舌鳞癌预后与细胞增殖和凋亡的关系

目的：探讨舌鳞癌预后与细胞增殖和凋亡的关系。方法：采用TUNEL法和免疫组织化学法检测52例舌鳞癌细胞中自发性凋亡水平及Bax、Bcl-2、增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclea antigen,PCNA)的表达，及其与预后的关系。结果：舌鳞癌中凋亡指数（apoptosis index,AI)、Bcl-2、Bax和PCNA表达的阳性率分别为55．8％、65．4％、73．1％和100．0％。单因素生存分析显示：舌癌患者生存率降低与Bax低表达（P＝0．0020）、PCNA高表达（P＝0．0179）、Bcl-2/Bax比值＞1（P＝0．0072）和高TNM分期（P＝0．0351）有关，但与Bcl-2表达和凋亡指数无关（P＝0．885，P＝0．3536）。结论：Bax、PCNA、Bcl-2/Bax比值和TNM分期一样具有预后价值，综合分析这些指标有助于识别舌癌的生物学特性并准确判断患者的预后。     

Torin2对人甲状腺乳头状癌细胞株生物学行为影响的研究

目的 探索一种新的二代哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)抑制剂9-(6-氨基-3-吡啶基)-1-[3-(三氟甲基)苯基]苯并[H]-1,6-萘啶-2(1H)-酮(Torin2)对人甲状腺乳头状癌(PTC)细胞生物学行为的影响,以期为临床靶向治疗PTC提供新的理论依据.方法 对人PCT的TPC-1细胞株和正常甲状腺Nthy-ori-3细胞株运用不同浓度Torin2,分别采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖能力,流式细胞仪分析细胞周期、凋亡情况,划痕愈合实验分析细胞迁移能力.结果 ① 与用药前相比,Nthy-ori-3细胞株均无明显变化;②各浓度(100、200、400 nmol/L)Torin2作用于TPC-1细胞24、48、72 h后,细胞增殖抑制率上升,差异有统计学意义(P<0.001),且随作用时间延长(24、48、72 h)和浓度增加,对细胞增殖抑制作用增强;③各浓度(100、200、400 nmol/L)Torin2作用于TPC-1细胞24、48 h后,G1期细胞比例逐渐增加,S期细胞比例逐渐下降,且具有时间和浓度依赖性,差异有统计学意义(P<0.001);④各浓度(100、200、400 nmol/L)Torin2作用于TPC-1细胞24、48 h后,细胞的凋亡率亦上升,呈现浓度依赖效应,差异有统计学意义(P<0.001);⑤ 各浓度(100、200、400 nmol/L)Torin2均可抑制TPC-1细胞的迁移,且随浓度的增加抑制能力越强,差异有统计学意义(P<0.001).结论 Torin2可抑制TPC-1细胞的增殖及迁移、阻滞细胞周期、诱导细胞凋亡,并随着Torin2浓度的增加和作用时间延长而增强.     

长链非编码RNA-EPIC1在前列腺癌中的表达及其临床意义

目的 探讨表观遗传诱导LncRNA-1(EPIC1)在前列腺癌(PCa)中的表达情况及其临床意义.方法 收集2017年3月至2020年1月在合肥市第八人民医院、合肥市第二人民医院及安徽医科大学第一附属医院确诊的10例PCa患者手术后癌组织和癌旁正常组织,通过实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测EPIC1在患者手术组织、正常前列腺细胞系和PCa细胞系中的表达差异.用siRNA技术抑制PCa细胞系中EPIC1的表达,观察其对细胞增殖和侵袭能力的影响.另检测69例PCa患者癌组织中EPIC1的表达情况,分析EPIC1的表达水平与患者临床病理和生存资料之间的关系.结果 EPIC1在PCa细胞系PC3、DU145中的表达量分别为(0.12±0.02)和(0.20±0.03),高于在正常前列腺细胞系RWPE-1中的表达量,差异有统计学意义(P<0.05).EPIC1在患者PCa组织中的平均表达量为(0.61±0.05),高于在癌旁正常组织中的平均表达量,差异有统计学意义(P<0.05).用siRNA抑制EPIC1的表达后,PCa细胞的增殖和侵袭能力下降;EPIC1的表达程度与肿瘤的Gleason评分、TNM分期和淋巴结转移明显相关(χ2=4.949、6.040、5.650,P<0.05),但与患者年龄、PSA水平等无明显相关性(χ2=0.007、1.516,P>0.05).以EPIC1的平均值为界,将患者分为EPIC1高表达组和低表达组,生存分析结果显示,EPIC1高表达组和低表达组患者的3年生存率分别为53.7％、78.1％,两组生存率的差异有统计学意义(P<0.05).结论 EPIC1在PCa中表达增高,EPIC1能促进PCa细胞的增殖和侵袭,EPIC1高表达的患者预后较差,EPIC1可做为PCa肿瘤转移和判断预后的有效辅助指标.     

