p14ARF基因通过p53途径对肝癌细胞的生长的影响

目的　探讨 p14 ARF对含有野生型 p5 3(wtp5 3)的肝癌细胞生长的影响及其作用机制。方法　将含p14 ARF的基因转染到人肝癌细胞HepG2中 ,通过流式细胞仪及生长曲线观察其对HepG2细胞周期及细胞生长的影响。利用Western Blotting方法及 p2 1waf1启动子荧光素酶活性检测p14 ARF对HepG2细胞 p5 3蛋白表达的影响。 结果　转染p14 ARF基因的HepG2细胞的生长速度从第 3天开始较空载体 pcDNA 3组减慢 ,处在G0 G1期细胞数 ( 70 .6 6 % )与空载体组 ( 6 1.5 5 % )相比明显增加 ,转染 pcDNA3p14 ARF( 1.0 92 3± 0 .0 370 ) p2 1waf1启动子荧光素酶活性较空载体组( 0 .76 73± 0 .0 180 )明显升高 ( P <0 .0 5 )。Westernblotting结果表明 ,p5 3表达也明显增加。 结论p14 ARF基因通过上调HepG2细胞的 p5 3表达导致 p2 1waf1的表达升高使细胞阻滞于G0 G1期 ,从而抑制细胞的生长。     

Primary hepatic non-Hodgkin's lymphoma: a case report and review of the literature

~ hepatic lympholna (PHL) is very uncommon, with which most clinicians are not fallliar. We report a case Of p~ hepatic non-Hodgkin's lymphomawhoSe clinical ~stalons were Presented edng withP~ssiVe liVer failure, and the comet diagnosis wascoallrmed by liver biopsy. A review of the lite~re anddiscussion of PHL ~ also Presented.~ ~ ~sPatient A 32-year-old man was abbotted to ourdepallment on APril l, 1999 because of fatigUe, anowhaand loss Of weight for 5 months, feVer for 4 d. The onse…     

P53与乙型肝炎病毒增强子Ⅰ上游P53样应答元件结合序列关系研究

背景与目的:在前期工作中,我们经计算机序列分析发现,在乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)基因组增强子Ⅰ上游1047～1059 bp存在P53样应答元件结合序列5′-TGCC(G)TTGCCT-3′,体外实验应用凝胶迁移方法(EMSA和EMSSA)发现这段序列与P53蛋白能够进行特异性结合.本实验拟观察肝癌细胞中P53蛋白与HBV基因组P53样应答元件结合序列之间的关系.方法:报告基因质粒pX-CAT上游为X基因增强子和启动子序列,其中含有P53样应答元件结合序列5′-TGCGTTGCCT-3′.首先用PCR方法将pX-CAT质粒中5′-TGCGTTGCCT-3′进行点突变,成为5′-TGTATTGTAT-3′,以破坏P53样应答元件结合序列.将pX-CAT和变异后的pX-CAT(mpX-CAT)分别单独或与pCMV-p53质粒共转染HepG2细胞,通过检测报告基因CAT的活化情况,观察P53蛋白与这段DNA序列的作用关系.将HBV基因P53样应答元件结合序列反向构建于真核表达质粒pZeoSV2中(αpZeoXP),转染HepG2.2.15细胞并稳定筛选,以封闭HBV基因上P53样结合位点,观察细胞中P53/P21蛋白表达的改变,以及细胞周期、细胞凋亡的变化.结果:HepG2细胞中,报告基因CAT活性在pCMV-p53与pX-CAT共转染组较pX-CAT单独转染组明显升高(1.353 vs 0.738,P＜0.05),而mpX-CAT单独转染组CAT活性则明显降低(0.304),即使与pCMV-p53共转染CAT活性也较低(0.402).与对照组相比,稳定转染了αpZeoXP的HepG2.2.15细胞中,P53、P21蛋白表达水平降低;细胞周期检测显示,与对照组相比,处于S期的细胞数增多(16.37%vs 9.48%),而细胞凋亡数减少(0.95%vs7.84%).结论:P53可促进pX-CAT报告基因在细胞内的表达,进一步提示P53与HBV增强子上游5′-TGCC(G)TTGCCT-3′序列存在结合作用,二者作用可能通过导致细胞内P53蛋白半衰期延长,而使细胞中P53及其下游基因P21蛋白表达水平和活性升高.     

不同p53状态的肝癌细胞系DNA损伤修复能力的比较

目的 观察不同p53状态的肝癌细胞在DNA损伤因素存在下，探讨p53在肝细胞癌发生过程中的作用。方法 选用内源性表达野生型p53、突变型p53、p53全基因缺失的HepG2、PLC／PRF／5、Hep3B肝癌细胞系，将含有p53结合序列的CAT报告基因质粒分别转染各细胞，通过ELISA方法检测报告基因CAT活化情况，观察p53功能状态；用细胞生长曲线比较不同p53状态的细胞生长速度的差异；给予一定剂量的紫外线照射，检测各细胞程序外DNA损伤修复(UDS)能力；观察紫外线照射后细胞克隆形成情况，反映不同细胞系在紫外线照射后细胞存活率的不同。结果 报告基因CAT在HepG2细胞表达最强，而在PLC／PRF／5、Hep3B肝癌细胞均处于较低水平，说明HepG2细胞具有功能性的p53表达；HepG2细胞生长速度明显慢于其他两种细胞；紫外线照射后，HepG2具有较好的DNA损伤修复能力以及较高的细胞生存率。结论 野生型p53具有抑制肝癌细胞生长、保持细胞良好的DNA损伤修复的功能。     

