化妆品中金黄色葡萄球菌焦磷酸测序检测方法的研究

本研究采用焦磷酸测序法对nuc基因的保守片断进行测序,分别对36株金黄色葡萄球菌和30株非金黄色葡萄球菌进行了特异性和复现性实验,并在化妆品中进行了方法验证,建立了化妆品中鉴定金黄色葡萄球菌的焦磷酸测序法,结果表明,本方法具有准确、快速的特点,可满足金黄色葡萄球菌的高通量鉴定的需求。     

UV-B辐射对南极冰藻中抗辐射物质的诱导作用

在人工UV－B辐照下培养5种南极冰藻，其中包括三种硅藻：H1硅藻（diatom H1),H2硅藻（diatom H2),H3硅藻（diatom H3)，两种绿藻：L1绿藻（Pyramimonas sp.)，L4绿藻（Chlorophyceae)。研究了UV－B辐射对南极冰藻中抗辐射物质的诱导作用。这些物质被认为具有抵抗UV－B辐射损害而提供保护的作用。结果表明，（1）UV－B辐射诱导产生大量的胞内多糖和胞外多糖物质，胞外多糖附着藻体；（2）UV－B辐射诱导产生新的水溶性色素类物质；（3）UV－B辐射诱导产生新的脂溶性色素类物质，不同种类冰藻产生的新色素的最大吸收峰不同，这些结果使我们初步认识了南极冰藻对南极强辐射环境的适应机理，并为进一步利用UV－B辐射培养南极冰藻产生抗辐射．抗肿瘤、清除自由基等新型活性物质提供依据。     

国外禽畜胴体非破坏性微生物样品采集方法分析

屠宰生产线上禽畜胴体微生物样品采集方法分可破坏性采样和非破坏性采样。本文收集并分析了国际标准化组织(International Standardization Organization,ISO)、美国农业部、新西兰食品安全局以及澳大利亚检验检疫局关于禽畜胴体非破坏性微生物样品采集的方法,其包括湿-干拭子法(wet and dry swab method)、海绵拭子法(sponge sampling method)和纱布敷料法(gauze tampon method)、胴体冲洗采样法,不同屠宰工艺不同微生物目标其采样时机、采样位点、采样频率和微生物限量不尽相同,以期为我国禽畜产品加工生产和安全监控提供采样技术参考。     

沙门氏菌的依赖于核酸序列恒温扩增检测方法的建立

采用自行建立和优化的依赖于核酸序列恒温扩增(nucleic acid sequence-based amplification,NASBA)检测体系,对沙门氏菌进行检测。采用沙门氏菌的invA基因为目的片段设计特异性引物,建成可快速检测沙门氏菌的NAS-BA检测法,并进行了特异性和灵敏度试验。结果表明:所建立起的NASBA检测方法,灵敏度为7.1×102cfu/ml,高于普通PCR方法。     

芽孢杆菌A-30碱性木聚糖酶用于麦草浆酶法改性的研究

从碱性土壤中分离得到一株耐碱性-β1,4-聚糖酶高产细菌A-30,经初步鉴定属短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)。采用麸皮为主要碳源,尿素为主要氮源,在pH值8.0、温度32℃,发酵至一定时间,最高木聚糖酶活可达400 IU/mL,纤维素酶活可达0.60 IU/mL以上。探讨了用其所产木聚糖酶处理漂白麦草浆以改善其性能的可能性。结果表明,A-30粗酶液可以改善草浆的滤水性、强度和脆性,最适宜的酶用量为2~5 IU/g浆。     

沙门氏菌invA基因重组质粒标准的构建

目的 研制沙门氏菌invA基因重组质粒,为分子生物学方法快速检测沙门氏菌提供质粒标准。方法 通过PCR扩增目的片段,连接至pMD 18-T载体,转化大肠杆菌DH5α,测序方法证实目的片段已成功重组,荧光定量PCR方法定性检测分析,采用PicoGreen DNA分子荧光定量方法对标准质粒分子进行定值。结果 invA基因目的片段成功重组至pMD 18-T载体上,荧光定量PCR结果显示制备重组质粒标准为沙门氏菌核酸标准,重组质粒标准的浓度为2.9 μg/mL。结论 成功构建沙门氏菌invA基因重组质粒,为快速检测沙门氏菌奠定了基础。     