小鼠釉质发育过程中成釉器中间层细胞增殖、凋亡以及组织非特异性碱性磷酸酶的表达

目的:观察小鼠釉质发育过程中成釉器中间层细胞的增殖、凋亡和其组织非特异性碱性磷酸酶(tissue nonspecific alkaline phosphatase,TNSALP)的表达,探讨中间层在釉质形成过程中的可能作用.方法:取出生后1、3、5、7、9、11、15d的BALB/c小鼠56只,解剖分离含下颌第一磨牙区的下颌骨,脱钙,制片,HE染色进行牙釉质发育情况的组织学观察,分别采用原位末端标记法(TUNEL法)、SP免疫组织化学技术、PV二步法观察中间层细胞的凋亡及检测Bcl-2、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA),并对TNSALP进行组织学定位.通过Image-pro plus 6.0图像分析软件.对图像进行半定量分析.采用SPSS13.0软件包进行t检验、单因素方差分析及SNK-q检验.结果:出生后1d.中间层细胞增殖细胞核抗原由比成釉细胞表达高的强阳性表达逐渐降低;至7d时,其表达为阴性,而且中间层细胞随釉质的发育逐渐凋亡.中间层细胞先于成釉细胞表达TNSALP,出生后5d时即呈现强阳性染色,而后其表达又逐步减弱;成釉细胞7d时开始出现阳性,且呈逐渐增强趋势.结论:中间层细胞的增殖和凋亡及其TNSALP的表达与成釉细胞具有相关性,提示中间层细胞有可能参与成釉细胞的分化及釉质形成.     

Smad7反义寡核苷酸对TGF-β1调控人牙髓细胞生长和分化的影响

目的 :观察Smad7反义寡核苷酸对转化生长因子 β1(transforminggrowthfactor -β ,TGF -β1)调控人牙髓细胞生长和分化的影响。方法 :细胞培养 ,细胞转染 ,MTT比色测定法和碱性磷酸酶活性测定法。结果 :Smad7反义寡核苷酸促进TGF -β1对人牙髓细胞增殖的诱导作用和对碱性磷酸酶活性的抑制作用。 结论 :Smad7参与介导TGF -β1对人牙髓细胞增殖和ALP活性的调控 ,提示TGF -β1调控人牙髓细胞生长和分化可能是通过Smad信号途径发生的     

LncRNA GASL1通过Wnt/β-catenin信号通路促进血管平滑肌细胞增殖

目的 探讨lncRNA GASL1能否通过激活Wnt/β-catenin信号通路,促进血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖.方法 构建lncRNA GASL1 相关的mRNAs共表达网络,并对其进行信号通路分析.将lncRNA GASL1(lncRNA GASL1组)或lncRNA NC(lncRNA NC组)分别转染人动脉VSMCs,采用CCK-8法检测lncRNA GASL1对VSMCs细胞活力的影响,免疫荧光检测增殖相关蛋白bcl-2的表达,Western blot检测Wnt/β-catenin信号通路蛋白的变化,最后将lncRNA GASL1和Wnt/β-catenin通路抑制剂(ICG001)加入VSMCs细胞共培养,检测VSMCs细胞活力及bcl-2蛋白变化.结果 lncRNA GASL1 相关的mRNAs共374个,Pathway分析显示lncRNA GASL1 与Wnt/β-catenin通路相关性最高.CCK-8检测结果显示:lncRNA GASL1组细胞活力高于lncRNA NC组细胞;Western blot结果显示:lncRNA GASL1组细胞Wnt1、β-catenin蛋白含量高于lncRNA NC组;免疫荧光观察显示:lncRNA GASL1 组bcl-2蛋白含量高于lncRNA NC 组(P＜0.05).将lncRNA GASL1 与ICG001 共培养VSMCs细胞后,CCK-8检测显示:lncRNA GASL1+ICG001组细胞活力低于lncRNA GASL1+对照剂组;免疫荧光观察显示:lncRNA GASL1+ICG001组bcl-2蛋白含量低于lncRNA GASL1+对照剂组;差异均具有统计学意义(P＜0.05).结论 lncRNA GASL1可促进血管平滑肌细胞增殖,阻断Wnt/β-catenin信号通路后,lncRNA GASL1对血管平滑肌的促增殖作用下降.     