以消化道出血为主要症状过敏性紫癜的内镜表现

过敏性紫癜是一种血管变态反应性疾病,临床上分为单纯型、腹型、关节型、肾型及混合型,有皮肤症状时容易诊断,但部分患者皮疹出现晚于其他症状或仅表现为消化道出血,临床容易误诊。现回顾我院部分腹型紫癜患者的临床诊治情况,报道如下。     

自身免疫性胰腺炎诊治进展

自身免疫性胰腺炎(AIP)是一种由自身免疫介导、以胰腺肿大及胰管不规则狭窄为特征的胰腺慢性炎症性疾病,病理以胰管纤维化伴有淋巴浆细胞浸润为特征,其治疗尚缺乏统一标准。本文就自身免疫性胰腺炎的流行病学、发病机制、临床特点、影像学检查、病理学特点、诊断标准、治疗及预后七个方面的相关研究进展进行综述,以加深对其认识及了解。     

我国消化内镜传统诊治项目开展现状与分析:169家医院调查报告

目的 调查分析我国消化内镜传统诊治项目(常规胃肠镜检查、息肉切除等)开展状况.方法 以国内不同省份的各级医院消化内镜单元(室)为调查对象,采用电子邮件或电话问卷方式对我国消化内镜传统诊治项目开展状况进行调查分析.率的比较采用X2检验.结果 自2010年5月至11月,共有169家医院纳入本次调查,分布于28个省,占国内大陆省份的90.3％ (28/31),其中147家医院可开展消化内镜操作,占87.0％.在这147家医院中,所有医院(100％)均可开展常规胃镜检查,93.9％(138/147)的医院可开展肠镜检查,二、三级医院肠镜开展率(97.8％、100％)高于一级医院(25.0％,x2=60.9,P＜0.01);所有三级医院(100％)和79.8％(71/89)的二级医院能开展内镜下息肉切除术,明显高于一级医院(16.7％,x2=20.0,P＜0.01);在147家医院中,共有74家开展经内镜逆行胰胆管造影(ERCP),占50.3％,其中76.1％(35/46)的三级医院、43.8％(39/89)的二级医院可开展ERCP,三级医院高于二级医院(x2=12.7,P＜0.01);12家已开展消化内镜操作的一级医院中,均未开展ERCP、超声内镜检查(EUS)及食管静脉套扎+硬化(EVL+ EVS)治疗.结论 常规胃肠镜检查在我国二、三级医院已普及,一级医院还有较大提升空间;ERCP术及EVL+ EVS等传统消化内镜介入操作在三级医院较普及,二级医院有待提高.     

网膜填塞法闭合经自然腔道内镜手术胃壁瘘口的研究

目的应用动物模型评价网膜填塞法闭合经自然腔道内镜手术(NOTES)胃壁瘘口方法的可行性及有效性。方法 29只杂种犬经胃前壁内镜下全层切开(10 mm),经此入路完成NOTES腹腔探查术,其中12只应用网膜填塞法闭合胃壁瘘口(网膜填塞组),17只内镜钛夹闭合(钛夹组),闭合成功动物术后存活2周。比较两种胃壁瘘口闭合术的操作耗时、闭合成功率以及瘘口愈合和腹腔感染发生率。结果网膜填塞法闭合胃壁瘘口的成功率为91.7%(11/12),高于内镜下钛夹闭合方法成功率82.4%(14/17),但未见显著统计学差异(P>0.05);网膜填塞闭合法操作平均耗时(11.7±2.1)min/例次,明显低于钛夹闭合法(25.0±5.6)min/例次(P<0.05)。25只动物胃壁闭合成功后者术后均存活14 d,复查胃镜见胃壁瘘口愈合良好。处死后实验动物未发现腹腔严重感染及明显脏器损伤;网膜填塞组8只犬(72.7%,8/11)可见胃壁瘘口处胃壁浆膜面黏连,显著高于钛夹闭合组(14.3%,2/14,P<0.05)。结论网膜填塞法能有效闭合NOTES经胃壁瘘口,与传统内镜钛夹闭合法相比具有操作简单、成功率高的优点,但容易发生瘘口黏连是其明显不足。     

国内无痛胃肠镜开展近况调查

目的 调查国内医院无痛胃肠镜的开展近况.方法 以国内不同省份的各级医院消化内镜中心(室)为调查对象,采用电子邮件或电话问卷调查方式对无痛胃肠镜开展情况进行汇总分析.结果 共有169家医院纳入调查分析,分布于28个省(自治区或直辖市),占国内大陆省份的90.3％ (28/31),其中三级医院为46家,二级医院为91家,一级医院为32家.110家(65.1％,110/169)开展了无痛胃肠镜,其中93.5％ (43/46)的被调查三级医院、68.1％(62/91)的二级医院及15.6％ (5/32)的一级医院开展了无痛胃肠镜,三级医院开展率明显高于二级医院(P＜0.05),二级医院则显著高于一级医院(P＜0.05).在110家开展无痛胃肠镜的医院中,只有10家(9.1％)消化内镜室配备了专职麻醉医师,且这10家均为三级医院,占开展无痛胃肠镜三级医院的23.3％( 10/43).110家开展无痛胃肠镜的医院中,98家(89.1％)使用或联合使用丙泊酚作为镇静剂.结论 国内无痛胃肠镜在过去十余年内得到迅速发展,但一、二级医院开展率仍较低,且专职麻醉医师(或麻醉护士)普遍缺少是目前面临的主要问题.