化妆品中金黄色葡萄球菌焦磷酸测序检测方法的研究

本研究采用焦磷酸测序法对nuc基因的保守片断进行测序,分别对36株金黄色葡萄球菌和30株非金黄色葡萄球菌进行了特异性和复现性实验,并在化妆品中进行了方法验证,建立了化妆品中鉴定金黄色葡萄球菌的焦磷酸测序法,结果表明,本方法具有准确、快速的特点,可满足金黄色葡萄球菌的高通量鉴定的需求。     

国外禽畜胴体非破坏性微生物样品采集方法分析

屠宰生产线上禽畜胴体微生物样品采集方法分可破坏性采样和非破坏性采样。本文收集并分析了国际标准化组织(International Standardization Organization,ISO)、美国农业部、新西兰食品安全局以及澳大利亚检验检疫局关于禽畜胴体非破坏性微生物样品采集的方法,其包括湿-干拭子法(wet and dry swab method)、海绵拭子法(sponge sampling method)和纱布敷料法(gauze tampon method)、胴体冲洗采样法,不同屠宰工艺不同微生物目标其采样时机、采样位点、采样频率和微生物限量不尽相同,以期为我国禽畜产品加工生产和安全监控提供采样技术参考。     

沙门氏菌的依赖于核酸序列恒温扩增检测方法的建立

采用自行建立和优化的依赖于核酸序列恒温扩增(nucleic acid sequence-based amplification,NASBA)检测体系,对沙门氏菌进行检测。采用沙门氏菌的invA基因为目的片段设计特异性引物,建成可快速检测沙门氏菌的NAS-BA检测法,并进行了特异性和灵敏度试验。结果表明:所建立起的NASBA检测方法,灵敏度为7.1×102cfu/ml,高于普通PCR方法。     

我国婴幼儿食品致病细菌的耐药性监测

本实验从95份婴儿食品中,检出共29株菌株,包括8株阴沟肠杆菌、5株非脱羧勒克氏菌、2株少动鞘氨醇单胞菌、3株屎肠球菌、2株鹑鸡肠球菌、3株阪崎杆菌、2株泛菌属、2株产酸克雷伯氏菌、1株植生拉乌尔菌及1株解鸟氨酸拉乌尔菌.并对这29株菌株进行了耐药性监测,发现其中只有泛菌属对18种抗生素全敏感,其它9类菌株均产生了不同程度的耐药,同一菌株对不同的药物的抗药性不同,不同菌株对同一药物的抗药性也不同,并且普遍出现多重耐药现象.耐药率12.5%～100%,其中耐药率最高的是氨苄西林(AM).     

葡萄糖诱导的线粒体蛋白氧化应激及调控机制概述

食品中的葡萄糖是人体细胞获取能量的重要来源,细胞中的线粒体是重要的能量代谢场所,在维持人体正常生理代谢功能中起重要作用。但葡萄糖代谢异常会导致线粒体功能紊乱,这是通过葡萄糖诱导的氧化应激导致的线粒体蛋白功能异常,进而引发相关疾病,例如糖尿病、阿尔茨海默症和脑中风。所以维持线粒体生理功能,研究氧化应激调控机制,探究相关疾病更有效的治疗手段至关重要。本文综述了氧化应激涉及的主要线粒体蛋白(包括顺乌头酸酶、腺嘌呤核苷酸转位酶、二氢硫辛酰胺脱氢酶、线粒体蛋白复合物Ⅰ、雌激素受体β、热休克转录因子1和缺氧诱导因子2a)、氧化应激调控机制(包括丙酮酸调节、线粒体蛋白之间的协同调节)和人工干预过程(包括乙醇戒断、亚甲蓝作电子受体和5-甲氧基吲哚-2-羧酸预处理)。     

沙门氏菌invA基因重组质粒标准的构建

目的 研制沙门氏菌invA基因重组质粒,为分子生物学方法快速检测沙门氏菌提供质粒标准。方法 通过PCR扩增目的片段,连接至pMD 18-T载体,转化大肠杆菌DH5α,测序方法证实目的片段已成功重组,荧光定量PCR方法定性检测分析,采用PicoGreen DNA分子荧光定量方法对标准质粒分子进行定值。结果 invA基因目的片段成功重组至pMD 18-T载体上,荧光定量PCR结果显示制备重组质粒标准为沙门氏菌核酸标准,重组质粒标准的浓度为2.9 μg/mL。结论 成功构建沙门氏菌invA基因重组质粒,为快速检测沙门氏菌奠定了基础。     

用3M Petrifilm^TM测试片对出口花生仁中霉菌数量进行的调查研究

为了解出口花生霉菌污染情况,对2007年1～4月青岛口岸出口的花生仁进行了霉菌数量调查.结果发现,霉菌数初期比较高,随后逐月降低,4个月份的不合格率随时间明显降低.     

谷胱甘肽硫转移酶作为生物标记物在环境风险评估中的应用进展

水体、土壤等环境污染近年来呈加剧趋势,严重影响食物质量安全,威胁人类健康,环境污染物及其毒性效应研究越来越受到重视。谷胱甘肽硫转移酶(glutathione S-transferase,GST)作为分子水平上的生物标记物,由于具有特异性和预警性等特点受到广泛关注,在水体和土壤等环境生态风险评估中具有巨大的应用潜力。本文综述了GST作为指示环境污染早期预警指标的生态毒理学机制以及其对环境污染物的响应研究现状,指出了目前应用中存在的问题,并展望了其在环境风险评价中的发展趋势。     

NDM-1基因TaqMAN实时荧光PCR检测方法的建立

研究初步建立了NDM-1基因的实时荧光PCR快速检测鉴定方法。研究根据NDM-1序列,设计并合成了PCR检测引物(ND-T-F和ND-T-R)和探针(ND-T-PROBE),对NDM-1质粒DNA和其他11个标准菌株进行了实时荧光PCR检测。结果表明,携有NDM-1基因的质粒DNA模板都出现了很强的特异信号,而其他对照病菌均未出现特异荧光信号,证明这套引物及探针具有NDM-1基因检测的特异性。灵敏度测定结果,此体系可检出10fg/μL质粒DNA模板。研究表明,TaqMAN实时荧光PCR方法是一种特异、灵敏、快速的NDM-1基因检测方法。