多重实时荧光定量PCR分析转基因烟草外源基因拷贝数

[目的]采用多重实时荧光定量PCR方法在一个反应内同时检测转基因烟草中插入外源基因35S、NOS、NPT Ⅱ的拷贝数。[方法]将转基因阳性参照烟草基因组DNA经梯度稀释,通过多重荧光定量PCR反应同时获得烟草内源参照基因NR、外源基因35S、NOS、NPT Ⅱ的相关性标准曲线方程,将待测株系外源基因的Ct值代入标准曲线方程后估算其拷贝数。[结果]获得了上述4个基因的标准曲线,其R2均接近于1,相关性较高。在检测的六个转基因株系中初筛到3株3个外源基因均为单拷贝的株系。[结论]可使用该方法对转基因烟草外源基因插入拷贝数进行估算,为获得稳定遗传材料提供初筛依据。      

对改用循环水供热汽轮机的安全性分析

为了提高双抽汽供热汽轮机的热效率,改用循环水供热。机组运行方式变化后,就如何保证其安全性提出了许多问题,在热膨胀、力学、稳定运行等几个方面需要论证。通过理论计算及实践验证,调节抽汽式汽轮机改为循环水供热时,需重点关注的是机组振动及调节系统的稳定性。从安全角度出发,机组的振动值得注意;在稳定运行方面,只要循环水供热工况稳定,调节系统就能保持原有的稳定性。     

高压注水系统注水管网研究

注水是我国油田开发的一种十分重要的开采方式，是补充地层能量，维持油田长期高产稳产的有效、易行的方法，对我国原油生产具有举足轻重的作用。几十年来随着油田开发的需要，容器、设备、管线及道路越来越多，地面、地下纵横交锗，井、间、站星罗棋布，地面工程形成了非常庞大的网络体系，为研究整个注水系统各项技术指标(主要是压力和流量)造成了极大的困难。     

对汽轮机末级叶片实施防水蚀保护的实践体会

该文介绍了作为汽轮机末级叶片防水蚀保护措施的电弧喷涂技术,经过四年的运行考验,效果显著。建议展开对叶片防水蚀措施的深入研究及推广。     

烟草DELLA基因家族的克隆与表达模式分析

为明确烟草受逆境胁迫时DELLA基因家族的转录调节功能,通过烟草EST序列比对分析克隆了3个DELLA基因家族基因（NtDELLA1,NtDELLA2,NtDELLA3）,并对3个基因的结构和表达模式进行了分析。生物信息学分析结果表明,烟草DELLA基因全长1 700 bp左右,其编码蛋白包含DELLA蛋白的特征结构域DELLA基序和VHYNP基序,与拟南芥DELLA蛋白家族的GAI蛋白高度同源,推测烟草DELLA蛋白与拟南芥DELLA蛋白具有类似的功能;荧光定量PCR分析结果表明,这3个基因在烟草不同组织和关键生长发育时期表达模式类似,尤以茎中表达量最高;胁迫应答分析结果表明,烟草DELLA基因的转录对干旱、低温、烟草花叶病毒（Tobacco mosaic virus,TMV）侵染和外源激素均表现出不同程度的响应,其中干旱、赤霉素（GA）和脱落酸（ABA）可抑制烟草DELLA基因的表达,而低温胁迫可诱导NtDELLA1上调表达,TMV侵染可诱导NtDELLA1和NtDELLA2的大量表达。      

除氧器运行方式性能分析

用循环函数法对２００ＭＷ机组除氧器运行的经济性作了定量分析,指出了除氧器最佳运行方式,定性分析了各种运行工况下除氧器运行的安全性、可靠性。     

烟草糖基转移酶基因NtGT5a的克隆及原核表达

为揭示烟草糖基转移酶的活性及生物学功能,从烟草栽培品种中克隆了烟草糖基转移酶基因NtGT5a,基于GenBank的烟草糖基转移酶基因NtGT5a的核苷酸序列(GenBank登录号AB176523),设计并合成特异性引物,以红花大金元叶片总RNA为模板,通过RT-PCR方法获得了烟草糖基转移酶基因NtGT5a的cDNA片段。序列分析表明,该基因编码区为1458 bp,编码485个氨基酸残基,推测的蛋白分子量为54.21 kDa,理论等电点为5.41。通过构建重组表达载体pCold-SUMO-NtGT5a,并转化大肠杆菌BL21(DE3),在15Ⅲ下经0.2 mmol/L IPTG诱导22 h表达产生了SUMO-NtGT5a重组蛋白。重组蛋白部分以包涵体形式存在,部分以可溶性蛋白形式存在。将重组蛋白的可溶性组分经过Ni-NTA柱层析纯化和凝胶过滤层析,用SUMO蛋白酶切除SUMO标签,再用镍柱纯化获得了高纯度的NtGT5重组蛋白。     

600 MW机组负荷调节方式经济性分析

应用循环函数法定量分析了600MW机组采用滑压调节和定压调节的经济性,并从机组运行安全性方面进一步对滑压调节和定压调节作了分析比较。     

凝汽器传热端差的研究

真空度是汽轮机组安全经济运行的一个重要影响因素 ,而凝汽器传热端差又直接影响着真空度的高低。分析了凝汽器传热端差的影响因素 ,提出了降低端差的措施 ,以改善凝汽器的热交换效果 ,提高机组出力     

300MW汽轮机排汽通道气动性能的研究

引进型300MW汽轮机排汽通道内的流场极不均匀，通过风洞试验，适当地增加了一些导流板，使流场不均匀性得到了明显改善。既提高了机组的热效率，又延长了铜管的使用寿命，所提出排汽缸及凝汽器喉部联合吹风的方法是全面优化汽轮机排汽通道气动性能的有力手段。