排序方式: 共有89条查询结果,搜索用时 15 毫秒
1.
目的为探讨丙型肝炎病毒(HCV)F蛋白反式激活蛋白2(HCV FTP2)的功能,在真核生物酵母细胞中表达HCV FTP2基因.方法以HepG2细胞来源的mRNA作为模板,经过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增HCV FFP2基因,克隆到pGEM-T载体中,双酶切后回收连接到酵母表达质粒pGBKT7中表达.提取酵母蛋白质,进行十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western blot免疫印迹分析.结果成功构建HCV FTP2基因酵母表达载体,Western blot免疫印迹显示HCV FTP2基因在酵母细胞中表达成功.表达产物相对分子质量27kD.结论HCV FTP2在酵母中表达成功. 相似文献
2.
目的 探讨索拉非尼联合局部冷冻消融治疗进展期乙型肝炎病毒(HBV)相关性肝细胞癌(HCC)的疗效及安全性.方法 收集2007年7月-2009年9月收治的102例进展期肝细胞癌患者,均为HBV感染,随机分为2组,S+C组(n=50)给予索拉非尼联合冷冻消融治疗,C组(n=52)仅给予冷冻消融治疗.每4~6周按照实体瘤疗效评价标准(RECIST)进行疗效评价,治疗终点为肿瘤进展或出现不可耐受的毒性.按美国癌症研究所的常规毒性判定标准(NCI-CTC)评价治疗后的不良反应,随访生存期及肿瘤进展情况.结果 S+C组2例完全缓解(CR),9例部分缓解(PR),22例疾病稳定(SD),疾病控制率(DCR)为66.0%.C组0例CR,4例PR,19例SD,DCR为44.2%.S+C组患者中位生存期(OS)和中位肿瘤进展时间(TTP)分别为11.0和6.0个月,而C组分别为7.5和3.5个月,两组间差异有统计学意义(P<0.01).S+C组患者出现皮疹、高血压、手足综合征、腹泻、肝功能异常、白细胞减少、上消化道出血等不良反应的比例分别为62%、54%、42%、42%、34%、20%和12%,其中发生3级以上严重并发症的患者分别为4%、2%、22%、6%、6%、4%、6%.结论 索拉非尼联合局部冷冻消融治疗进展期HCC安全、有效,能显著延长进展期HCC患者的生存期及肿瘤进展时间. 相似文献
3.
HBC抗原是乙肝病毒最小编码杠X基因区编码的蛋白,研究证明它与HBV相关性肝癌的发生有关;抑癌基因p53的变异或失活也与肝细胞癌(HCC)的发生密切相关。研究HBX抗原与p53的相互作用关系,有助于进一步揭示HBV相关性肝癌的发病机制。 相似文献
4.
5.
目的探讨氩氦刀术前中性粒细胞/淋巴细胞比值(neutrophil/lymphocyte ratio,NLR)与进展期肝癌患者术后生存期的关系。方法回顾性分析2008—2009年在我院行氩氦刀冷冻消融治疗的150例进展期肝癌患者临床资料,根据术前NLR中位数(2.94)将患者分为2组(高NLR组和低NLR组),对2组进行生存分析和Cox回归分析。结果氩氦刀冷冻消融术前病理组织分化程度、NLR和肝硬化Child-Pugh分级是术后进展期肝癌患者生存期的影响因素。术前高NLR组患者生存期为5个月(95%CI 3.5~6.4),而低NLR组患者生存期为9个月(95%CI 6.9~11.0),2组生存期差异有统计学意义。结论 NLR2.94的进展期肝癌患者行氩氦刀冷冻消融治疗预后较差。 相似文献
6.
ConA性小鼠肝损伤模型的研究及应用 总被引:9,自引:0,他引:9
自身免疫性肝病、病毒性肝炎等所致的肝损害 ,均与T淋巴细胞的活化密切相关[1] ,而多年来所应用的实验肝损害模型(如细菌脂多糖、D 氨基半乳糖所介导的肝损害 ) ,多不能很好地反映这一病理特点。 1992年 ,Tiegs等[2 ] 成功地应用刀豆蛋白A(ConA)诱发了小鼠特异性肝损伤 ,这一实验模型是近年来新发展起来的由T淋巴细胞介导的肝损害 ,它的建立和应用为深入研究肝细胞损害的细胞学与分子学机制以及进行治疗药物筛选提供了更为方便和理想的实验动物模型。本文综述这一肝损害模型的研究与应用现状。一、ConA肝损害模型特点(一 )… 相似文献
7.