羽扇豆醇调控miR-100-5p对非小细胞肺癌NCI-H1299细胞生物学行为的影响

目的 探讨羽扇豆醇调控miR-100-5p对非小细胞肺癌（NSCLC）NCI-H1299细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法 将体外培养的NCI-H1299细胞分为正常对照（NC）组（未处理）、低剂量组（12.5μmol/L羽扇豆醇）、中剂量组（25μmol/L羽扇豆醇）、高剂量组（50μmol/L羽扇豆醇）、miR-NC组（转染miR-NC）、miR-100-5p组（转染miR-100-5p）、anti-miR-NC+高剂量组（转染anti-miR-NC后用50μmol/L羽扇豆醇处理）、anti-miR-100-5p+高剂量组（转染anti-miR-100-5p后用50μmol/L羽扇豆醇处理）。CCK-8和克隆形成实验检测NCI-H1299细胞增殖;Transwell法检测NCI-H1299细胞迁移和侵袭。荧光定量PCR(q PCR)检测miR-100-5p表达;Western blot检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶（MMP）2和MMP9蛋白的表达。结果 与NC组比较,低、中、高剂量组NCI-H1299细胞活力、细胞克隆数、迁移数、侵袭数、CyclinD1、...     

m6A识别蛋白HuR调控lncRNA TRG-AS1抑制结直肠癌生长的机制研究

目的 探讨N6-甲基腺苷（m6A）识别蛋白人类抗原R(HuR)调控长链非编码RNA T细胞受体γ位点反义RNA 1(lncRNA TRG-AS1)对结直肠癌（CRC）生长的影响。方法 比色法检测CRC患者的癌组织、癌旁组织及正常结肠上皮细胞NCM460及CRC细胞HCT116、SW480、LOVO中m6A含量;实时荧光定量PCR(qPCR)检测TRG-AS1表达;Western blot检测HuR蛋白表达。将HCT116细胞分为Ct组、OE-NC组、OE-HuR组、si-NC组、si-HuR组、siHuR+pcDNA组、si-HuR+pcDNA-TRG-AS1组,CCK-8法检测细胞增殖;平板克隆实验检测细胞克隆形成能力;流式细胞术检测细胞凋亡率;划痕愈合实验检测细胞迁移;Transwell检测细胞侵袭;裸鼠体内移植瘤实验观察肿瘤生长情况;采用甲基化RNA免疫共沉淀（MeRIP）检测TRG-AS1上是否存在m6A位点;RNA pull-down实验和RNA免疫共沉淀（RIP）检测TRG-AS1与HuR蛋白的相互作用。结果 在CRC组织和细胞中,HuR蛋白、TRG-AS1高表达,m6A含...     

紫草素调节Notch信号通路对肝癌细胞恶性生物学活性的影响

目的 探讨紫草素（SHI）调节Notch信号通路对肝癌细胞恶性生物学活性的影响。方法 采用Western blot分别检测肝癌组织、癌旁组织、肝癌细胞（HepG2、Hep3B、HCCLM3、Huh-7、SMMC-7721细胞）及正常肝细胞（HL-7702细胞）中Notch、发状分裂相关增强子-1(HES1)、hairy相关转录因子1(HEY1)蛋白表达;将Huh-7细胞分为对照组、L-SHI组（1μmol/L SHI）、M-SHI组（2μmol/L SHI）、H-SHI组（4μmol/L SHI）、DAPT组（50μmol/L Notch信号抑制剂DAPT）、H-SHI+丙戊酸（VPA）组（4μmol/L SHI和8 mmol/L Notch通路激活剂VPA）。CCK-8法和平板克隆实验检测Huh-7细胞增殖;流式细胞术检测Huh-7细胞凋亡以及细胞周期;细胞划痕实验以及Transwell侵袭实验分别检测Huh-7细胞迁移和侵袭情况;Western blot检测上皮间质转化（EMT）及凋亡相关蛋白表达。结果 Notch、HES1、HEY1在肝癌组织和细胞中表达水平明显升高,且Huh-7...