应用RNA聚合酶Ⅰ反向遗传操作技术拯救汉滩病毒84FLi株微基因组

目的 建立基于汉滩病毒(HTNV)84FLi株L片段的RNA聚合酶Ⅰ微基因组拯救体系.方法 将含有氯霉素乙酰转移酶(CAT)编码区的cDNA插入含有HTNV 84FLi株L片段5'端和3'端非编码区的质粒内的两个非编码区之间,将此eDNA嵌合体(polⅠ表达盒)克隆人人polⅠ肩动子和终止子之间,分别获得正义和反义方向的RNA polⅠ转录报告质粒.用报告质粒转染293T细胞或等量293T和HTNV感染的Vero混合培养细胞,在HTNV的L蛋白和核衣壳蛋白表达质粒共转染后48 h收获细胞,检测CAT活性.用上清液感染293T细胞,了解CAT活性的传代能力.结果 构建了正义和反义方向的HTNV 84FLi株L片段微基因组RNA聚合酶Ⅰ报告质粒pLvRNA-CAT和pLcRNA-CAT,用此质粒转染细胞后能检测到CAT的表达,且CAT活性能在拯救病毒微基因组中传代.结论 应用RNA聚合酶Ⅰ反向遗传操作技术成功拯救了HTNV 84FLi株微基冈组.     

肝硬化患者腹水中细菌DNA的检测及临床意义

目的 利用PCR测序方法检测肝硬化患者腹水中的细菌DNA，探讨肝硬化患者发生细菌移位的高危因素及其后果。方法 在细菌16SrRNA基因保守区设计一对通用引物，对37份肝硬化患者腹水标本进行扩增，腹水中细菌DNA阳性者纯化后经核苷酸测序鉴别细菌种类；同时对患者的临床症状及实验室检查结果进行统计分析。结果 37份腹水标本中有9份获得530bp细菌DNA片段，占24．3％。测序共检测出4种细菌，其中大肠埃希菌6例，表皮葡萄球菌、溶血性链球菌、阴沟肠杆菌各1例；统计分析表明，腹水中细菌DNA阳性和阴性两组肝硬化患者在Child-Pugh积分（12．3±0．8，10．9±1．2）、上消化道出血的发生率（3例，1例）、血清TBil水平[（395．5±216．6）μmol／L，（192．7±206．3）μmol／L]、凝血酶原活动度[（31．3±9．7）％，（50．4±15．1）％]、腹水总蛋白浓度[（4．1±2．8）g／L，（7．9±5．2）g／L]、外周血WBC总数[（12．3±7．5）×10^9／L，（5．3±4．1）×10^9／L]等方面比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论 PCR测序方法可应用于肝硬化患者腹水中细菌DNA的检测及细菌移位的研究；肝功能损害、腹水调理活性低下和上消化道出血是肝硬化患者发生细菌移位的高危因素和后果。     

慢性乙型肝炎患者发生血清HBeAg阴转影响因素分析

目的 探索慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B,CHB）患者发生血清HBeAg阴转的影响因素，为CHB有效治疗提供依据。方法 在空军军医大学第二附属医院传染科门诊收集HBeAg阳性CHB患者，建立观察随访队列，定期随访和检测实验室检查指标，分析HBeAg阳性CHB患者随访期间血清HBeAg变化情况，根据患者血清HBeAg是否发生阴转将研究对象分为病例组（血清HBeAg阴转）和对照组（血清HBeAg未阴转），分析比较两组患者基线资料特点，并采用Cox单因素及多因素回归分析血清HBeAg阴转的影响因素。结果 共纳入HBeAg阳性CHB患者634例，共累计随访2 570.01人年，其中发生血清HBeAg阴转237例，平均随访时间为40.92月，血清HBeAg阴转率为9.22/100人年。血清HBeAg阴转组与血清HBeAg未阴转组在HBV家族史、抗病毒治疗、基线WBC、PLT、ALT、AST、T-Bil、GGT、AFP、HBsAg定量、HBeAg定量等指标差异有统计学意义（P<0.05）。Cox回归结果提示HBV家族史（HR=0.68,95%CI:0.50～0.92,P...     

肝细胞原代培养的常用添加物

随着肝细胞在生化研究、药代动力学研究、毒理学研究、人工肝支持系统及肝细胞移植方面越来越广泛的应用,如何获得完好无损的肝细胞及长期、稳定地培养活力和功能均良好的肝细胞,是首先要解决的问题。本文就肝细胞原代培养的常用添加物作了综述。     

肝硬化合并毛细血管渗漏综合征、甲状腺功能减退性肌病1例报告

<正>1病例资料患者男性,79岁,因"乏力、纳差1个月余,腹胀2周"于2018年9月27日入本院。查体:血压110/70 mm Hg,神志清,精神差,全身皮肤巩膜无黄染,未见蜘蛛痣、肝掌,心肺查体无明显异常,腹部膨隆,腹围103 cm,腹部无压痛及反跳痛,肝脾肋下未触及,肝肾区叩痛阴性,移动性浊音阳性,双下肢中度凹陷性水肿。既往史:确诊冠状动脉粥样硬化性心脏病1个月,服用     

IL-21与疾病关系的研究进展

白细胞介素21(IL-21)是2000年被发现的细胞因子,作为IL-2细胞因子家族的新成员,参与多种免疫学功能,参与固有免疫应答和适应性免疫应答。IL-21具有多效性,与其受体结合后不仅可以促进淋巴样细胞的增殖,增强CD8+T细胞和自然杀伤细胞的细胞毒作用,还可诱导B细胞分化为浆细胞,促进CD4+T细胞向Th17分化。IL-21与多种疾病的发展也密切相关。本综述旨在介绍IL-21的生物学特性基础上,重点阐述它与疾病的关系的研究进展。     

肝硬化合并自发性细菌性腹膜炎的诊断现状及研究进展

自发性细菌性腹膜炎 (spontaneousbacterialpentonitis,SBP)是肝硬化合并腹水患者常见而严重的并发症。随着对SBP研究的不断深入 ,既往制定的SBP诊断标准 ,现已不能满足临床要求 ,本文就有关肝硬化合并SBP的诊断现状和近年来研究进展作了综述。     

老年肾综合征出血热的临床分析

0引言肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)是一种自然疫源性急性传染病,病情凶险,变化迅速,特别是老年HFRS,患者死亡率高(16.4%～38.1%)[1].现将唐都医院感染病科近3a以来收治的出血热患者报告如下.     

血管内皮细胞抗汉坦病毒的固有免疫

汉坦病毒(Hantavirus, HV)包括引起肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome, HFRS)的汉滩病毒(Hantaan virus, HTNV)、汉城病毒(Seoul virus, SEOV)、普马拉病毒(Puumala virus, PUUV)、多布拉伐病毒(Dobrava virus, DOBV)和引起汉坦病毒肺综合征(hantavirus pulmonary syndrome, HPS)的辛诺柏病毒(Sin nombre virus, SNV)、纽约病毒(New York virus, NYV)、牛轭湖病毒(Bayou virus, BAYV)、安第斯病毒(Andes virus, ANDV)以及与人类关系尚不清楚的一组病毒, 如希望山病毒(Prospect Hill virus, PHV)、图拉病毒(Tula virus, TULV)等.