结核分枝杆菌甲硫氨酰tRNA合成酶与底物及其类似物的结合比较

目的 建立重组结核分枝杆菌甲硫氨酰tRNA合成酶(MetRS)的制备方法,分析底物及其类似物与重组蛋白的结合能力。方法 将结核分枝杆菌MetRS(MtMetRS)基因置于不同启动子调控之下。通过表达筛选选择重组蛋白大量制备的条件,使用分子筛制备重组蛋白,并验证其分子量。使用Thermal Shift Assay比较MetRS底物及其类似物与重组结核分枝杆菌MetRS的结合能力。结果 通过不同重组质粒的表达筛选,确定重组蛋白制备方法。Thermal Shift Assay分析提示甲硫基腺苷酸(methionyl-adenylate,MetAde)与焦磷酸同时存在时可以提高重组蛋白的热稳定性。结论 成功制备出具有天然活性的重组MtMetRS蛋白;应以甲硫基腺苷酸和焦磷酸分子结构为方向,设计、筛选结核分枝杆菌MetRS抑制剂。     

心瓣膜置换术后急性肾功能衰竭伴乳糜胸一例

患者男,36岁。心悸3个月余,反复咳嗽、双下肢水肿10个月余入院。查体：胸骨右缘第2肋间闻及舒张期叹气样杂音,心尖区闻及3/6级收缩期吹风样杂音。     

尿脱落细胞荧光原位杂交技术对尿路上皮癌的诊断价值

目的 探讨尿脱落细胞荧光原位杂交技术(FISH)对尿路上皮癌(UC)的诊断价值。方法 回顾性分析127例行尿液FISH和尿脱落细胞学检测患者的临床资料,以病理诊断为金标准,比较两种方法单独或联合检测对UC的诊断价值。结果 FISH检测诊断UC的灵敏度为73.91%(68/92),特异度为91.43%(32/35);诊断高级别UC的灵敏度为82.67%(62/75),低级别UC的灵敏度为35.29%(6/17)。尿脱落细胞学检测诊断UC的灵敏度为51.09%(47/92),特异度为88.57%(31/35);诊断高级别UC的灵敏度为60.00%(45/75),低级别UC的灵敏度为11.76%(2/17)。联合检测诊断UC的灵敏度为79.35%(73/92),特异度为82.86%(29/35);诊断高级别UC的灵敏度为88.00%(66/75),低级别UC的灵敏度为41.18%(7/17)。结论 FISH检测诊断UC的灵敏度高于尿脱落细胞学检测;与尿脱落细胞学检测相比,两者联合检测可以明显提高诊断低级别UC的灵敏度。     

开腹与腹腔镜手术治疗子宫颈残端癌的临床疗效分析

目的:探讨子宫颈残端癌临床表现及预后,并分析开腹手术与腹腔镜手术治疗子宫颈残端癌的疗效差异。方法:回顾性分析2009年1月至2019年12月在四川大学华西第二医院接受手术治疗的子宫颈残端癌患者的临床资料、随访生存情况,对比开腹组和腹腔镜组子宫颈残端癌的围手术期结局和生存结局。结果:共纳入64例子宫颈残端癌患者,病理类型包括鳞癌52例(81.3%),非鳞癌12例(18.7%);所有患者均接受残端子宫颈癌广泛切除手术,48例(75.0%)为开腹手术,16例(25.0%)为腹腔镜手术;国际妇产科联盟(FIGO,2018年)分期：Ⅰ期36例(56.3%),Ⅱ期15例(23.4%),Ⅲ期13例(20.3%)。随访期内7例出现复发,6例死亡。开腹组患者的5年无病生存率为89.5%,腹腔镜组为92.3%,差异无统计学意义((印)P(正)=0.670);开腹组患者的5年总体生存率为93.6%,腹腔镜组为90.9%,差异无统计学意义((印)P(正)=0.952)。但开腹组术中出血量明显高于腹腔镜组(500 ml vs 100 ml,(印)P(正)<0.001)。结论:子宫颈残端癌治疗预后较好,生存率较高,与开腹手术相比,腹腔镜手术并不增加子宫颈残端癌的复发风险,也未降低生存率,两组肿瘤学结局相似。     

