老年人流行性出血热的临床分析

目的探讨老年流行性出血热患者的临床特点。方法对106例老年流行性出血热患者的临床资料进行回顾性分析,并与同期收治的非老年组流行性出血热患者进行比较。结果老年流行性出血热患者重型及危重型占84.9%,病程明显延长,并发症高于非老年组(P<0.05);少尿期老年组血尿素氮、肌酐浓度均明显高于非老年组,血小板明显低于非老年组(P<0.01)。病死率(12.3%)高于非老年组(2.0%)。丙氨酸氨基转移酶浓度比较两组无显著差异(P>0.05)。结论老年流行性出血热患者病情重,早期表现不典型,病程长,并发症多,病死率高;对其应力争早诊断、早治疗,注意防治各种并发症。     

IL-21在不同乙型肝炎病毒感染者外周血CD4~+T细胞中表达的初步研究

目的:探讨乙肝病毒感染不同临床表现患者外周血CD4+T细胞中IL-21表达的差异及其在发病机制中的作用。方法:分离乙肝病毒感染不同临床表现患者及健康人外周血单个核细胞(PBMC),使用PMA+ionomycin进行刺激,同时每份标本未加PMA+ionomycin刺激做阴性对照,流式细胞术(FCM)检测IL-21的表达情况及其与Th17细胞亚群的关系。结果:PMA+ionomycin刺激能够诱导IL-21的产生,产生IL-21的主要为CD4+T细胞,IL-17A+IL-21+CD4+T细胞几乎检测不到,IL-21+CD4+T细胞比例在急性乙型肝炎组、乙肝病毒携带组中较正常对照组和慢重肝组有所升高,Th17细胞亚群比例在各组中没有统计学差异;除急性乙型肝炎组外,其余各组中IL-21+CD4+T细胞比例与Th17细胞亚群比例均有较好的相关性。结论:IL-21在HBV感染不同临床表现患者外周血CD4+T的表达有一定差异,并且其与Th17细胞亚群有相关性,提示IL-21在HBV感染的发病机制可能发挥一定作用。     

慢性肝病中抗肝抗原自身抗体的检测

目的　探讨中国人不同病因所致慢性肝病患者中抗肝抗原自身抗体的存在状况及自身免疫性肝病的自身抗体特征。方法　 166例肝功能异常患者分为 6组 :自身免疫性肝炎 (AIH ) 12例、原发性胆汁性肝硬化 (PBC) 2 0例、原发性硬化性胆管炎 (PSC)13例、HBV组 66例、HCV组 2 2例、肝豆状核变性 (HDL) 3 9例。用间接免疫荧光法检测抗核抗体 (ANA)、平滑肌抗体 (SMA)、抗肝肾微粒抗体I型抗体 (anti LKM1)、抗线粒体抗体 (AMA)和抗中性粒细胞胞浆抗体 (ANCA) ,免疫印迹法检测抗肝细胞胞溶质抗原 1型抗体 (anti_LC1)、抗可溶性肝抗原 /肝胰抗原抗体 (anti_SLA/LP)、抗肝肾微粒抗体 1型 (anti_LKM1)、AMA_M2亚型等多种肝抗原自身抗体。结果　 166例中ANA、AMA、M_2、pANCA阳性率在 7组中有显著差异 (P <0 .0 1)。PBC中AMA、M 2阳性检出率均为 10 0 % ,PSC中pANCA阳性检出率为 5 3 8% ,Fisher精确检验在a =0 .0 0 2水准与其他各组比较有显著差异。AIH与PBC的ANA阳性率分别为10 0 %和 60 % ,Fisher精确检验在a =0 .0 0 2水准二者无显著差异。与其他各组比较有显著差异。在AIH组SMA阳性率为 2 5 % ,LKM 1、LC 1、SLA/LP阳性率均为 8.3 % ,统计学处理与其他组无显著差异 (P >0 0 5 ) ,可能与病例少有关。PBC中分别有 1     