目的利用抑制性消减杂交(SSH)技术构建重组干扰素β(IFNβ)刺激人肝癌细胞系HepG2差异表达基因的cDNA消减文库,筛选IFNβ下凋HepG2相关基因。方法重组IFNβ2000U/ml刺激对数生长期HepG2细胞,以生理盐水作用的HepG2细胞为阴性对照;制备细胞裂解液,从中提取mRNA并逆转录为cDNA,经Rsa Ⅰ酶切后将实验组cDNA分成两份,分别与两种不同的接头连接,再与对照组cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性PCR,将产物与T/A载体连接,构建cDNA消减文库,并转染大肠埃希菌进行文库扩增,随机挑选克隆PCR后进行测序及同源性分析。结果成功构建重组IFNβ刺激HepG2细胞差异表达基因的cDNA消减文库。文库扩增后,得到58个阳性克隆,进行菌落PCR分析,均得到200~1000bp插入片段。随机挑选其中35个插入片段测序,并通过生物信息学分析,结果共获得12种编码基因。结论应用SSH技术成功构建了IFNβ刺激HepG2细胞差异表达基因的cDNA消减文库,为进一步了解IFNβ在肝细胞内的免疫调节机制提供了依据。 相似文献
8.
p14ARF基因通过p53途径对肝癌细胞的生长的影响 总被引:7,自引:2,他引:5
目的 探讨 p14 ARF对含有野生型 p5 3(wtp5 3)的肝癌细胞生长的影响及其作用机制。方法 将含p14 ARF的基因转染到人肝癌细胞HepG2中 ,通过流式细胞仪及生长曲线观察其对HepG2细胞周期及细胞生长的影响。利用Western Blotting方法及 p2 1waf1启动子荧光素酶活性检测p14 ARF对HepG2细胞 p5 3蛋白表达的影响。 结果 转染p14 ARF基因的HepG2细胞的生长速度从第 3天开始较空载体 pcDNA 3组减慢 ,处在G0 G1期细胞数 ( 70 .6 6 % )与空载体组 ( 6 1.5 5 % )相比明显增加 ,转染 pcDNA3p14 ARF( 1.0 92 3± 0 .0 370 ) p2 1waf1启动子荧光素酶活性较空载体组( 0 .76 73± 0 .0 180 )明显升高 ( P <0 .0 5 )。Westernblotting结果表明 ,p5 3表达也明显增加。 结论p14 ARF基因通过上调HepG2细胞的 p5 3表达导致 p2 1waf1的表达升高使细胞阻滞于G0 G1期 ,从而抑制细胞的生长。 相似文献
9.
目的:研究刀豆素A(ConA)能否诱发昆明小鼠特发性肝损害。方法:ConA将刀豆素A用于昆明小鼠,并成功地诱发了T细胞介导的特异性肝脏损害。结果显示:该实验模型所造成的肝脏损害为ConA剂量依赖性:肝组织病理示,门管区大量淋巴细胞浸润,并可见点片状肝细胞坏死。以环孢霉素A(CSA)预先抑制T淋巴细胞活化,则未见肝脏损害,肝组甥病理也未发现淋巴细胞的浸润。结论:该实验模型进一步验证了ConA性肝损害为无种属特异性的T细胞依赖性肝损害模型,同时也为深人研究病毒性肝炎、自身免疫肝病等病理机制提供了又一方便、理想的实验模型。 相似文献
10.
不同p53状态的肝癌细胞系DNA损伤修复能力的比较 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 观察不同p53状态的肝癌细胞在DNA损伤因素存在下,探讨p53在肝细胞癌发生过程中的作用。方法 选用内源性表达野生型p53、突变型p53、p53全基因缺失的HepG2、PLC/PRF/5、Hep3B肝癌细胞系,将含有p53结合序列的CAT报告基因质粒分别转染各细胞,通过ELISA方法检测报告基因CAT活化情况,观察p53功能状态;用细胞生长曲线比较不同p53状态的细胞生长速度的差异;给予一定剂量的紫外线照射,检测各细胞程序外DNA损伤修复(UDS)能力;观察紫外线照射后细胞克隆形成情况,反映不同细胞系在紫外线照射后细胞存活率的不同。结果 报告基因CAT在HepG2细胞表达最强,而在PLC/PRF/5、Hep3B肝癌细胞均处于较低水平,说明HepG2细胞具有功能性的p53表达;HepG2细胞生长速度明显慢于其他两种细胞;紫外线照射后,HepG2具有较好的DNA损伤修复能力以及较高的细胞生存率。结论 野生型p53具有抑制肝癌细胞生长、保持细胞良好的DNA损伤修复的功能。 相似文献