牙龈卟啉单胞菌对人脐静脉血管内皮细胞生物学活性的影响

目的:观察牙龈卟啉单胞菌(porphyromonas gingivalis,Pg)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖和凋亡的影响,并探讨Pg对人脐静脉内皮细胞的毒性作用.方法:厌氧培养饴,原代培养HUVECs,用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)观察HUVECs的增殖情况;用凋亡试剂盒检测HUVECs凋亡状态.结果:Pg可以明显地抑制HUVEC的增殖,并可以引起HUVEC的凋亡.结论:Pg可以通过损伤人脐静脉内皮细胞而加重局部的炎性反应,可能是牙周炎诱发心血管疾病的病理机制之一.     

氯化镧对人牙龈成纤维细胞增殖的影响

目的:检测不同浓度氯化镧(La3 )对人牙龈成纤维细胞(HGF)增殖的影响。方法:体外培养HGF,用四唑盐法(MTT)检测6种浓度La3 (1×10-6、1×10-5、5×10-5、1×10-4、1×10-3及1×10-2 mol/L)对HGF的作用。结果: 1×10-2 mol/L的La3 能抑制HGF的生长, 1×10-6、1×10-5、5×10-5、1×10-4及1×10-3 mol/L的La3 对HGF生长无抑制作用。结论: 1×10-2 mol/L浓度的La3 对HGF增殖有抑制作用, 1×10-4 mol/L以下浓度的La3 对HGF无抑制作用。     

人牙周膜成纤维细胞在无血清培养液中的生长特性

目的：探讨人牙周膜成纤维细胞在无血清培养液中的生长特性。方法：用倒置显微镜和MTT法观察人牙周膜成纤维细胞在无血清培养液中的生长和增殖变化。结果：人牙周膜成纤维细胞在无血清培养条件下可以生长的增殖，但与含血清培养液相比，其增殖速率变缓，分化明显。结论：无血清培养液可应用于人牙周膜成纤维细胞的体外培养和实验研究中。     

硝苯地平性牙龈增生组织中成纤维细胞增殖和胶原分泌

目的探讨硝苯地平对牙龈组织中成纤维细胞增殖和胶原分泌的影响。方法体外原代培养硝苯地平易感性牙龈组织和非易感性组织中人牙龈成纤维细胞。MTT法观察硝苯地平对细胞增殖的影响,酶联免疫吸附试验检测硝苯地平对细胞Ⅰ型胶原表达水平的影响。结果在第1,3,5天,硝苯地平易感性牙龈组织和非易感性组织之间Ⅰ型胶原合成和细胞增殖在统计学上均有显著性差异。结论细胞增殖明显和胶原合成增加可能和硝苯地平药物性牙龈增生机制有关。     

唾液腺腺癌VEGF和NOS的表达与癌细胞增殖关系的研究

目的:研究唾液腺腺癌组织血管内皮生长因子(VEGF)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的表达与癌细胞增殖的相关性。方法:应用免疫组化方法检测47例唾液腺腺癌手术切除标本VEGF、iNOS、eNOS和增殖细胞核抗原(PCNA)的分布及表达。结果:①30例(63.83%)唾液腺腺癌组织表达VEGF,31例(65.96%)表达iNOS;33例(70.21%)表达eNOS;②VEGF与iNOS的表达具有明显相关性,VEGF与eNOS的表达无明显相关性;③表达VEGF的唾液腺腺癌PCNA标记指数(PLI)明显高于不表达VEGF的唾液腺腺癌;表达iNOS的唾液腺腺癌PLI明显高于不表达iNOS的唾液腺腺癌。表达eNOS的唾液腺腺癌PLI与不表达eNOS的唾液腺腺癌无显著差异(P>O.05)。结论:①VEGF与iNOS的表达具有明显相关性,说明iNOS在VEGF的生成和发挥作用过程中起重要作用;②PLI随着VEGF和iNOS表达的增加而增加;说明两者对唾液腺腺癌细胞增殖具有促进作用。     

沉默Mcpr1促进大鼠牙乳头细胞增殖

目的:观察用RNAi技术沉默Mcpr1对大鼠牙乳头细胞增殖能力的影响。方法:分离培养原代大鼠牙乳头细胞,用LipofectamineTM 2000将具有沉默Mcpr1作用的质粒pGenesil-shRNA、阴性对照的空载体转染大鼠牙乳头细胞,荧光显微镜观察转染效率,半定量PCR检测沉默效率,噻唑蓝(MTT)检测沉默Mcpr1后牙乳头细胞增殖能力的改变,流式细胞仪检测沉默Mcpr1后细胞周期的变化。结果:转染pGenesil-shRNA48 h后,Mcpr1的表达明显受到抑制,MTT结果显示转染pGenesil-shRNA后沉默组较未沉默组光吸收值明显增高,流式细胞仪检测沉默后的细胞周期在G0/G1期细胞比例明显下降。结论:pGensil-Mcpr1 shRNA载体能够抑制目的基因的表达。Mcpr1基因对牙乳头细胞的增殖具有明显的抑制作用。     

