DNA片段经琼脂糖凝胶、变性,并将凝胶中的单链DNA片段转移到固相支持物上(多为硝酸纤维素膜,NC或尼龙膜),     

浅谈炮制后对山茱萸药材中熊果酸含量的影响

通过运用薄层扫描法及2000年版<中国药典>山茱萸项下熊果酸含量的测定方法对山茱萸药材中果核及酒制后的熊果酸含量进行测定,结果表明,果核中熊果酸含量仅占山茱萸果肉含量的12%,酒制后熊果酸含量流失10%左右,因此,我们应该在传统中药炮制技术和理论的基础上,严格规范操作,以减少熊果酸的含量丢失,从而达到控制药材质量的目的.     

褪黑素延缓糖尿病大鼠肾脏细胞衰老的机制研究

目的 观察褪黑素(MLT)对糖尿病肾病(DN)大鼠的影响,探究MLT延缓大鼠DN进程的作用机制.方法 SD雄性大鼠15只随机分成正常组、模型组、MLT组,每组各5只.模型组及MLT组采用腹腔注射法给予链脲佐菌素(STZ)55 mg/kg,建立DN大鼠模型.成功建立模型后,MLT组采用腹腔注射给予MLT 10 mg/(kg·d),正常组与模型组给予等体积生理盐水.连续给药16周后,取大鼠腹主动脉血及肾脏组织,检测血清中尿素氮(BUN)、血肌酐(SCR);Masson染色观察肾脏组织形态学变化;β-半乳糖苷酶染色(SA-β-gal)检测肾脏细胞衰老变化;采用Western blot法检测肾脏组织中自噬标志物(p62、LC3B)、肌球蛋白轻链激酶(MLCK)及细胞周期蛋白依赖激酶(CDK)抑制因子(p16、p53和p21)的表达水平.结果 与正常组比较,模型组血清中BUN、SCR水平升高,肾间质纤维化明显,肾脏组织自噬水平降低,MLCK、p16、p53、p21表达水平均升高.给予MLT后,与模型组比较,MLT组血清中BUN、SCR水平降低,肾脏组织衰老延缓,病理损伤明显减轻,肾脏组织自噬水平也得到改善,MLCK、p16、p53、p21表达水平均降低.结论 MLT可以通过增强自噬、延缓衰老进而改善DN大鼠的DN进程.     

全反式维甲酸及其衍生物4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯对A549细胞增殖和OPN表达的影响

目的 研究全反式维甲酸(ATRA)及其新型衍生物4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯(ATPR)对人肺腺癌细胞株A549增殖和骨桥蛋白(OPN)表达的影响及其相关性.方法 以A549细胞株为研究对象,分别予以不同浓度的ATRA及ATPR进行干预,应用四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)法测定A549细胞的增殖情况;Western...     

骨桥蛋白和P21在原发性肝癌中的表达及其临床意义

目的　探讨骨桥蛋白(OPN)和P2 1在原发性肝癌组织中的表达及它们在肝癌转移中的作用。方法　采用免疫组化S P法检测69例原发性肝癌组织中OPN和P2 1的表达情况。结果　①OPN和P2 1的阳性表达主要定位于癌细胞的细胞浆;OPN、P2 1在69例肝癌组织中阳性表达率分别为72 .5 % (5 0 / 69)和62 .3 % (4 3 / 69)。②在发生转移的肝癌组织中OPN和P2 1阳性表达率分别为84.2 % (3 2 / 3 8)和76.3 % (2 9/ 3 8) ,高于无转移的肝癌组织中OPN(5 8.1% ,18/ 3 1)和P2 1(4 5 .2 % ,14 / 3 1)阳性表达率,差异具有显著性,P <0 .0 5。③两者均阳性表达的3 5例肝癌中有2 4例(74.3 % )已发生转移,与两者均阴性表达的11例肝癌中仅有1例(9.1% )发生转移比较差异有显著性,P <0 .0 5 ,提示OPN和P2 1均阳性表达与肿瘤转移的发生密切相关。④OPN和P2 1的表达与肿瘤的大小、AFP水平、有无HBV感染、肿瘤分化、性别、年龄等因素无关,但与肿瘤侵袭转移的发生有关,P <0 .0 5。⑤OPN和P2 1的表达呈显著正相关(r =0 .2 5 7,P <0 .0 5 )。结论　OPN和P2 1的表达与肝癌侵袭转移的发生有密切关系,两者均阳性表达时对预测肝癌已发生转移具有指导意义。     