RANTES和MIP-1α基因对HIV-1核酸疫苗诱导免疫应答的影响

目的　研究RANTES(活化T细胞调节的、正常T细胞表达和分泌的分子 )、MIP 1α(巨噬细胞炎症蛋白 1α)基因对HIV 1核酸疫苗诱导免疫应答的影响 ,以探求HIV 1核酸疫苗的新策略。方法　pCI neoGAG联合RANTES、MIP 1α基因或者pCI neoGAG单独免疫BALB c小鼠 ,采用ELISA检测免疫小鼠的特异性抗体和IFN γ水平 ,以MTT比色法检测免疫小鼠脾淋巴细胞的增殖 ,用乳酸脱氢酶 (LDH)试验检测小鼠特异性细胞毒性T淋巴细胞 (CTL)的应答。结果　与pCI neoGAG免疫组比较 ,pCI neoGAG联合RANTES、MIP基因免疫组小鼠血清的抗HIV 1p2 4抗体滴度升高 ,IFN γ升高 ,小鼠的脾淋巴细胞增殖实验刺激指数 (SI)以及特异性CTL活性均高 ,差异都有显著性 (P <0 .0 1)。结论　RANTES、MIP 1α基因联合HIV 1核酸疫苗免疫小鼠 ,可能增强特异性TH1细胞和CTL反应 ,RANTES、MIP 1α基因对体液免疫有加强作用。因此 ,RANTES、MIP 1α基因对于HIV 1核酸疫苗是具有较好应用前景的免疫佐剂。     

第60～80位氨基酸多肽片段缺失的HCV核蛋白在真核细胞中的表达

目的 : 构建丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)第60-80位氨基酸多肽缺失核蛋白的真核表达载体,并在真核细胞中表达. 方法: 用RT-PCR方法从西安地区丙型肝炎患者血清中扩增HCV C区及部分E1区基因并进行克隆、测序,以此为模板用重叠延伸拼接方法扩增第60-80 位氨基酸多肽基因缺失的核蛋白基因片段(C510),将其定向克隆入哺乳动物高效表达载体pCI-neo中,通过Lipofectamine2000转染入p815细胞,经间接免疫荧光染色、激光共聚焦显微镜和Western-Blotting方法检测细胞中目的蛋白的表达.结果: 从患者血清中成功克隆出HCV C区基因,序列及系统发生树分析结果显示为1b型;测序结果显示构建的第60-80位氨基酸多肽缺失核蛋白基因的重组真核表达质粒pCI-510基因序列准确;免疫荧光和免疫印迹方法均证实目的蛋白p170可在p815细胞中表达.结论: 重组体pCI-510构建正确,其目的基因在p815细胞中可有效表达,为进一步的研究奠定了基础.     

PBL教学法在传染病学临床实习教学中的合理应用

在传染病学临床实习中,使用以问题为基础的教学法(PBL),以期增强学生主动学习的积极性、改善教与学的互动性,提高采集分析临床资料的能力。作者就在传染病学临床实习教学中使用PBL教学法及相关问题进行了探讨。     

TLR4siRNA预处理防治小鼠急性肝损伤

目的急性肝功能衰竭是重要的临床综合征。近年来,对急性肝功能衰竭的治疗进展甚微,如何从根本上解决这一难题依然任重道远。方法本研究基于pSilencer4．1-CMVneosiRNA表达载体,设计并构建了TLR4siRNA表达载体。经体外细胞转染实验,筛选了3条抑制效果较好的表达载体,进一步行体内动物实验。进行酶切及测序鉴定,体外评估其对转染RAW26d．7细胞TLR4mRNA、蛋白表达水平的抑制作用,进一步评价了TLR4siRNA对TNF—α、MIP-2水平的影响,及对LPS诱导的丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路的作用;之后再采用3条抑制效率较高的TLR4siRNA进行体内试验,采用尾静脉高压水注射法转染C57BL／6小鼠,静默TLR4的表达,再采用D—GalN／LPS联合诱导小鼠急性肝损伤,观察TLR4siRNA对D—GalN／LPS诱导的肝损伤小鼠是否有保护作用,观察TNF-α、MIP-2水平的变化,观察肝细胞凋亡水平变化。结果D—GalN／LPS联合给药前48h及24hTLR4siRNA预处理可明显降低ALT及AST的升高幅度,TNF-α及MIP-2的mRNA及细胞因子水平亦被抑制,TUNEL阳性肝细胞百分率下降。TLR4siRNA预处理可明显减轻D—GalN／LPS对C57BL／6小鼠的肝损害作用,降低小鼠的死亡率。通过TLR4siRNA阻断TLR4表达可能有助于控制LPS炎性反应,防治肝损伤。结论通过本研究可望进一步阐明LPS／TLR4在急性肝衰竭发病机制中的作用,为今后从RNA角度治疗肝功能衰竭提供理论和实验依据。