全胸腔镜二尖瓣成形术的临床应用研究

目的总结全胸腔镜二尖瓣成形术在心脏外科应用的临床经验,并评价其安全性和疗效。方法 20例二尖瓣疾病患者接受全胸腔镜二尖瓣成形术治疗,记录患者手术时间、体外循环时间、主动脉阻断时间、术中失血量、术后胸腔引流量等手术情况,及随访19个月的死亡、心功能恢复情况。结果手术均顺利完成,无中转正中开胸。18例一次成形成功,2例首次成形效果欠佳,再次阻断后重新成形成功。术中所有患者均使用成形环,其余成形方法包括瓣叶折叠(4例)、交界缝合(3例)、人工腱索(10例)、心包补片(2例);同期行房缺或卵圆孔修补6例、三尖瓣成形10例、右上肺静脉异位引流矫治1例、左房黏液瘤切除3例、二尖瓣赘生物清除1例。患者手术时间(259.50±48.88)min,体外循环时间(148.15±41.17)min,主动脉阻断(85.15±20.74)min,术中失血量(132.50±56.84)m L,术后24 h胸腔引流量(106.50±102.10)m L,胸腔引流管留置时间(2.75±0.79)d,总输血量(206.00±202.70)m L。1例心包致密粘连患者术后引流量偏多,输入较多库血;另有1例术后并发严重肺部感染、感染性休克,经联合抗感染后治愈。患者术后呼吸机辅助(7.15±5.17)h,术后ICU停留(26.50±9.62)h,术后住院(9.70±4.51)d。全部患者无死亡,出院前复查心脏彩超提示二尖瓣未见明显狭窄或返流。全组随访(10.30±4.88)个月,无死亡,心功能恢复至Ⅰ级19例,Ⅱ级1例,较术前改善(P0.05);随访心脏彩超提示二尖瓣轻度关闭不全1例,左心房内径和左心室舒张末期内径比术前缩小(P0.05)。结论全胸腔镜二尖瓣成形术已日趋成熟,创伤小,出血和输血少,并发症少,术后恢复快,安全可靠,效果确切,值得临床推广应用。     

胸骨上段小切口心脏瓣膜置换术的临床研究

目的总结经胸骨上段小切口行主动脉瓣或二尖瓣置换术的临床经验,并评价其安全性和疗效。方法选取经胸骨上段小切口行主动脉瓣或二尖瓣置换术的9例瓣膜性心脏病患者为微创组;选择同期经胸骨正中切口进行相应手术的9例患者为传统组。比较两组患者的临床资料,评价经胸骨上段小切口心脏瓣膜置换术的安全性和疗效。结果微创组9例患者手术全部成功,其中主动脉瓣置换术7例(2例使用生物瓣),二尖瓣置换术1例,二尖瓣置换+三尖瓣成形+主动脉瓣环扩大+主动脉瓣置换术1例,植入主动脉瓣膜型号19～25 mm,无1例延长手术切口。术后无死亡患者,无出血及胸部切口愈合不良,术后出现右侧胸腔积气和右侧胸腔积液各1例,均经胸腔引流后治愈出院。与传统组相比,微创组手术时间、体外循环(CPB)时间和主动脉阻断(ACC)时间稍延长(P 0. 05),但并不延长术后呼吸机辅助时间和ICU入住时间(P 0. 05),且术后引流量和总输血量减少(P 0. 05),皮肤切口长度及术后住院时间缩短(P 0. 05)。两组患者术后并发症发生率比较,差异无统计学意义(P 0. 05)。微创组患者术后随访1～13个月,心脏彩超提示人工瓣膜未见明显异常,心功能恢复至Ⅰ级。结论经胸骨上段小切口行主动脉瓣或二尖瓣置换术可以取得与经胸骨正中切口同样的效果,但创伤更小,失血和输血更少,术后恢复更快。     

安乃近的台阶型变温变湿稳定性试验

目的 研究湿度对固体药物稳定性影响的台阶型程序变温变湿法.方法 作者以安乃近为模型药物,采用台阶型程序变湿法和台阶型程序变温法进行试验.结果 求得了Ea、m、A和t0.9,等动力学参数.结论 新方法测定结果较好,操作简单,对仪器要求较低.     