人牙本质涎蛋白对体外培养的人牙乳头间充质细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响

目的 :观察人牙本质涎蛋白对体外培养的人牙乳头间充质细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响。方法 :分对照组和实验组 ,对照组是转染不含目的基因的空白质粒 pcDNA3的培养上清 ,实验组是转染pcDNA3 -hDSP重组质粒的培养上清。取第 5代人牙乳头间充质细胞 ,接种于 96孔板 ,对照组 6孔 ,实验组 10孔 ,用MTT法检测hDSP对体外培养的人牙乳头间充质细胞增殖的影响 ,用碱性磷酸酶检测试剂盒检测hDSP对体外培养的人牙乳头间充质细胞碱性磷酸酶活性的影响。结果 :hDSP能明显抑制体外培养的人牙乳头间充质细胞增殖 (P <0 .0 1) ,但能促进细胞内和培养上清中碱性磷酸酶的分泌 (P <0 .0 1)。结论 :hDSP能促进人牙乳头间充质细胞的分化和矿化     

NCAM基因对人涎腺腺样囊性癌细胞系SACC-83生长抑制作用的研究

目的 探讨NCAM基因对人涎腺腺样囊性癌细胞株SACC-83体外生长的抑制作用.方法 应用电穿孔转染方法将NCAMcDNA转入人涎腺腺样囊性癌细胞系SACC-83中,经G418筛选2～3周,用兔抗人NCAM抗体进行免疫组化染色鉴定,然后绘制细胞生长曲线,进行软琼脂培养.结果 应用电穿孔方法可成功将NCAM基因转染入人涎腺腺样囊性癌细胞株SACC-83中,免疫组化染色鉴定显示转染NCAM的SACC-83细胞有NCAM蛋白的表达.与对照组相比,经NCAM基因转染后的SACC-83细胞增殖明显受到抑制.转染了NCAM基因的SACC-83细胞克隆形成率明显降低.结论 NCAM基因对人涎腺腺样囊性癌细胞系SACC-83的生长有一定的抑制作用.     

过表达miR-218对舌鳞癌细胞系SCC-4和SCC-9的增殖和侵袭的影响

目的 探讨miR-218在舌鳞癌细胞中的表达,以及对细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法 在人舌鳞癌细胞系SCC-4和SCC-9中分别转染negative control、miR-218模拟物和抑制剂,然后利用MTT法检测细胞增殖活性;通过流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡;通过Transwell实验检测细胞侵袭能力,采用GraphPad 7.0软件包对数据进行统计学分析。结果 与对照组相比,转染miR-218 抑制剂的SCC-4和SCC-9细胞,细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡和侵袭能力无显著改变;而转染miR-218 模拟物的细胞,增殖能力变弱,凋亡数增加,侵袭能力显著降低。结论 miR-218在口腔癌中的表达量和细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡和侵袭能力相关,提示miR-218与口腔癌的发生、发展有一定关系。     

大鼠牙本质基质蛋白1对人牙髓细胞增殖和ALP活性的影响

目的 :探讨大鼠牙本质基质蛋白 1(DMP1)对体外培养的人牙髓细胞增殖和ALP活性的影响。方法 :利用MTT法研究牙髓细胞的细胞增殖情况 ,碱性磷酸酶检测试剂盒检测牙髓细胞内ALP活性。结果 :DMP1在细胞培养 3d和 5d时 ,5 μg/mL组可促进人牙髓细胞增殖 (P <0 .0 5 )。细胞培养 3d时 ,仅5 μg/mL组可促进人牙髓细胞ALP活性 (P <0 .0 5 ) ;培养 5d时 1μg/mL和 5 μg/mL均可促进人牙髓细胞ALP活性 (P <0 .0 5 ) ;培养 7d时促进作用进一步加强 (P <0 .0 5 )。结论 :DMP1在一定浓度下可促进牙髓细胞的增殖 ;DMP1对牙髓细胞ALP活性的促进作用呈浓度依赖性 ,高浓度DMP1可以促进人牙髓细胞ALP活性 ,随着时间的延长 ,促进ALP活性的作用也增强。