急性心肌梗死的女性患者临床特点分析

目的分析女性急性心肌梗死(AMI)患者的临床特点,治疗情况及预后。方法所选患者按性别分为男性AMI组和女性AMI组,比较两组间危险因素、临床特征、病死率等方面的差异,统计结果以P<0.05为差异有统计学意义。结果女性组平均发病年龄、农村患者比例、住院病死率均高于男性组(P<0.05或P<0.01),发病后及时入院者较男性组少(P<0.01);女性组有高血压史、糖尿病史、发病前2周有呼吸道和肠道感染史、无明显诱因、非Q波型心肌梗死、合并心源性休克、心衰者均显著多于男性组(P<0.05)。结论女性AMI的病死率显著高于男性AMI,应引起临床重视。     

牙齿美容粘接修复的机理

我们进行了系列研究,除扫描电镜观察,还用最新型60SXR—FTIR付里叶变换红外光谱分析技术,结合X射线光电子能谱来研究常用四类粘接剂,与牙釉质、牙本质间相互作用,探索粘接机理。得出较完整的初步结沦。 扫描电镜观察到四类粘接剂,除Cluma Dentin Bond未能渗入处理牙本质外,其它的均能渗入至处理牙釉质,牙本质中,形成树脂突,产生机械嵌合力。此结果表明,经处理牙釉质、牙本质,大大增加了粘接有效表面积,可湿性增加,接触角9减少,有利粘接剂的渗透,与牙齿嵌合,产生机械嵌合力。 红外光谱证实依据差谱图,粘接剂和牙釉质、牙本质彼此间存有作用,此作用是与OH、NH、C=O及含有O的基团有关。根据广泛酸碱理论,OH、NH属酸性基团,含O基团是碱性。粘接剂上C=O,C-O-C,P=O,P-O,OH都含有O基团,而牙釉质,牙本质中羟基磷酸钙、胶原上有Ca~(++)、OH、NH基团,这些基团相遇产生酸碱缔合作用,带有孤对电子O与OH、NH的H形成氢键,与Ca~(++)形成配合位键,它反映在红外光谱的差谱图上,是谱带发生相应的变化。 X射线光电子能谱检测也证实牙釉质、牙本质的P、Ca、N的结合能力,在与粘接剂粘接后都有明显降     

人血清载脂蛋白A-I的分离、纯化及其测定

用超离心法制备人血清高密度脂蛋白(HDL);甲醇/氯仿脱脂;经Sephadex G-150层析及DEAE-纤维素(DE-52)离子交换得纯化载脂蛋白A-I(Apo A-I),免疫新西兰兔,获得效价为1:32的特异性抗人Apo A-I抗血清。用本室建立的单向火箭免疫电泳法测定了158名健康中年人与9名老人的血清Apo A—I含量,结果发现:β-脂蛋白<5g/L,总胆固醇<2mmol/L的人血清Apo A-I含量男女分别为2.06±0.16g/L和2.07±0.15g/L;而β脂蛋白≥5g/L,总胆固醇≥2mmol/L的人血清Apo A-I含量男女分别为1.75±0.15g/L和1.82±0.1g/L,由此可见,血脂正常的男性和女性的Apo A—I含量均显著高于血脂高的男性和女性。80岁以上老年人的血清Apo A-I含量为2.1±0.1g/L,也在正常范围。与文献报道比较,我国人的血清Apo A-I含量高于外国人,这与我国人HDL水平较外国人高一致。