外泌体膜蛋白功能研究进展

外泌体是细胞分泌的直径为30-150 nm的脂质双层膜囊泡，其含有蛋白质、脂质和核酸。外泌体是细胞间进行信息交流的重要载体，可通过传递各种蛋白质、生物活性脂质和遗传信息来改变受体细胞的表型和功能，与癌症、感染性疾病和神经退行性疾病等的发生和发展密切相关。直接靶向外泌体以抑制其在介导疾病中的作用，或开发外泌体作为载体运送生物大分子和天然药物分子进入细胞，有望成为疾病新的治疗策略。外泌体生物功能的发挥取决于受体细胞识别、结合并内化外泌体，而这一过程依赖于外泌体膜蛋白的种类和功能。本文聚焦于外泌体的膜蛋白，对这些膜蛋白进行分类并阐述其功能。     

香烟烟雾提取物对小鼠精子活力的影响

目的探讨香烟烟雾中所含外源活性氧物质(ROS)对小鼠精子活力的影响。方法香烟燃点后烟雾溶于二甲亚砜,配制成高ROS含量的香烟烟雾浓缩物(CSC)。釆用4周龄C57BL/6J小鼠45只,实验设置对照组(0mg/ml CSC)、低剂量组(0.2mg/ml CSC)和高剂量组(2.0mg/ml CSC)。连续饲喂含有CSC的饮用水4周,观察小鼠的生殖系统发育情况和可能的全身毒性反应,并检测肝功能指标。处死小鼠后即刻检测精子浓度和活力,检测睾丸内抗氧化酶类的表达水平,并制片观察睾丸组织病理变化。结果与对照组相比,低剂量和高剂量组小鼠精子浓度无显著变化,但高剂量组精子活力呈现显著下降。CSC低剂量组和高剂量组小鼠连续饲喂4周后精子总活动力分别为32%和19%,A级活动精子分别为13%和12%,均显著低于对照组(61%和24%)(P0.05)。但在本实验剂量范围内,CSC对小鼠发育和生殖系统无明显毒性损伤,对睾丸抗氧化基因表达无显著影响。结论 CSC对小鼠精子活力有显著影响,但是对小鼠全身和生殖系统无明显毒性作用。CSC饲喂法可推荐用于诱导小鼠弱精子症模型。     

植物雌激素在雌性生殖系统中的抗氧化作用

目的 探讨植物雌激素白藜芦醇、染料木黄酮和大豆黄酮在人类宫颈癌细胞HeLa、乳腺癌细胞MCF7和卵巢癌细胞SK-OV-3中对抗氧化信号通路的影响.方法 将抗氧化响应元件ARE报告基因转染入HeLa、MCF7和SK-OV-3细胞.稳定表达ARE荧光报告基因后,细胞培养基中分别加入50、25、12.5、6.25、3.125、1.56和0μmol/L的3种植物雌激素,检测ARE诱导倍数的变化.分别检测3种植物雌激素24h处理后诱导细胞中抗氧化基因Nrf2、SOD1、SOD2、SOD3、HO-1、GSTm、GSTp、NQO1、CAT和CLGC等的mRNA表达水平.在MCF7细胞中,检测25μmol/L的白藜芦醇和大豆黄酮对野生型Keap1蛋白抑制Nrf2-ARE表达的影响.结果 在MCF7、HeLa和SK-OV-3细胞中,3种植物雌激素均能诱导ARE报告基因的高表达,并促进Nrf2、SOD3、GSTp、CAT和CLGC等抗氧化基因的高表达.同时,25μmol/L的白藜芦醇和大豆黄酮在MCF7细胞中能够有效淬灭Keap1蛋白对ARE表达的抑制作用.结论 植物雌激素白藜芦醇、染料木黄酮和大豆黄酮能够在人类宫颈癌细胞HeLa、乳腺癌细胞MCF7和卵巢癌细胞SK-OV-3中诱导抗氧化信号通路.诱导效应具有剂量依赖性和组织特异性.转录调控蛋白Keap1可能参与了诱导反应机制.