RBT测井在Rumaila现场应用的分析

固井质量的好坏关系到一口井的生产寿命,而目前较多使用的水泥评价仪器多为CBL/VDL,测得的物理量都是井周响应的平均值,无法反映径向上水泥的不均匀分布,相邻产层间的连续水泥沟槽常常会导致管外层间的流体窜通,给油气井的正常开采带来问题。RBT径向水泥胶结测井仪器作为常规仪器使用在伊拉克的Rumaila项目,解决常规CBL仪器的不足。本文就RBT在伊拉克项目施工过程中所做的配套技术改进及应用情况进行了描述。     

土库曼气田碳酸盐岩储层裂缝有效性评价

土库曼斯坦T气田发育浅海相碳酸盐岩储层,物性差异大,储层渗透率以低中渗为主,裂缝是决定储层渗流能力、影响储层好坏的关键因素,对裂缝有效性进行评价具有重要意义.为此,利用交叉偶极子声波、测井资料结合成像进行裂缝有效性评价.研究证实,交叉偶板子声波与测井资料结合成像能较好地识别裂缝的有效性,并识别出渗透性较好的裂缝发育带.T气田3个构造区块裂缝性质分析表明,不同构造区块间的裂缝性质差异较大.通过地层最大主应力方向与张开裂缝方向对比分析,发现该气田A、D、F井地层裂缝区域有效性较差,裂缝宽度较窄,而B、C、E井地层裂缝区域有效性较好,裂缝宽度较宽,裂缝能较好地发挥其渗滤通道的作用.     

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析技术在微生物鉴定与分型中的应用

微生物的鉴定方法有很多种, 这些方法基于表型、免疫学、遗传学等, 目前普遍采用16S rRNA和18S rRNA基因测序为标准, 但这些方法也有一些局限性, 费时费力、操作复杂、劳动力和试剂成本都很高, 限制了在常规微生物检测实验室的普及与推广。近年来, 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法(matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS)在微生物学领域的应用越来越重要, 与应用于微生物鉴定的其他技术不同, MALDI-TOF MS更快速、准确、经济且易于操作。随着样品制备、数据库丰富和算法优化的发展, 使用MALDI-TOF MS进行鉴定的准确性和速度不断提高。虽然大多数研究都集中在细菌上, 但这项技术也应用于真菌和病毒。本文对MALDI-TOF MS技术对细菌、真菌、病毒鉴定与分型的研究进展以及目前该技术的局限性进行综述, 旨为该技术在临床诊断、食品检测等领域的多种应用奠定基础。     

奶粉中一株阪崎肠杆菌的鉴定及其挥发性产物分析

目的鉴定奶粉中一株阪崎肠杆菌分离菌株F2-1,采用顶空气相色谱-质谱联用法(headspace gas chromatography-mass spectrometry,HS-GC-MS)分析分离菌株F2-1在液态培养中产生的挥发性代谢产物。方法应用VITEK 2 Compact全自动微生物鉴定系统分析分离菌株的生理生化特征;利用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)特异性扩增检测分离菌株的16S rDNA,通过HS-GC-MS分析分离菌株F2-1代谢的挥发性产物。结果分离菌株F2-1为革兰氏阴性菌,生理生化特征与阪崎肠杆菌(Enterobacter sakazakii,ES)的相似性为99%,LAMP检测进一步确认为阪崎肠杆菌,分离菌株F2-1在营养肉汤中代谢的挥发性产物主要有异戊醛、乙醇、异戊醇、3-羟基-2-丁酮、乙酸、正十五烷、正十六烷、正十七烷、1-癸醇。结论奶粉中分离菌株F2-1鉴定为阪崎肠杆菌,该菌产生的挥发性产物为阪崎肠杆菌的快速鉴定提供参考。